一种试纸条的质控线包被溶液以及用此溶液制备的试纸条制造技术

本发明专利技术提供了一种试纸条的质控线的包被溶液、这种包被溶液的制备方法以及采用这种质控线包被溶液制备的检测试纸，其中采用HCG检测试纸对本发明专利技术进行举例说明，所述包被溶液包括如下组分：抗原和与所述抗原相对应的抗体。本发明专利技术提供了一种克服“HOOK”效应的新方法，并且采用本发明专利技术的质控线包被溶液制备得到的试纸条检测浓度范围更宽，并且其检测方法更简单，所需检测时间短，检测成本小并且稳定性也更好。

【技术实现步骤摘要】
一种试纸条的质控线包被溶液以及用此溶液制备的试纸条
本专利技术设计免疫检测
，尤其涉及免疫层析试纸。
技术介绍
硝酸纤维素膜又称为NC膜，在胶体金或荧光试纸中用做C/T线的承载体，同时也是免疫反应的发生处。将抗原或抗体固定于NC膜上的工艺，我们称之为包被。包被的效果直接影响试纸条的性能，包括灵敏度、稳定性特异性等，同时也直接影响生产成本。现有质控线的包被技术主要以包被羊多抗为主，此类方法形成比较恒定的质控线，但是当样本中抗原浓度较高时，过量的抗原与金标抗体结合，形成过量的抗原-金标抗体复合物，而这过量的复合物不会与检测线上的抗体结合。此时，如照常读取检测线的信号值，会导致检测结果偏低，这是因为校准曲线达到顶点后出现钩状现象，当抗原足够高时，检测线甚至会检测不出信号值，出现假阴性的结果，这种现象称为“HOOK效应”。现有技术中一般通过稀释样本的浓度或者使用高亲和力的单克隆抗体来克服“HOOK效应”，但是当在医院的紧急情况下，需要在迅速准确的测定患者状态的情况下，如果需要通过稀释样本的浓度来克服“HOOK效应”，那么在这种紧急的情况下是不太允许这样的做法的，如果其中使用的是高亲和力的单克隆抗体，那么无形中就增加了检测的成本，也就增加了患者的负担，所以急需开发另外一种能够克服“HOOK效应”的方法。目前有利用抗原作为质控线来克服HOOK效应的影响，拓宽产品的检测范围。如对于HCG这个项目，专利(104991078A)公开了一种HCG胶体金免疫侧向层析试纸条及其检测方法，该方法在质控线上包被HCG的抗原，可将检测范围拓宽至200000mIU/mL。但抗原的包被相较抗体来说不那么成熟，且不同项目的抗原，性质也会千差万别，包被的条件不统一，并且当抗原与NC膜包被的时候可能会遮住此抗原与金标抗体的结合位点或者导致此抗原的抗原决定簇发生改变，导致金标抗体与抗原的结合效率低或者甚至无法结合，再者部分项目的抗原包被难度较大，易出现稳定性差，或结合效率低等问题。所以急需开发一种能够克服“HOOK”效应，操作简单，所需检测时间短并且稳定性好的试纸条。
技术实现思路
为了克服上述技术问题，本专利技术提供了一种操作简单，所需检测时间短并且稳定性好的质控线包被溶液以及应用此质控线包被溶液制备的试纸条。本专利技术提供了一种试纸条的质控线包被溶液，所述质控线包被溶液主要由以下组分组成：抗原和与抗原对应的抗体；进一步的，所述抗原的浓度为：0.2-3mg/mL，所述抗原对应的抗体的浓度为：0.2-3mg/mL；进一步的，所述抗原的浓度为0.5mg/mL，所述对应抗原的抗体的浓度为1mg/mL；进一步的，所述的质控线包被溶液还包括包被前期缓冲混合液，所述包被前期缓冲混合液主要包括如下组分：0.01～20mmol/L缓冲液、0.1～5g/100mL保护剂以及0.01～1g/100mL防腐剂；进一步的，所述包被前期缓冲液主要包括如下组分：10mmol/L缓冲液、1g/100mL保护剂以及0.05g/100mL防腐剂；进一步的，所述缓冲液为PBS缓冲液，Tris-HCI缓冲液，甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液和柠檬酸缓冲液中的一种或多种；进一步的，所述防腐剂为叠氮钠、硫柳汞、Proclin300和Proclin200中的一种或多种；进一步的，所述保护剂为牛血清白蛋白BSA、卵清蛋白OVA和明胶中的一种或多种；进一步的，所述试纸条为检测HCG试纸条或者检测CRP试纸条；进一步的，所述HCG为β-HCG或者freeβ-HCG。本专利技术还提供了一种制备所述试纸条的质控线包被溶液的方法，它包括如下步骤：a、配置包被前期缓冲混合液：其包被前期缓冲混合液主要包括如下组分：缓冲液、保护剂以及防腐剂；b、制备预混液：将所述抗体加入前期缓冲混合液中；c、制备质控线包被溶液：将所述抗原与预混液混合，静置，最后形成质控线包被溶液。本专利技术还提供了一种检测试纸条，包括PVC背衬板以及依次衔接并设置在PVC背衬板上的样品垫、结合垫、层析膜和吸水滤纸，所述层析膜上设置有检测线和质控线，所述质控线用前述的包被溶液包被；本专利技术提供了检测HCG试纸条，包括PVC背衬板以及依次衔接并设置在PVC背衬板上的样品垫、结合垫、层析膜和吸水滤纸，所述层析膜上设置有检测线和质控线，所述质控线用前述的包被溶液包被；本专利技术提供了检测CRP试纸条，包括PVC背衬板以及依次衔接并设置在PVC背衬板上的样品垫、结合垫、层析膜和吸水滤纸，所述层析膜上设置有检测线和质控线，所述质控线用前述的包被溶液包被；进一步的，所述试纸条上的检测线与质控线上包被溶液的承载量均为0.5-1μl/cm；进一步的，所述试纸条上的检测线与质控线上包被溶液的承载量均为0.7μl/cm；进一步的，检测线的包被溶液为浓度为0.5-2.5mg/mL的所述抗原对应的抗体溶液；进一步的，检测线的包被溶液为浓度为2mg/mL的所述抗原对应的抗体溶液。本专利技术还提供了一种制备试纸条的方法，它包括如下步骤：质控线包被溶液的制备：a、配置包被前期缓冲混合液：其包被前期缓冲混合液主要包括如下组分：0.01～20mmol/L缓冲液、0.1～5g/100mL保护剂以及0.01～1g/100mL防腐剂；b、制备预混液：将所述抗原对应的抗体加入前期缓冲混合液中，使所述抗原对应的抗体的浓度为0.2～3mg/mL；c、制备质控线包被溶液：将所述抗原与预混液混合，使所述抗原的浓度为0.2～3mg/mL；静置5-30min，最后形成质控线包被溶液；检测线包被溶液的制备:将浓度在0.5-2.5mg/ml的所述抗原对应的抗体喷涂与检测线上。进一步的，其包被前期缓冲混合液主要包括如下组分：10mmol/L缓冲液、1g/100mL保护剂以及0.05g/100mL防腐剂；进一步的，制备试纸条的方法还包括如下步骤：所述金标垫的制备：将待标记的所述抗原对应的抗体加入未标记的胶体金溶液中，混匀后静置5-30min后，加入0.1％-1％的BSA溶液进行封闭，去除上清，加入与胶体金等体积的缓冲液，混匀后烘烤，烘干后4-30℃干燥保存，即得；所述样本垫的制备：将0.1％-1％的BSA溶液加入等体积的缓冲液，混匀后烘烤，烘干后4-30℃干燥保存，即得。进一步的，制备检测HCG的试纸的方法还包括如下步骤：所述金标垫的制备：将待标记的HCG单克隆抗体加入未标记的胶体金溶液中，混匀后静置10min后，加入0.5％的BSA溶液进行封闭，去除上清，加入与胶体金等体积的缓冲液，混匀后烘烤，烘干后4-30℃，干燥保存，即得；所述样本垫的制备：将0.5％的BSA溶液加入等体积的缓冲液，混匀后烘烤，烘干后4-30℃干燥保存，即得。本专利技术中，所述缓冲液为PBS缓冲液，Tris-HCI缓冲液，甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液和柠檬酸缓冲液中的一种或多种；本专利技术中，所述防腐剂为叠氮钠、硫柳汞、Proclin300和Proclin200中的一种或多种；本专利技术中，所述保护剂为牛血清白蛋白BSA、卵清蛋白OVA和明胶中的一种或多种；相对于现有技术，本专利技术具有如下有益效果：采用本专利技术的质控线包被溶液制备得到的试纸条检测浓度范围更宽，能够克服“HOOK效应”，并且其检测方法简单，所需检测时间时间短、检测成本小、精密度更好并且稳定性好。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种试纸条的质控线包被溶液，其特征在于：所述质控线包被溶液主要由以下组分组成：抗原和抗原对应的抗体。

