一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法，是将甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液以及瘤胃梭菌富集液按体积比2:1:1的比例混合，制成老窖微生态功能菌液。所述甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液和瘤胃梭菌富集液均为培养至对数期的菌液。本发明专利技术通过把模拟老窖微生态功能菌液应用于制作新窖泥和窖池养护，促进窖池微生物群落结构的稳定，也为微生物的生长代谢提供了良好的环境基础，使得窖池产酒酒质明显提高，主体香更加突出，风味口感更好，浓香风格更加凸显。

A method for simulating microbial ecological function of old cellar

The invention discloses a preparation method of microecological functional bacterial liquid for simulated old cellar. The microecological functional bacterial liquid for old cellar is prepared by mixing methane bacterial enrichment liquid, Petrimonas bacterial enrichment liquid and Clostridium ruminalis enrichment liquid in a volume ratio of 2:1:1. The methane bacteria enrichment solution, Petrimonas bacteria enrichment solution and Clostridium ruminalis enrichment solution are all cultured to logarithmic phase. The invention promotes the stability of microbial community structure in pits by applying simulated microecological function bacterial liquid of old pits to make new pit mud and pit maintenance, and provides a good environmental basis for microbial growth and metabolism, so that the quality of wine produced in pits is improved significantly, the main aroma is more prominent, the flavor taste is better, and the strong aroma style is better. More prominent.

【技术实现步骤摘要】
一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法
本专利技术涉及一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法，属于酿酒

技术介绍
浓香型白酒的酿造过程是以环境微生物、大曲微生物和窖泥微生物等复杂物质的能量代谢过程。泥窖固态发酵是浓香型白酒典型的特点，生产上有“千年窖池万年糟，酒好全凭窖池老”的说法，但窖泥自然老熟所需时间较长，模拟老窖池窖泥微生态以及营养成分制作人工窖泥或窖泥养护液，可以加快新窖池老熟，提高新窖产酒酒质。目前，对模拟老窖，构建新窖泥微生态环境，以提高新窖泥的品质或利用补加功能菌液促进新窖老熟的相关研究较少，是一大技术难题。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法，强化制作新窖泥微生态系统和促进新窖老熟，从而提高新窖的微生物群落结构的稳态机制，缩短新窖老熟时间，防止新窖老化。本专利技术制备的功能菌液可以提升新窖产酒酒质、名酒率，同时可以用于养窖、护窖。本专利技术通过高通量测序解析优质老窖微生态群落结构，发现优质老窖泥中在属的分类上主要有20个属，其中所占比例较高的菌系主要包括甲烷菌：Methanobacterium8.19％、Methanoculleus3.7％、Methanosarcina19.50％、Petrimonas16.83％，瘤胃梭菌：Ruminiclostridium16.57％以及未分类菌：Unclassified17.16％。本专利技术根据解析的优质老窖中的微生态结构群落组成，模拟其微生态结构和营养组分进行功能菌液的制备。本专利技术模拟老窖微生态功能菌液的制备方法，是将甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液以及瘤胃梭菌富集液按体积比2:1:1的比例混合，制成老窖微生态功能菌液。所述甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液和瘤胃梭菌富集液均为培养至对数期的菌液。所述甲烷菌富集液是通过包括如下步骤的方法制备得到：将甲烷菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水(煮沸后冷却至30～50℃的水)或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5～10％体积比的接种量接种优质窖泥，于30～34℃富集培养7～15天，重复上述步骤富集培养2～3次，得到甲烷菌富集液。所述甲烷菌富集培养基按质量百分比构成如下：K2HPO40.1～0.4‰，KH2PO40.2～0.5‰，NH4Cl0.5～1.0‰，MgCl2-6H2O0.1～0.4‰，半胱氨酸0.5～1.0‰，酵母膏0.6～1.0‰，乙酸钠2.0～5.0‰，甲酸钠2.0～5.0‰，Na2SO40.2～0.4‰，NaCl0.5～1.0‰，NaHCO30.2～0.5‰，CaCl2-2H2O0.15～0.3‰，蛋白胨1.0～2.5‰，D-葡萄糖0.5～1.5‰，Na2S2.0～5.0‰，刃天青(0.1％，1000倍)1～2‰，微量元素溶液1.0～1.5％，维生素溶液1.0～1.5％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5～7.0。所述Petrimonas菌富集液是通过包括如下步骤的方法制备得到：将Petrimonas菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水(煮沸后冷却至30～50℃的水)或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5～10％体积比的接种量接种优质窖泥，于30～34℃富集培养7～15天，重复上述步骤富集培养2～3次，获得Petrimonas菌富集液。所述Petrimonas菌富集培养基按质量百分比构成如下：MES0.5～1.0‰，KH2PO40.5～1.0‰，Na2SO410.0～15.0‰，NaCl0.5～1.0‰，MgCl2-6H2O0.3～0.5‰，NaHCO34.0～6.0‰，CaCl2-2H2O0.15～0.3‰，酵母提取物1.0～2.0‰，蛋白胨1.5～2.0‰，D-葡萄糖0.5～1.5‰，Na2S2.0～3.0‰，L-半胱氨酸0.5～1.0‰，刃天青(0.1％，1000倍)1～2‰，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5～7.0。所述瘤胃梭菌富集液是通过包括如下步骤的方法制备得到：将瘤胃梭菌培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水(煮沸后冷却至30～50℃的水)或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5～10％体积比的接种量接种优质窖泥，于30～34℃富集培养7～15天，重复上述步骤富集培养2～3次，获得瘤胃梭菌富集液。所述瘤胃梭菌培养基参考陶勇等的专利技术专利(一株瘤胃菌及其应用)中的配方，按质量百分比构成如下：MES0.5～1.0‰，酪蛋白胨10.0‰，酵母膏2.5‰，碳酸氢钠4.0‰，半胱氨酸1‰，磷酸氢二钾0.45‰，磷酸二氢钾0.45‰，氯化钠0.9‰，七水硫酸镁0.09‰，氯化钙0.09‰，刃天青(0.1％，1000倍)1～2‰，氯化血红素0.001‰，乳酸0.5％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，微量元素溶液1～5‰，维生素溶液1～5‰，pH值5.5～6.0。上述培养基配制过程中使用的酵母提取物为市购产品，又称酵母膏。所述微量元素溶液以1L计组分构成如下：H3BO30.01g，CaCl2·2H2O0.1g，FeSO4·7H2O0.1g，ZnSO4·7H2O0.1g，MnSO4·H2O0.5g，CuSO4·5H2O0.01g，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.01g，KAl(SO4)2·12H2O0.1g，CoC12·6H2O0.1g，NaCl1.0g，MgSO4·7H2O3.0g。所述维生素溶液以1L计组分构成如下：生物素2.0mg，叶酸2.0mg，盐酸吡哆醇10.0mg，核黄素(B2)5.0mg，硫胺素(B1)5.0mg，烟酸5.0mg，对氨基苯甲酸5.0mg，泛酸5.0mg，硫幸酸5.0mg，pH值7.0。所述窖泥浸提液是将优质窖泥按质量1:50～100的比例加入温开水(煮沸后冷却至30～50℃的水)，搅拌混匀后静置1-2h，留取上清液即为窖泥浸提液。所述优质窖泥为窖龄≥50年，且一直在连续使用的、产酒酒质较好(公司基酒评级为A级或B级的酒)的老窖池池底窖泥。所述黄浆水为优质老窖(窖龄≥50年，且一直在连续使用的窖池)起窖时的新鲜黄浆水，香气要纯正，能起到带入微生物生长因子及调节培养基pH值的作用。本专利技术模拟老窖微生态功能菌液的制备过程在厌氧条件下进行，避免接触太多的溶解氧。本专利技术制备的模拟老窖微生态功能菌液为深棕色，气味为己酸为主的复合香味，其中总菌数≥2～5×1010个/mL。按照3～5％质量比与曲粉、酒糟和酯化红曲霉添加到窖泥原料中得到生态窖泥，窖香味明显、窖泥颜色较深，更加柔熟细腻，断面也更加均匀，有一定的粘稠感，更接近浓香型白酒老窖泥的感官要求。将新制窖泥应用酿造产酒基酒的名酒率提高4～11％。所得模拟老窖微生态功能菌液应用于窖池养护和新窖老熟时，可以将功能菌液均匀喷洒至新窖窖壁与窖底促进新窖老熟或窖池大培养应用。本专利技术的有益效果体现在：1、解决了新窖池窖泥微生态群落结构不稳定，产酒酒质差的问题。2、促进新窖老熟，防止窖池老化，起到养窖护窖的作用。3、提高了新窖产酒的名酒率。本专利技术通过把模拟老窖微生态功能菌液应用于本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法，其特征在于：是将甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液以及瘤胃梭菌富集液按体积比2:1:1的比例混合，制成老窖微生态功能菌液。

