一种快速比较番茄品种耐高温干旱特性的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速比较番茄幼苗耐高温干旱特性的方法，包括：播种，播种18‑23天后将幼苗移至人工气候箱适应，每天早上浇营养液，适应第7天，取第1片完全展开叶，立即称取鲜重，室内常温自然放置1h和20h后，再次称取叶片鲜重，计算WLR1h‑对照和WLR20h‑对照；称重当天晚上开始高温干旱处理，温度为40℃，停止灌溉，处理48h后，取第1片完全展开叶，立即称取鲜重，室内常温自然放置1h和20h后，再次称取叶片的鲜重，计算WLR1h‑胁迫和WLR20h‑胁迫；根据(|WLR1h‑胁迫‑WLR1h‑对照|+|WLR20h‑胁迫‑WLR20h‑对照|)/2的值比较番茄品种的耐高温干旱特性。

A fast comparison method for tomato varieties to endure high temperature and drought

The invention discloses a method for quickly comparing the high temperature and drought resistance characteristics of tomato seedlings, including: sowing, moving the seedlings to an artificial climate box after 18 to 23 days of sowing, watering nutrient solution every morning, adapting to the seventh day, taking the first fully unfolded leaf, weighing the fresh weight immediately, and then weighing again after natural placement at room temperature for 1 hour and 20 hours. The fresh weight of leaves was calculated by comparing WLR1h with WLR20h. On the evening of weighing day, high temperature and drought treatment was started, and irrigation was stopped at 40 C. After 48 hours of treatment, the first fully expanded leaf was taken and fresh weight was immediately weighed. After natural storage at room temperature for 1 h and 20 h, fresh weight of leaves was weighed again, and WLR1h stress and WLR20h were calculated. Stress; High temperature and drought tolerance of tomato varieties were compared according to (| WLR 1H stress WLR 1H control + | WLR 20h stress WLR 20h control)/2.

