用于检测鸽副伤寒沙门氏菌的核酸、试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术提供了一种用于鸽副伤寒沙门氏菌检测的核酸、试剂盒及检测方法。本发明专利技术提供了检测鸽副伤寒沙门氏菌的引物对和用于检测沙门氏菌属的内参引物对，扩增片段大小分别为鸽副伤寒沙门氏菌为613bp和沙门氏菌属为463bp。本发明专利技术建立了一种快速准确的检测出鸽副伤寒沙门氏菌的PCR检测方法，该方法能够准确检测临床可疑菌株样品，区分其他常见致病性沙门氏菌血清型，且非沙门氏菌致病菌的扩增结果为阴性。本发明专利技术的检测方法特异性好、灵敏度高、检测时间短、操作简单和结果易于判定，对设备的要求低，仅需半天即可完成检测，对于疫情的诊断和控制具有十分重要的作用，从而最大程度地避免了经济损失及对公共健康造成的危害。

Nucleic acid, kit and detection method for detecting Salmonella pigeon paratyphoid

The invention provides a nucleic acid, reagent kit and detection method for detection of Salmonella typhimurium in pigeon. The invention provides a pair of primers for detecting Salmonella paratyphi in pigeons and an internal reference pair for detecting Salmonella. The amplified fragments are 613 BP for Salmonella paratyphi in pigeons and 463 BP for Salmonella. The invention establishes a rapid and accurate PCR detection method for detecting Salmonella paratyphi in pigeons. The method can accurately detect suspected clinical strain samples, distinguish other common pathogenic Salmonella serotypes, and the amplification result of non-Salmonella pathogenic bacteria is negative. The detection method of the invention has the advantages of good specificity, high sensitivity, short detection time, simple operation and easy judgment, low requirement for equipment, and can complete the detection in only half a day. It plays an important role in the diagnosis and control of epidemic situation, thus avoiding the economic loss and the danger to public health to the greatest extent. Harm.

【技术实现步骤摘要】
用于检测鸽副伤寒沙门氏菌的核酸、试剂盒及检测方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种用于检测鸽副伤寒沙门氏菌的核酸以及含有该核酸的试剂盒和检测方法。
技术介绍
沙门氏菌是一种重要的食源性病菌，是威胁公众卫生安全的一种重要的致病菌，有2600多个血清型，该细菌能引起各种家禽和哺乳动物的传染病，也可引起人类疾病，是一种重要的人畜共患病病原。其中鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)属于沙门氏菌B群。鼠伤寒沙门氏菌(哥本哈根变种)是鸽副伤寒病的病原菌，对幼鸽具有较强的致病性，然而，目前国内关于鸽源沙门氏菌的诊断研究较少，对该菌的检测主要依靠传统的培养方法(参见国标GB/T4789.4-2008)，该方法需经选择性增菌培养，并通过生化反应及血清学试验鉴定，操作步骤复杂，不利于及时诊断病因，确定病源，控制病情的蔓延。另外，沙门氏菌血清学检测仍然是通过细菌与特异性抗体的凝集反应鉴别其O抗原和H抗原，根据White-Kauffmann-LeMinor抗原表确定沙门氏菌的血清型。但该方法容易受试验人员主观因素影响，对某些血清型的鉴别容易混淆，甚至无法鉴别，必须通过常规的生本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一组用于检测鸽副伤寒沙门氏菌的核酸，其特征在于，包括鸽副伤寒沙门氏菌上游引物和鸽副伤寒沙门氏菌下游引物，所述鸽副伤寒沙门氏菌上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述鸽副伤寒沙门氏菌下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

【技术特征摘要】
1.一组用于检测鸽副伤寒沙门氏菌的核酸，其特征在于，包括鸽副伤寒沙门氏菌上游引物和鸽副伤寒沙门氏菌下游引物，所述鸽副伤寒沙门氏菌上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，所述鸽副伤寒沙门氏菌下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。2.根据权利要求1所述的核酸，其特征在于，还包括用于检测沙门氏菌的内参核酸，包括内参上游引物和内参下游引物，所述内参上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示，所述内参下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。3.根据权利要求1所述的核酸，其特征在于，还包括鸽副伤寒沙门氏菌阳性对照，所述鸽副伤寒沙门氏菌阳性对照含如SEQIDNO.5所示的核苷酸序列。4.含有权利要求1-3中任一项所述核酸的检测试剂盒。5.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括2×Premix，所述2×Premix包括PCR反应缓冲液、Mg2+、dNTP和Taq酶。6.一种检测鸽副伤寒沙门氏菌的方法，其特征在于，其包括以下步骤：S1、提取待检样品基因组DNA；S2、对提取的所述基因组DNA采用根据权利要求4或5所述的检测试剂盒进行PCR扩增，获得扩增产物；S3、用琼脂糖凝胶电泳检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：张莉，陈小玲，章振华，先宏，杨兵，陈葵，许健，樊艺丹，闫伟，卢秋翰，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：北京,11