【技术特征摘要】
1.一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法，其特征在于：是将甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液以及瘤胃梭菌富集液按体积比2:1:1的比例混合，制成老窖微生态功能菌液。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液和瘤胃梭菌富集液均为培养至对数期的菌液。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于所述甲烷菌富集液是通过包括如下步骤的方法制备得到：将甲烷菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5～10％体积比的接种量接种优质窖泥，于30～34℃富集培养7～15天，重复上述步骤富集培养2～3次，得到甲烷菌富集液。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述甲烷菌富集培养基按质量百分比构成如下：K2HPO40.1～0.4‰，KH2PO40.2～0.5‰，NH4Cl0.5～1.0‰，MgCl2-6H2O0.1～0.4‰，半胱氨酸0.5～1.0‰，酵母膏0.6～1.0‰，乙酸钠2.0～5.0‰，甲酸钠2.0～5.0‰，Na2SO40.2～0.4‰，NaCl0.5～1.0‰，NaHCO30.2～0.5‰，CaCl2-2H2O0.15～0.3‰，蛋白胨1.0～2.5‰，D-葡萄糖0.5～1.5‰，Na2S2.0～5.0‰，刃天青1～2‰，微量元素溶液1.0～1.5％，维生素溶液1.0～1.5％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5～7.0。5.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于所述Petrimonas菌富集液是通过包括如下步骤的方法制备得到：将Petrimonas菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5～10％体积比的接种量接种优质窖泥，于30～34℃富集培养7～15天，重复上述步骤富集培养2～3次，获得Petrimonas菌富集液。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述Petrimonas菌富集培养基按质量百分比构成如下：MES0.5～1.0‰，KH2PO40.5～1.0‰，Na2SO410....

【专利技术属性】
技术研发人员：王艳丽，何宏魁，刘国英，李安军，周庆伍，王录，孟雅静，李静心，
申请(专利权)人：安徽瑞思威尔科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34