The invention provides a GPCR targeted drug screening system, and its construction and application. The GPCR targeting drug screening system is characterized by: PB beta arrestin TEV Nia composed of beta arrestin and protease of tobacco etching virus; and PB TRE GFP composed of Tet response element and GFP. The GPCR targeting drug screening system PiggyBac Tango, compared with the previous drug screening system, has the following advantages: (1) high stability (long-term stable expression of components by inserting them into genome using PiggyBac); (2) high sensitivity (integration of exogenous genes in the form of multiple copies, amplification of detection signals); (3) high sensitivity. High signal-to-noise ratio; (4) low cost (no detection reagent); (5) in vivo detection (which can reflect the cytotoxicity of the ligand to be tested). The PiggyBac Tango system is an effective tool for GPCR targeted drug discovery and development.
【技术实现步骤摘要】
一种GPCR靶向药物筛选系统及其构建和应用
本专利技术涉及一种GPCR靶向药物筛选系统及其构建和应用。
技术介绍
G蛋白偶联受体(Gprotein-coupledreceptors，GPCRs)家族是人类中最庞大的膜蛋白家族，也是当前研究最成功的药物靶标之一，迄今已有34％左右的上市药物以GPCR为靶点1-3。据统计，2011至2015年期间，靶向GPCR的药物销量占全球市场的27％，销售额达到8900亿美金2，4。尽管GPCR在所有成药性靶点中占比最大，但仍有四分之三的GPCR成员尚未被开发成药物靶点；目前只有约80种GPCR分子具有相对应的小分子药物5，6。因此，基于重大疾病导向的GPCR配体研发需求十分迫切。GPCR靶向药物筛选面临的挑战之一就是创新的高通量药物筛选体系的构建。我们拟研发构建高通量、通用的、高稳定性的、基于活体细胞的GPCRs靶向药物筛选系统。GPCR新型配体的发现与鉴定在新药研发过程中起到关键性作用，用于GPCR配体高通量筛选的方法应该具有稳定、非放射性、低成本、通用的、操作简单等特性7。传统常用的方法大多都是基于G蛋白依赖的功能分析。但这...
【技术保护点】
1.一种GPCR靶向药物筛选系统，其特征在于，包括：将β‑arrestin和烟草蚀纹病毒蛋白酶连接组成的PB‑β‑arrestin‑TEV Nia；以及将Tet应答元件和GFP连接组成的PB‑TRE‑GFP。
【技术特征摘要】
1.一种GPCR靶向药物筛选系统，其特征在于，包括：将β-arrestin和烟草蚀纹病毒蛋白酶连接组成的PB-β-arrestin-TEVNia；以及将Tet应答元件和GFP连接组成的PB-TRE-GFP。2.如权利要求1所述的GPCR靶向药物筛选系统，其特征在于，所述的PB-β-arrestin-TEVNia和PB-TRE-GFP均以Piggybac为载体。3.如权利要求1所述的GPCR靶向药物筛选系统，其特征在于，所述的PB-β-arrestin-TEVNia和PB-TRE-GFP序列分别为SEQIDNO.2和SEQIDNO.5。4.如权利要求1所述的GPCR靶向药物筛选系统，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：张玉，黄行许，黄诚，
申请(专利权)人：上海科技大学，
类型：发明
国别省市：上海,31
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