【技术特征摘要】
1.一种试纸条的质控线包被溶液，其特征在于：所述质控线包被溶液主要由以下组分组成：抗原和抗原对应的抗体。2.如权利要求1所述的质控线包被溶液，其特征在于：所述抗原的浓度为：0.2-3mg/mL，所述抗原对应的抗体的浓度为：0.2-3mg/mL，优选的，所述抗原的浓度为0.5mg/mL，所述抗原对应的抗体的浓度为1mg/mL。3.如权利要求1、2所述的质控线包被溶液，其特征在于：质控线包被溶液还包括包被前期缓冲混合液，所述包被前期缓冲混合液主要包括如下组分：0.01～20mmol/L缓冲液、0.1～5g/100mL保护剂以及0.01～1g/100mL防腐剂，优选的，所述包被前期缓冲液主要包括如下组分：10mmol/L缓冲液、1g/100mL保护剂以及0.05g/100mL防腐剂。4.如权利要求3所述的质控线包被溶液，其特征在于：所述缓冲液为PBS缓冲液，Tris-HCI缓冲液，甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液和柠檬酸-磷酸盐缓冲液中的一种或多种；优选的，所述防腐剂为叠氮钠、硫柳汞、Proclin300和Proclin200中的一种或多种；优选的，所述保护剂为牛血清白蛋白BSA、卵清蛋白OVA和明胶中的一种或多种。5.如权利要求1-4任意一项所述的质控线包被溶液，其特征在于：所述试纸条为检测HCG试纸条或者检测CRP试纸条，优选的，所述HCG为β-HCG或者freeβ-HCG。6.一种制备如权利要求1-5任意一项所述的质控线包被溶液的方法，其特征在于：它包括如下步骤：a、配置包被前期缓冲混合液：其包被前期缓冲混合液主要包括如下组分：缓冲液、保护剂以及防腐剂；b、制备预混液：将所述抗原对应的抗体加入前期缓冲混合液中；c、制备质控线包被溶液：将所述抗原与预混液混合，静置，最后形成质控线包被溶液。7.一种检测试纸条，包括PVC背衬板以及依次衔接并设置在PVC背衬板上的样品垫、结合垫、层析膜和吸水滤纸，所述层析膜上设置有检测线和质控线，其特征在于：所述质控线用如权利要求1-5任意一项所示的包被溶液包被。8.如权利要求7所述的试纸条，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴瑜佳，张浦东，秦川，
申请(专利权)人：重庆中元汇吉生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50