一种热带假丝酵母、其制备方法以及应用技术

本发明专利技术属于生物技术领域，公开了一种热带假丝酵母、其制备方法以及应用。本发明专利技术提供的热带假丝酵母的保藏编号为CGMCC NO.9085。该热带假丝酵母核糖核酸的含量高，在发酵过程中菌株生长量较大、产核糖核酸性能稳定，在相同的培养条件下，显著提高了核糖核酸的产量，可以应用于制备核糖核酸、核苷酸、核苷酸衍生物和饲料。

Candida tropicalis, preparation method and application thereof

The invention belongs to the field of biotechnology, and discloses a tropical candida, a preparation method and application thereof. The preservation number of Candida tropicalis provided by the invention is CGMCC NO.9085. The Candida tropicalis has a high content of ribonucleic acid. The growth of the strain during fermentation is large and the ribonucleic acid production performance is stable. Under the same culture conditions, the yield of ribonucleic acid is significantly increased. It can be used to prepare ribonucleic acid, nucleotide, nucleotide derivatives and feed.

【技术实现步骤摘要】
一种热带假丝酵母、其制备方法以及应用
本专利技术属于生物
，特别涉及一种热带假丝酵母、其制备方法以及应用。
技术介绍
核糖核酸（RNA）普遍存在于动物、植物和微生物细胞内，是一种遗传物质，参与蛋白质生物合成、免疫调节等生理活动。微生物来源的核糖核酸及其降解产物核苷酸在医药、食品、保健品及农业等领域均有重要的应用价值。核糖核酸可以作为保健品，添加在膳食中，能够有效提高机体的免疫力，增加食欲，降低高血脂、高血压，改善动脉粥样硬化。核糖核酸的另外一个重要用途是制备核苷酸及其衍生物，所得核苷酸应用广泛，例如鸟苷酸能够赋予食品鲜味，常与肌苷酸、谷氨酸一起用于增强食品风味；而一些核苷酸衍生物则常作为生理、生化过程中的调节物质参与体内物质代谢。根据报道，市场对核糖核酸的需求量很大，仅国内每年的需求量就超过1000吨。目前常用于生产核糖核酸的方法是生物发酵法，最常用的生物材料是酵母。利用酵母生产核糖核酸的优点包括：酵母菌体中核糖核酸的含量普遍高于其他微生物，核糖核酸的产率高；酵母菌体收集方法简单，其核糖核酸的提取容易，所得核糖核酸的纯度高；酵母培养方法简单，成本较低；提取核糖核酸后的脱核酵母可作为优质的蛋白饲料。尽管研究报道了一些利用酵母生产核糖核酸的技术，但是目前市场上的核糖核酸仍然不能满足需求，例如，我国每年需要进口上百吨核糖核酸、核苷酸及其衍生物，这导致了目前核糖核酸、核苷酸及其衍生物的价格较高，不利于核糖核酸、核苷酸及其衍生物的推广和使用。所以还需要继续研究如何利用酵母菌高效生产核糖核酸、核苷酸及其衍生物。目前国内外研究报道，提高酵母生产核糖核酸的方法主要从三个方面考虑：第一优化酵母菌，获得高核酸酵母生产菌；第二优化发酵培养基，进一步提高核糖核酸的产量；第三是核糖核酸的分离和纯化。因为从酵母菌中分离和纯化核糖核酸的技术比较简单、成熟，所以一般从前两个方面来提高酵母生产核糖核酸，其中最为重要的是筛选高产核糖核酸的酵母菌。尽管研究报道了一些用于生产核糖核酸的酵母菌株，但是现有的酵母菌发酵产核糖核酸的量不高，所得核糖核酸仍然不能满足需求，所以急需一种高产核糖核酸的酵母菌，以提高核糖核酸的产量。
技术实现思路
本专利技术的专利技术目的在于提供一种高产核糖核酸的酵母菌，本专利技术提供的热带假丝酵母的保藏编号为CGMCCNO.9085，相同发酵条件下，该热带假丝酵母显著提高了核糖核酸的产量，可以应用于制备核糖核酸、核苷酸、核苷酸衍生物和饲料。为了实现本专利技术的专利技术目的，本专利技术采用如下的技术方案：本专利技术提供了一种热带假丝酵母，其保藏编号为CGMCCNO.9085。本专利技术从19株酵母菌种中先筛选出5株产核糖核酸的酵母菌，再经过进一步筛选获得了一株高产核糖核酸酵母菌，利用rDNA的内部转录间隔区(internaltranscribedspacer,ITS)及26SrDNAD1/D2区域对本专利技术筛选出的酵母菌进行分子鉴定，发现该菌株为热带假丝酵母，食品安全菌株。本专利技术提供的该热带假丝酵母菌株已于2014年04月21日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）进行生物保藏，保藏中心地址为北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCCNO.9085。实验结果证实，本专利技术提供的热带假丝酵母菌核糖核酸的含量高，在发酵培养过程中菌株生长量较大、产核糖核酸性能稳定，在相同的培养条件下，显著提高了核糖核酸的产量。