一种烟草中β-大马酮的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种烟草中β‑大马酮的检测方法，以吹扫‑捕集‑脱附的方式进样，以气质联用仪进行检测，其特征在于，上样前先将烟草样品使用水溶液进行超声萃取制得萃取液，取20mL～40mL的萃取液并加入柠檬酸，使萃取液中柠檬酸的浓度为5mg/mL以上，然后再上样以吹扫‑捕集‑脱附的方式进样。在烟草萃取液加入一定量的柠檬酸，以吹扫‑捕集‑脱附的方式进样，可大幅度提高β‑大马酮的检测灵敏度，同时有效降低了烟碱对色谱分离的干扰，因而可准确定量测定烟草中的β‑大马酮。

【技术实现步骤摘要】
一种烟草中β-大马酮的检测方法
本专利技术属于分析方法
，具体涉及一种烟草中β-大马酮的检测方法。
技术介绍
β-大马酮又称beta-突厥烯酮，天然存在烟草、覆盆子、苹果中。在烟草中是一种极为重要的香气成分，能使烟气甜醇，改善粗劣气，增加自然感和厚实感。因此，它的准确测定有助于把握烟草及其制品的香气特征，同时也有助于产品质量的过程控制。包括β-大马酮在内的烟草香气成分的分析方法，通常采用有机溶剂单相提取法或水(蒸汽)-有机溶剂双相提取法作为样品前处理手段，例如同时蒸馏萃取(SDE)。实验发现，这类方法用于定性研究有较大优势，但这些方法的重复性较差，且耗时长、效率低(例如，SDE装置每天仅能处理2个样品)，无法实现样品的大规模分析。如采用吹扫捕集-气质联用仪检测的分析方法，则效率大大提高，每个样品的分析时间可控制在30分钟～60分钟以内，每天的样品处理量至少在24个以上。一般烟草中含有多种挥发有机物，在使用气质联用仪进行测试时，各种成分之间会存在一定的相互干扰，导致测量结果不准确。烟草中含有较多的烟碱，由于烟碱和β-大马酮在色谱中保留时间比较接近，β-大马酮的测试结果非常容易收到烟碱的干扰，容易导致β-大马酮实际测量含量偏低，而现有的专利中都没有给出去除烟碱的有效解决方案。中国专利CN102680627A中公布了一种烟叶中关键致香物质的分析与鉴别方法，需要使用无水乙醚进行萃取然后浓缩后进样使用GC-MS进行烟叶中致香物质的测试，其萃取和浓缩过程较麻烦，容易造成低沸点物质成分损失，重复性差，效率低。中国专利CN103512992B公开了一种卷烟烟丝中美拉德反应的风味物质快速反应分析的方法，其中将样品经过静态顶空后，使用气相色谱-质谱法进行全扫描模式检测，峰面积归一法相对定量。该方法测试的卷烟中各成分的含量测试随测试条件的变化会出现较大变化，不能准确测试出各成分的含量，色谱分离时各成分容易相互干扰，尤其是对于含量较低的组分，测试灵敏度较差。采用上述专利中的方法进行测试时，由于烟碱和β-大马酮在色谱中保留时间比较接近，β-大马酮的测试结果非常容易收到烟碱的干扰，容易导致β-大马酮实际测量含量偏低。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种烟草中β-大马酮的检测方法，在烟草萃取液中加入一定量的柠檬酸，以吹扫-捕集-脱附的方式进样，可实现β-大马酮的有效检测，同时有效降低了烟碱对色谱分离的干扰，因而可准确定量测定烟草中的β-大马酮。本专利技术的技术方案如下：一种烟草中β-大马酮的检测方法，以吹扫-捕集-脱附的方式进样，以气质联用仪进行检测，上样前先将烟草样品使用水溶液进行超声萃取制得萃取液，取20mL～40mL的萃取液并加入柠檬酸，使萃取液中柠檬酸的浓度为5mg/mL以上，然后再上样以吹扫-捕集-脱附的方式进样。本专利技术使用水溶液对烟丝样品进行超声萃取，样品前处理方法简单，测试方法重复性好，分析时间短，加入一定量的柠檬酸，以吹扫-捕集-脱附的方式进样，可以使烟碱和β-大马酮的出峰时间间距增大，同时有效降低了烟碱对色谱分离的干扰，因而可准确定量测定烟草中的β-大马酮。优选地，所述萃取液的制备方法如下：先称取适量的烟丝试样，重量精确至0.0001g，加入水进行萃取，水和烟丝的重量比为30～50：1，萃取条件为80℃下超声40分钟。本方案的萃取方法简单，可以重复，且得到的萃取液中的β-大马酮的含量适合用于气质联用检测，可以提高检测的准确性。优选地，所述检测方法中，标准曲线所需的标准样品采用含有柠檬酸的的基质，所述基质和所述萃取液中柠檬酸的浓度相同，在基质中加入β-大马酮，制成含有50ng/mL～1000ng/mL的β-大马酮的不少于5个浓度梯度标准样品。本方案的标准样品中也加入柠檬酸，减少标准样品和被测样品之间的差异，排除基质效应，提高检测结果的准确性；所述的50ng/mL～1000ng/mL的β-大马酮不同的浓度梯度建立的标准曲线线性拟合度好，适合用于检测本专利技术制备的样品，提高检测的准确性。优选地，所述基质和所述萃取液中柠檬酸的浓度为5～10mg/mL。所述浓度的柠檬酸足够对烟草中的烟碱进行抑制，使其不对色谱分离造成干扰，保证β-大马酮的检测的准确性。