一种以草甘膦为筛选剂的胡萝卜遗传转化的方法技术

本发明专利技术公开了一种以草甘膦为筛选剂的胡萝卜遗传转化的方法。该方法是以草甘膦为筛选剂，对胡萝卜的外植体进行遗传转化；胡萝卜的外植体为胡萝卜的下胚轴或用该下胚轴截成的节段。实验证明，本发明专利技术提供的方法不仅大大缩短了获得再生植株的时间(60‑70d)，而且具有较高的转化阳性率(91％)。与传统的以卡那霉素为筛选剂的胡萝卜遗传转化方法相比，获得再生植株的时间缩短两周左右，转化阳性率提高了6％。由此可见，本发明专利技术提供的方法是一种高效可行的遗传转化方法，可大大减少转基因鉴定的工作量，具有重大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种以草甘膦为筛选剂的胡萝卜遗传转化的方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种以草甘膦为筛选剂的胡萝卜遗传转化的方法。
技术介绍
胡萝卜(DaucuscarotaL.)为伞形科植物，是重要的蔬菜作物之一。胡萝卜块根营养丰富，富含维生素A前体类胡萝卜素和植物纤维，在欠发达国家，胡萝卜已经成为维生素A的主要来源。关于胡萝卜的研究，在营养成分的鉴定、遗传工程改良新品种、基因组结构方面取得了非常瞩目的成就，胡萝卜全基因组测序的完成(Iorizzo,M.,Ellison,S.,Senalik,D.,Zeng,P.,Satapoomin,P.,Huang,J.,Bowman,M.,Iovene,M.,Sanseverino,W.,Cavagnaro,P.,etal.Ahigh-qualitycarrotgenomeassemblyprovidesnewinsightsintocarotenoidaccumulationandasteridgenomeevolution.NatGenet(2016)48:657-666)，是胡萝卜研究领域里程碑式的成就。然而胡萝卜遗传材料的获得主要依靠自然突本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胡萝卜遗传转化方法，是以草甘膦为筛选剂，对胡萝卜的外植体进行遗传转化。

【技术特征摘要】
1.一种胡萝卜遗传转化方法，是以草甘膦为筛选剂，对胡萝卜的外植体进行遗传转化。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述“以草甘膦为筛选剂，对胡萝卜的外植体进行遗传转化”包括如下步骤：(1)将含有目的基因的重组表达载体导入农杆菌，得到重组农杆菌；(2)取步骤(1)得到的重组农杆菌，对胡萝卜的外植体进行侵染；(3)完成步骤(2)后，将所述外植体置于共培养培养基，进行共培养；(4)完成步骤(3)后，将所述外植体置于诱导培养基，培养，获得愈伤组织；(5)完成步骤(4)后，将所述愈伤组织依次置于初筛培养基和筛选培养基进行培养，获得胚性愈伤组织；(6)完成步骤(5)后，将所述胚性愈伤组织置于分化培养基进行培养，获得出芽的胚性愈伤组织；(7)完成步骤(6)后，将所述出芽的胚性愈伤组织置于生根培养基进行培养，获得胡萝卜转化苗。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述共培养培养基中含有0.3～0.8mg/L2，4-D、3～7mg/LAgNO3和200～400mg/LTimentin；所述诱导培养基中含有0.3～0.8mg/L2，4-D、0.3～0.8mg/L6-BA、0.5～1.5mg/L草甘膦、3～7mg/LAgNO3和200～400mg/LTimentin；所述初筛培养基中含有0.3～0.8mg/L2，4-D、0.3～0.8mg/L6-BA、4～6mg/L草甘膦、3～7mg/LAgNO3和200～400mg/LTimentin；所述筛选培养基中含有0.3～0.8mg/L2，4-D、0.3～0.8mg/L6-BA、7～9mg/L草...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁毅，李晓杰，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：北京,11