一种检测黄樟素的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用技术

一种检测黄樟素的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用。该试纸条包括底板及在底板上依次搭接粘贴的样品吸收垫、结合物释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，结合物释放垫上包埋有荧光微球标记的黄樟素单克隆抗体，硝酸纤维素膜上固定有检测区和质控区，检测区喷涂有黄樟素半抗原‑载体蛋白偶联物，质控区喷涂有羊抗鼠抗抗体，所述黄樟素半抗原是由5‑(2‑溴‑2‑丙烯‑1‑基)‑1,3‑苯并二氧戊环与氨基丙酸反应得到的。本发明专利技术还提供了该试纸条的制备方法及应用上述试纸条检测样品中黄樟素的方法。本发明专利技术提供的试纸条和检测方法具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低的优点，能够实现对大批量样品中黄樟素的快速检测和现场监控。

【技术实现步骤摘要】
一种检测黄樟素的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用
本专利技术属于食品安全中非法添加物检测领域，具体涉及一种检测烟用香精香料、烟草及烟草制品中黄樟素的时间分辨荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用。
技术介绍
黄樟素又称黄樟油素、黄樟脑，无色或微黄色液体，不溶于水，易溶于氯仿、乙醚和其他非极性有机溶剂，有樟木气味，天然存在于肉桂、肉豆蔻、黑胡椒和紫苏等植物中，是许多食用天然精油如黄樟精油、八角精油和樟脑油的主要成分。由于其舒适的气味，黄樟油曾经在食品、洗涤用品和化妆品中作为调味剂和调香剂。黄樟素类化合物主要包括黄樟素、异黄樟素、二氢黄樟素等。黄樟素也是非法生产毒品摇头丸的一个重要组成部分。由于试验表明黄樟素对老鼠有致肝肿瘤的效果，因此，各国对黄樟素进行了限量规定。2001年，欧盟委员会规定黄樟素和异黄樟素的总使用限量，食品和饮料中为1mg/kg，含酒精饮料为5mg/kg。2005年，欧洲委员会将黄樟素列为怀疑弱致癌物质，虽然没有规定每日限量，但要求设置的尽可能低。我国于2005年实施的《易制毒化学品管理条例》将黄樟素列为第一类易制毒化学品。由于黄樟素类化合物的毒副作用，建立准本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测黄樟素的时间分辨荧光免疫层析试纸条，包括底板及在底板上依次搭接粘贴的样品吸收垫、结合物释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于：所述结合物释放垫上包埋有荧光微球标记的黄樟素单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上固定有检测区和质控区，所述检测区喷涂有黄樟素半抗原‑载体蛋白偶联物，所述质控区喷涂有羊抗鼠抗抗体；所述黄樟素单克隆抗体是以黄樟素半抗原‑载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得；所述黄樟素半抗原‑载体蛋白偶联物是由黄樟素半抗原与载体蛋白偶联得到，所述黄樟素半抗原是由5‑(2‑溴‑2‑丙烯‑1‑基)‑1,3‑苯并二氧戊环与氨基丙酸反应得到，其分子结构式为：

【技术特征摘要】
1.一种检测黄樟素的时间分辨荧光免疫层析试纸条，包括底板及在底板上依次搭接粘贴的样品吸收垫、结合物释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于：所述结合物释放垫上包埋有荧光微球标记的黄樟素单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上固定有检测区和质控区，所述检测区喷涂有黄樟素半抗原-载体蛋白偶联物，所述质控区喷涂有羊抗鼠抗抗体；所述黄樟素单克隆抗体是以黄樟素半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得；所述黄樟素半抗原-载体蛋白偶联物是由黄樟素半抗原与载体蛋白偶联得到，所述黄樟素半抗原是由5-(2-溴-2-丙烯-1-基)-1,3-苯并二氧戊环与氨基丙酸反应得到，其分子结构式为：。2.如权利要求1所述的检测黄樟素的时间分辨荧光免疫层析试纸条，其特征在于：所述黄樟素半抗原的制备反应过程如下：。3.根据权利要求1所述的检测黄樟素的时间分辨荧光免疫层析试纸条，其特征在于：所述荧光微球是直径为100~300nm的用聚苯乙烯包裹荧光物质的微球，其表面连接有—COOH基团。4.根据权利要求3所述的检测黄樟素的时间分辨荧光免疫层析试纸条，其特征在于：所述荧...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈黎，刘惠民，崔娜，曹东山，樊美娟，崔华鹏，赵乐，贾云祯，李行，尚平平，
申请(专利权)人：中国烟草总公司郑州烟草研究院，北京勤邦生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41