本专利技术还提供了保藏编号为CGMCCNO.9085的热带假丝酵母在制备核糖核酸中的应用。本专利技术还提供了保藏编号为CGMCCNO.9085的热带假丝酵母在制备核苷酸或核苷酸衍生物中的应用。专利技术提供的保藏编号为CGMCCNO.9085的热带假丝酵母经过发酵、提取核糖核酸，得核糖核酸，本领域技术人员可以想到和实现将所得核糖核酸继续用于制备核苷酸及其衍生物。本专利技术还提供了保藏编号为CGMCCNO.9085的热带假丝酵母在制备饲料中的应用。本专利技术提供的保藏编号为CGMCCNO.9085的热带假丝酵母经过发酵、提取核糖核酸，得核糖核酸和脱核酵母，因为本专利技术提供的热带假丝酵母在发酵过程中菌株生长量较大，所以核糖核酸总量、蛋白质总量也大幅提高，在核糖核酸提取过程中获得的脱核酵母的总量也大幅提高，所以本领域技术人员可以想到和实现将所得脱核酵母应用于制备饲料。本专利技术还提供了一种保藏编号为CGMCCNO.9085的热带假丝酵母的发酵方法，包括：接种保藏编号为CGMCCNO.9085的热带假丝酵母于发酵培养基中，发酵。优选地，本专利技术提供的发酵方法中，发酵培养基中的碳源由甘薯渣液糖提供。本专利技术提供的发酵方法中用到的甘薯渣液糖为按照专利申请号201210068852.5的专利申请文件公开的方法制备获得，或者为按照专利申请号201210090800.8的申请文件公开的方法制备获得。甘薯渣液糖中的主要成分为葡萄糖，其中葡萄糖的含量在7%～9%，可作为培养基中的碳源。碳源是酵母构成体质的原料，碳元素几乎占酵母体的一半，同时又是酵母生命活动的能量，所以发酵培养基中的碳源是重要的酵母菌发酵条件优化对象之一。实验结果证实，以甘薯渣液糖作为碳源能够显著提高本专利技术提供的热带假丝酵母生产核糖核酸的产量，更有利于应用本专利技术提供的热带假丝酵母生产制备核糖核酸、核苷酸、核苷酸衍生物及饲料。在本专利技术的一些实施例中，本专利技术提供的发酵方法中，甘薯渣液糖的制备方法包括以下步骤（即专利授权号为ZL201210068852.5的专利申请文件记载的利用甘薯渣制糖制备甘薯渣液糖的方法）：步骤1：将干燥的甘薯渣粉碎后与甘薯淀粉废水混合或用湿渣，调pH值为5.5～8.0，得混合料液；步骤2：步骤1所得混合料液加耐高温淀粉酶在90～105℃或中温淀粉酶在60～90℃保温至I2液测试混合料液变红；调pH为3.0～5.5，加糖化酶、酸性蛋白酶和纤维素酶在40～65℃保温至检测还原糖浓度不再升高，进行灭酶处理；步骤3：对料液进行固液分离，液体浓缩即得甘薯渣液糖，其成分基本为葡萄糖。在本专利技术的另外一些实施例中，本专利技术提供的发酵方法中，甘薯渣液糖的制备方法包括以下步骤（即专利授权号为ZL201210090800.8的专利申请文件记载的利用甘薯渣制糖制备甘薯渣液糖的方法）：步骤1：取甘薯渣粉碎或磋磨湿渣，加甘薯淀粉废水调浆；调浆料pH4.0～6.0，在20～70℃，加纤维素酶和加β-葡聚糖酶水解2～10h；步骤2：在25～60℃，pH3.5～6.0加木聚糖酶和果胶酶水解2～10h；温度30～50℃，pH2.5～6.0，加酸性蛋白酶水解1～8h；升温110～120℃，30min进行灭酶处理；调pH5.5～8.0，加耐高温α-淀粉酶或中温α-淀粉酶水解1～2h；降温40～65℃，调pH3.0～5.5，加糖化酶水解10～20h；步骤3：对料液讲行固液分离，液体浓缩即得甘薯渣液糖，其成分基本为葡萄糖。优选地，本专利技术提供的发酵方法中，以g/mL计，发酵培养基包括以下组分：甘薯渣液糖7°～9°（以葡萄糖的糖度表示）磷酸二氢钾0.02%～0.03%硫酸镁0.01%～0.03%尿素0.1%～0.2%酵母粉0.05%～0.15%水余量。更为优选地，本专利技术提供的发酵方法中，以g/mL计，发酵培养基包括以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种热带假丝酵母，其保藏编号为CGMCC NO.9085。

【技术特征摘要】
1.一种热带假丝酵母，其保藏编号为CGMCCNO.9085。2.如权利要求1所述的热带假丝酵母在制备核糖核酸中的应用。3.如权利要求1所述的热带假丝酵母在制备核苷酸或核苷酸衍生物中的应用。4.如权利要求1所述的热带假丝酵母在制备饲料中的应用。5.一种如权利要求1所述的热带假丝酵母的发酵方法，其特征在于，包括：接种所述热带假丝酵母于发酵培养基中，发酵。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基中的碳源由甘薯渣液糖提供。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，以g/mL计，所述发酵培养基包括以下组分：甘薯渣液糖7°～9°（以葡萄糖的糖度表示）磷酸二氢钾0.02%～0.03%硫酸镁0.01%～0.03%尿素0.1%～0.2%酵母粉0.05%～0.15%水余量。8.一种利用如权利要求1所述的热带假丝酵母制备核糖核酸的方法，其特征在于，包括：接种所述热带假丝酵母于发酵培养基中发酵，收集菌体，提取核糖核酸，即得。...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜显雨，易勇，张继祥，吴倩，付传超，胡晓清，王栋，胡南，尚建丽，李洪兴，
申请(专利权)人：山东圣琪生物有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37