一种分离纯化恩拉霉素A和恩拉霉素B的方法技术

本发明专利技术一种分离纯化恩拉霉素A和恩拉霉素B的方法，包括以下步骤：1）将正丁醇、正己烷、三氟乙酸水溶液按体积比4～5:0.2～1:4～5.8混合，然后剧烈振摇，超声波脱气，静置分层，上相为固定相，下相为流动相；2）称取含恩拉霉素A和恩拉霉素B的混合物，用下相溶解，超声脱气后作为分离样品溶液备用；3）分离纯化。本发明专利技术通过溶剂系统的建立，使恩拉霉素A和恩拉霉素B在溶剂系统中的分配系数KA和KB在0.5～2，分离因子α（KB/KA)>2，最后通过对高速逆流色谱仪的电机转速和流动相流速进行控制，使得恩拉霉素A和恩拉霉素B被有效分开。本发明专利技术操作简单，重现性好，分离成本低，分离量大且产品回收率高。

A Method for Isolation and Purification of Enramycin A and Enramycin B

The method for separating and purifying Enramycin A and Enramycin B includes the following steps: 1) mixing n-butanol, n-hexane and trifluoroacetic acid aqueous solution in volume ratio of 4-5:0.2-1:4-5.8, then shaking violently, ultrasonic degassing, static stratification, stationary phase in the upper phase and mobile phase in the lower phase; 2) weighing Enramycin; The mixture of mycin A and enramycin B is dissolved in the lower phase and used as a sample solution after ultrasonic degassing. 3) Separation and purification. By establishing a solvent system, the distribution coefficients KA and KB of enramycin A and B in the solvent system are 0.5-2, and the separation factor alpha (KB/KA) > 2. Finally, the motor speed and the flow velocity of the mobile phase of the high-speed counter-current chromatograph are controlled, so that enramycin A and enramycin B are effectively separated. The invention has the advantages of simple operation, good reproducibility, low separation cost, large separation amount and high product recovery.

【技术实现步骤摘要】
一种分离纯化恩拉霉素A和恩拉霉素B的方法
本专利技术属于分离纯化
，特别涉及一种应用高速逆流色谱分离恩拉霉素A、B组分的方法。
技术介绍
恩拉霉素(enramycin)是放线菌Streptomycesfungicidious发酵产生的由17种氨基酸和13种不同短链脂肪酸所组成的环状多肽，根据其末端所连脂肪酸种类的不同，可分为恩拉霉素A(C107H138Cl2N26O31)和恩拉霉素B(C108H140Cl2N26O31)组份，它们同时存在于Streptomycesfungicidious菌丝体内。目前市售恩拉霉素产品中都是含有恩拉霉素A和恩拉霉素B的混合物。恩拉霉素对梭状芽孢杆菌、链球菌、葡萄球菌和肺炎双球菌等革兰氏阳性菌有强大的抑菌活性，对革兰氏阴性菌无抗菌作用，能够调节动物胃肠道菌群，是一种新型促生长素类饲料添加剂。随着人们对环境污染和自身健康问题的越来越重视，恩拉霉素因为它的动物安全性、可降解性、低残留、无抗药性及对畜禽及鱼类有着稳定而良好的促生长性，日益受到人们的青睐。自1974年上市以来，在美国、欧盟、日本等50多个国家得到广泛的应用，我国农业部于1993年正式批准恩本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离纯化恩拉霉素A和恩拉霉素B的方法，其特征在于包括以下步骤：1）溶剂系统的配制:将正丁醇、正己烷、三氟乙酸水溶液按体积比4～5 : 0.2～1 :4～5.8混合，然后剧烈振摇5～10min，超声波脱气10～20min后，置于分液漏斗中，静置分层，分层后上相溶液作为固定相，下相溶液作为流动相；2）样品的制备：称取一定量的含恩拉霉素A和恩拉霉素B的混合物，用下相溶液溶解，超声脱气后作为分离样品溶液备用；3）分离纯化：用计量泵以最快流速将固定相注满螺旋管后，开启直流电机转速调至600～700rmp，将流动相以1～2.5mL/min的流速从首端泵入，在色谱柱尾端用量筒收集流出的固定相；待色谱...

【技术特征摘要】
1.一种分离纯化恩拉霉素A和恩拉霉素B的方法，其特征在于包括以下步骤：1）溶剂系统的配制:将正丁醇、正己烷、三氟乙酸水溶液按体积比4～5:0.2～1:4～5.8混合，然后剧烈振摇5～10min，超声波脱气10～20min后，置于分液漏斗中，静置分层，分层后上相溶液作为固定相，下相溶液作为流动相；2）样品的制备：称取一定量的含恩拉霉素A和恩拉霉素B的混合物，用下相溶液溶解，超声脱气后作为分离样品溶液备用；3）分离纯化：用计量泵以最快流速将固定相注满螺旋管后，开启直流电机转速调至600～700rmp，将流动相以1～2.5mL/min的流速从首端泵入，在色谱柱尾端用量筒收集流出的固定相；待色谱柱尾端不再有固定相流出时，通过进样阀进上述制备的样品溶液，根据恩拉霉素A色谱峰和恩拉霉素B色谱峰的保留时间，分别收集与保留时间对应的流出液，流出液经旋蒸浓缩后，冷冻干燥，即得恩拉霉素A和恩拉霉素B的纯品。2.如权利要求1所述的一种分离纯化恩拉霉素A和恩拉霉...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈敏，
申请(专利权)人：浙江工商大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33