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一种神经管畸形模型的构建方法及应用技术

技术编号:19537643 阅读:192 留言:0更新日期:2018-11-24 17:38
本发明专利技术公开了一种神经管畸形模型的构建方法,其包括以下步骤:步骤1、收集经人工授精的鸡蛋,清洁后放入孵化器中进行孵育;步骤2、将鸡蛋孵育至鸡胚的神经板开始闭合后,采用鸡胚神经沟注射方法向鸡蛋内注射同型半胱氨酸硫代内酯;步骤3、将处理后的鸡蛋继续孵化,观察鸡胚的表型,筛选出成功的神经管畸形模型。本发明专利技术另一方面还公开了上述构建方法在研究高同型半胱氨酸导致神经管畸形的发病机制中的应用。采用本发明专利技术提供的神经管畸形模型构建方法,神经系统的畸形率达50%,胚胎的存活率高达87.5%,是目前最佳的观察神经管畸形的造模方法。

【技术实现步骤摘要】
一种神经管畸形模型的构建方法及应用
本专利技术涉及动物模型构建
,具体涉及一种神经管畸形模型的构建方法及应用。
技术介绍
神经管畸形(neuraltubedefects,NTDs)是一种严重的中枢神经系统的先天性畸形,在我国北方,尤其是在山西省发生率可高达10.2‰。神经管畸形的病因复杂,多项研究表明神经管畸形是由基因与环境因素因素相互作用引起的,如环境、营养、代谢、有机溶剂等与神经管畸形的发生息息相关。多项研究发现,叶酸代谢异常引起的高同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)水平升高是引起出生缺陷的重要危险因素之一,而高同型半胱氨酸导致神经管畸形的机制目前尚不明确。同型半胱氨酸是甲硫氨酸代谢的中间产物,主要通过两条途径进行代谢,约一半的同型半胱氨酸通过甲基化途径(甲硫氨酸循环)重新合成甲硫氨酸;约另一半的同型半胱氨酸经胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)的催化生成半胱氨酸。当体内同型半胱氨酸水平升高后,可在氨基酰-tRNA合成酶(MetRS)的编辑或矫正过程中,形成结构更加稳定的同型半胱氨酸硫代内酯(HTL),同型半胱氨酸及其本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种神经管畸形模型的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括以下步骤:步骤1、收集经人工授精的鸡蛋,清洁后放入孵化器中进行孵育;步骤2、将所述鸡蛋孵育至鸡胚的神经板开始闭合后,采用鸡胚神经沟注射方法向所述鸡蛋内注射同型半胱氨酸硫代内酯;步骤3、将处理后的所述鸡蛋继续孵化,观察所述鸡胚的表型,筛选出成功的神经管畸形模型。

【技术特征摘要】
1.一种神经管畸形模型的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括以下步骤:步骤1、收集经人工授精的鸡蛋,清洁后放入孵化器中进行孵育;步骤2、将所述鸡蛋孵育至鸡胚的神经板开始闭合后,采用鸡胚神经沟注射方法向所述鸡蛋内注射同型半胱氨酸硫代内酯;步骤3、将处理后的所述鸡蛋继续孵化,观察所述鸡胚的表型,筛选出成功的神经管畸形模型。2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述鸡蛋采用白来航种鸡鸡蛋。3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述步骤1中的孵育条件为:孵化温度38℃,相对湿度55-65%,90°转角,30分钟间隔自动翻蛋。4.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述步骤2中,注射所述同型半胱氨酸硫代内酯的具体时间为所述鸡蛋孵化28h时。5.根据权利要求1所述的构建...

【专利技术属性】
技术研发人员:张勤张霆白宝玲李丹万春雷
申请(专利权)人:张勤
类型:发明
国别省市:北京,11

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