优选地，所述基质的制备方法如下：(S1)准确称取一定量烟丝，准确到0.0001g，加入水进行萃取，水和烟丝的重量比为30～50：1，萃取条件为80℃下超声40分钟；(S2)移取定量的萃取液，加入柠檬酸，使柠檬酸浓度为5～10mg/mL，转入三颈烧瓶置入100℃水浴中，通入1.0L/min～2.0L/min的氮气，同时加以搅拌，搅拌速率不低于200r/min，搅拌至120min以上，停止通氮气，冷却后加去离子水定容到初始体积；在水浴通氮气搅拌过程中，须定时加水，保证液体的体积不少于初始体积的80％；(S3)移出20mL～40mL上述S2步骤制得的样品进行测试，如果检测仍有β-大马酮则将剩余的样品重复进行步骤S2中的水浴通氮气搅拌，每隔半小时测试一次，当β-大马酮含量低于仪器检测限时以去离子水定容所得样品即为标准样品的基质。采用本方案方法制备的基质配制的标准样品，和被测样品之间的差异更小，排除基质效应，可以更准确的测量样品中的β-大马酮含量；本专利技术的配制方法简单、重复性好。优选地，用于萃取的水中含有50～500ng/mL苯乙酸丙酯，测试方法为内标法，所述苯乙酸丙酯为内标物。使用本方案采用内标法，可以避免进样不一致导致的偶然误差，提高分析结果的准确性；所述浓度的苯乙酸丙酯为内标物与β-大马酮性质较相似且不与被测样品起化学反应，其峰位置与β-大马酮不共溢，可以避免仪器不稳定造成的灵敏度的差异。优选地，所述气质联用仪中气相分析柱为中等极性低流失气相毛细色谱柱，进样口温度240℃，分流比20:1；升温程序为50℃停留1分钟而后以3℃/min的速率升温至185℃保持1分钟，柱后260℃运行5分钟。使用本方案的色谱柱和进样升温条件可以使β-大马酮和烟草样品中其它挥发性物质更好的分离，避免检测时产生相互干扰，降低噪音，提高检测灵敏度。优选地，所述气质联用仪中质谱检测采用SIM模式；离子源温度为230℃，四级杆温度150℃，电离能量为70eV。本方案中的参数选择，可以高效地使β-大马酮电离，可以提高灵敏度和分辨率。优选地，所述气质联用仪中捕集阱填料为聚2,6-二苯基对苯醚多孔树脂。本方案的捕集阱填料对β-大马酮的吸附能力较强，热解吸效率也较强，且易于重新进行活化后多次使用。优选地，所述吹扫-捕集-脱附过程中，吹扫气流量为20mL/min～30mL/min；吹扫温度60℃～90℃；捕集温度40℃，捕集时间为10min～30min；干吹脱水3分钟；脱附进样3分钟，脱附温度200℃～210℃。所述吹扫气可以为氮气或者氦气；使用本方案的载气吹扫工艺可以改善分辨率，使峰变窄变宽，相当于改善了灵敏度。与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：(1)样品处理方法简单；(2)分析时间短，效率高；(3)排除烟碱的干扰；(4)实验重复性好；(5)测试结果准确。附图说明图1是柠檬酸不同添加量条件下某烟草样品中烟碱和β-大马酮的色谱图。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术各技术方案进行清楚、完整的描述，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种烟草中β‑大马酮的检测方法，以吹扫‑捕集‑脱附的方式进样，以气质联用仪进行检测，其特征在于，上样前先将烟草样品使用水溶液进行超声萃取制得萃取液，取20mL～40mL的萃取液并加入柠檬酸，使萃取液中柠檬酸的浓度为5mg/mL以上，然后再上样以吹扫‑捕集‑脱附的方式进样。

【技术特征摘要】
1.一种烟草中β-大马酮的检测方法，以吹扫-捕集-脱附的方式进样，以气质联用仪进行检测，其特征在于，上样前先将烟草样品使用水溶液进行超声萃取制得萃取液，取20mL～40mL的萃取液并加入柠檬酸，使萃取液中柠檬酸的浓度为5mg/mL以上，然后再上样以吹扫-捕集-脱附的方式进样。2.根据权利要求1所述的烟草中β-大马酮的检测方法，其特征在于，所述萃取液的制备方法如下：先称取适量的烟丝试样，重量精确至0.0001g，加入水进行萃取，水和烟丝的重量比为30～50：1，萃取条件为80℃下超声40分钟。3.根据权利要求1所述的烟草中β-大马酮的检测方法，其特征在于，所述检测方法中，标准曲线所需的标准样品采用含有柠檬酸的的基质，所述基质和所述萃取液中柠檬酸的浓度相同，在基质中加入β-大马酮，制成含有50ng/mL～1000ng/mL的β-大马酮的不少于5个浓度梯度标准样品。4.根据权利要求3所述的烟草中β-大马酮的检测方法，其特征在于，所述基质和所述萃取液中柠檬酸的浓度为5～10mg/mL。5.根据权利要求4所述的烟草中β-大马酮的检测方法，其特征在于，所述基质的制备方法如下：(S1)准确称取一定量烟丝，准确到0.0001g，加入水进行萃取，水和烟丝的重量比为30～50：1，萃取条件为80℃下超声40分钟；(S2)移取定量的萃取液，加入柠檬酸，使柠檬酸浓度为5～10mg/mL，转入三颈烧瓶置入100℃水浴中，通入1.0L/min～2.0L/min的氮气，同时加以搅拌，搅拌速率不低于200r/min，搅拌至120min以上，停止通氮气，冷却后...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘献军，刘琪，庄亚东，
申请(专利权)人：江苏中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32