一种获得胡萝卜突变体的方法技术

本发明专利技术公开了一种获得胡萝卜突变体的方法。本发明专利技术提供的获得胡萝卜突变体的方法，包括向目的胡萝卜中导入胡萝卜基因组编辑的载体，得到胡萝卜突变体；所述胡萝卜基因组编辑的载体含有sgRNA编码基因；所述sgRNA在胡萝卜基因组中识别的靶标DNA具有如下结构5’‑N20NGG‑3’，N为A、G、C或T；所述胡萝卜基因组编辑的载体还含有Cas9蛋白的编码基因和AtU6‑26p启动子；AtU6‑26p启动子启动所述sgRNA编码基因的转录。将CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术应用于胡萝卜育种实践，可以快速转化现有的研究成果，有目的的实现重要农艺性状的改良。

【技术实现步骤摘要】
一种获得胡萝卜突变体的方法
本专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种获得胡萝卜突变体的方法。
技术介绍
基因组定点突变技术，是在基因组原位实现对基因的精确、定点、可遗传修饰。作为新兴的第三代人工核酸酶技术，CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术已经成为分子生物学中最强大的工具之一，且被广泛应用于植物和农作物功能基因改良。CRISPR/Cas9系统首次在细菌中发现，由sgRNA和Cas9蛋白两部分组成(Jineketal.，2012)。Cas9蛋白通过自身的核酸内切酶活性，对任何紧随PAM的靶点序列进行编辑，从而引起靶位点基因组DNA序列双链断裂(double-strandbreaks，DSBs)，然后通过非同源末端连接(non-homologousendjoining，NHEJ)或同源重组介导的修复(homology-directedrepair，HDR)两种方式引入突变。基因定点修饰作为反向遗传学研究的有力工具，能够通过对基因组定向准确修饰，有目的的提供遗传学和分子生物学研究材料，这对于胡萝卜功能基因组学的基础研究具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是获得胡萝卜突变体。本本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种获得胡萝卜突变体的方法，包括向目的胡萝卜中导入胡萝卜基因组编辑的载体，得到胡萝卜突变体；所述胡萝卜基因组编辑的载体含有sgRNA编码基因；所述sgRNA在胡萝卜基因组中识别的靶标DNA具有如下结构5’‑N20NGG‑3’，N为A、G、C或T。

【技术特征摘要】
1.一种获得胡萝卜突变体的方法，包括向目的胡萝卜中导入胡萝卜基因组编辑的载体，得到胡萝卜突变体；所述胡萝卜基因组编辑的载体含有sgRNA编码基因；所述sgRNA在胡萝卜基因组中识别的靶标DNA具有如下结构5’-N20NGG-3’，N为A、G、C或T。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述胡萝卜基因组编辑的载体还含有Cas9蛋白的编码基因。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述胡萝卜基因组编辑的载体还含有启动子；所述启动子启动所述sgRNA编码基因的转录。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述启动子为AtU6-26p启动子。5.一种胡萝卜基因组编辑的载体，含有Cas9蛋白的编码基因、sgRNA编码基因和启动子；所述启动子启动所述sgRNA编码基因的转录；所述sgRNA在胡萝卜基因组中识别的靶标DNA具有...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓杰，梁毅，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：北京,11