一种保藏秀丽隐杆线虫的方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，涉及一种简易有效的长期保藏实验用秀丽隐杆线虫的方法。该方法与传统的保藏实验用秀丽隐杆线虫方法的不足，采用一种固/液混合态的培养基培养秀丽隐杆线虫达到长期(5‑7个月)保藏秀丽隐杆线虫的目的。保藏操作简易、实验方法简单、线虫复苏时间短且成活率高是本发明专利技术的突出优点。

【技术实现步骤摘要】
一种保藏秀丽隐杆线虫的方法
本专利技术涉及生物
中的实验用秀丽隐杆线虫保藏方法，尤其是在实验场所无法提供传统保存方法中的-80℃保藏条件、且一般性的4-15度低温保存的线虫其活性往往大为降低时，给长期保存线虫提供了一种新的可能。
技术介绍
秀丽隐杆线虫Caenorhabditiselegans，属于线形动物门、线虫纲动物，是一种非寄生性线虫，身体透明，长度约1毫米，主要分布在温带地区的土壤中。其细胞数量不多、功能也不复杂、身体透明，是研究生物学理想的模式动物。秀丽隐杆线虫广泛应用于细胞发育及分化、神经系统、衰老机制以及遗传学等领域的研究，故需要有大量纯化的个体并予以长期保存。传统的长期保藏方法均需要提供-80℃的冷藏条件，操作过程中亦需要购置特制昂贵的冷藏盒，实验耗材、试剂准备过程繁琐复杂，且线虫复苏阶段耗费时间长、成活率经常很低。总之，传统的秀丽隐杆线虫长期保藏方法耗时耗力，要求条件苛刻，复苏时间长且成活率低，其综合保藏复苏效果对专业水平不高的实验室往往带来很大的挑战。通常状况下，线虫可以在4℃冰箱中通过NGM培养基短期保存。NGM培养基上生长有E.coliOP50菌种，封口本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用固/液混合态的培养基培养并长期保藏秀丽隐杆线虫的方法，该方法主要包括：大肠杆菌菌种的平板涂布，保藏用固/液混合态培养基的制备，保藏秀丽隐杆线虫的选取，培养皿的密封，保藏状态下秀丽隐杆线虫的复苏。

【技术特征摘要】
1.一种利用固/液混合态的培养基培养并长期保藏秀丽隐杆线虫的方法，该方法主要包括：大肠杆菌菌种的平板涂布，保藏用固/液混合态培养基的制备，保藏秀丽隐杆线虫的选取，培养皿的密封，保藏状态下秀丽隐杆线虫的复苏。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于保藏用培养基采用NGM固体培养基、LB液体培养基，配方为：NGM固体培养基(100mL)：胰蛋白胨0.25g，NaCl0.3g，琼脂粉1.7g，超净水97.5mL，1mol/L氯化钙0.1ml，1mol/L硫酸镁0.1ml，5mg/L胆固醇0.1ml,1mol/L偏磷酸钾缓冲液2.2ml。121℃灭菌20min。LB液体培养基(100mL)：胰蛋白胨1g，酵母粉0.5g，NaCl1g，超净水100mL。121℃灭菌20m...

【专利技术属性】
技术研发人员：王虹元，张艾涵，谷庆泽，王晋，张治洲，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学威海，
类型：发明
国别省市：山东,37