【技术实现步骤摘要】
一种快速比较番茄品种耐高温干旱特性的方法
本专利技术属于番茄耐逆性比较生物
，具体涉及一种快速比较番茄品种耐高温干旱特性的方法。
技术介绍
番茄(SolanumlycopersicumL.)是世界性的重要蔬菜，广泛用于露地和设施栽培。然而，非生物环境因子引起的非生物胁迫会对番茄的栽培种植造成不良影响。一方面，随着全球气候变暖，高温胁迫对番茄生产的影响日趋严重，同时在番茄的越夏栽培中，高温胁迫也常常发生。另一方面，降雨不足或土壤水分缺乏引起的干旱胁迫也会对番茄的生产造成危害。高温和干旱胁迫严重限制了世界作物产量，对农业经济造成巨大损失。值得注意的是，在自然条件下，多种非生物胁迫常常同时发生，尤其是高温和干旱，高温干旱复合胁迫往往比单一胁迫对番茄的危害更大。专利技术人通过前期研究发现，在高温胁迫下，叶绿素荧光参数Fv/Fm能够比较不同番茄品种的耐受性差异[1]。在干旱胁迫下，植株叶片的失水率(Waterlossrate，简写WLR，单位为％)保持不变，表明该植株保水性越好，耐旱性越强[2]。不同番茄品种对高温干旱复合胁迫的敏感程度不同[3]。然而，目前缺乏一种快速有效比较番茄幼苗耐高温干旱特性的方法[3]。
技术实现思路
专利技术人研究发现，对于番茄而言，在高温干旱复合胁迫下，干旱胁迫起主导作用，即在高温干旱复合胁迫下，番茄叶片的保水性越好，则耐高温干旱的特性越强，番茄的响应在40℃处理下比36℃处理下更为明显，因此本专利技术采用40℃极端高温处理；同时为了防止反复灌溉引起的恢复影响实验结果，采用停止灌溉的方法进行干旱胁迫，高温干旱复合胁迫48h后，不同番茄品种表现出差异。因此，本专利技术目的在于提供一种快速比较番茄幼苗耐高温干旱特性的方法，利用高温干旱胁迫下番茄叶片的失水率来判断番茄受到高温干旱胁迫伤害的程度，以解决现有技术中缺乏一种快速有效比较高温干旱胁迫下番茄品种耐受性方法的问题，为番茄幼苗耐高温干旱特性的快速比较和表型分型奠定基础。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种快速比较番茄品种耐高温干旱特性的方法，包括以下步骤：步骤(1)、将基质装入穴盘中，播种前基质浇透水，将待比较的番茄种子播于穴盆中，每孔播2粒种子，播种后覆盖一层基质；播种7-14天后，去除多余的苗，每孔保留一棵苗；步骤(2)、播种18-23天后，将幼苗置于人工气候箱内适应培养，每天早上8:00使用日本园试配方营养液浸没穴盘；步骤(3)、幼苗在人工气候箱内适应培养第7天，取第1片完全展开叶作为对照叶片，立即称取对照叶片鲜重FW0h-对照作为对照，常温室内自然放置1h和20h后，分别称取叶片鲜重FW1h-对照、FW20h-对照；步骤(4)、对照叶片称重当天晚上19:00开始40℃极端高温连续处理48h，并停止灌溉，使幼苗在短时间内受到严重的高温干旱协同胁迫，从而检测幼苗对复合胁迫的耐受性；步骤(5)、高温干旱处理后，取第1片完全展开叶，立即称取胁迫处理叶片鲜重FW0h-胁迫，室内常温自然放置1h和20h后，再次称取叶片鲜重FW1h-胁迫、FW20h-胁迫；步骤(6)、明确叶片在短时间(1h)和长时间(20h)内的失水情况，计算对照叶片失水率和胁迫处理叶片失水率：WLR1h-对照＝[(FW1h-对照-FW0h-对照)/FW0h-对照]*100，WLR20h-对照＝[(FW20h-对照-FW0h-对照)/FW0h-对照]*100，WLR1h-胁迫＝[(FW1h-胁迫-FW0h-胁迫)/FW0h-胁迫]*100，WLR20h-胁迫＝[(FW20h-胁迫-FW0h-胁迫)/FW0h-胁迫]*100；分别计算1h和20h对照叶片和胁迫处理叶片失水率的差值的绝对值|WLR1h-胁迫-WLR1h-对照|、|WLR20h-胁迫-WLR20h-对照|，进一步计算获得(|WLR1h-胁迫-WLR1h-对照|+|WLR20h-胁迫-WLR20h-对照|)/2的值，用于评价番茄品种的高温干旱特性；若(|WLR1h-胁迫-WLR1h-对照|+|WLR20h-胁迫-WLR20h-对照|)/2的值越小，则该番茄品种越耐高温干旱复合胁迫；(|WLR1h-胁迫-WLR1h-对照|+|WLR20h-胁迫-WLR20h-对照|)/2的值越大，则该番茄品种对高温干旱复合胁迫越敏感。步骤(1)中，所述的基质是品氏有机基质。所述的穴盘的长度为54cm，宽度为27cm，共50孔。移至人工气候箱之前，番茄幼苗生长的温度、光照、水分和湿度等条件适宜，为本领域技术人员公知操作。步骤(2)中，所述的人工气候箱型号为RDN-560E-4，来自于宁波东南仪器有限公司，共4层，每层可放置2个穴盘。高温干旱处理前，人工气候箱内的温度设置为26/18℃，白天/黑夜为14h/10h，白天5:00-19:00，黑夜19:00-次日5:00，相对湿度为60％，光照强度为25000lux。使用500-800mL日本园试配方营养液浸没穴盘。本专利技术采用天平测定叶片鲜重，精确到小数点后四位数。叶片放置在同一地点。本专利技术中每个番茄品种设置三个重复。步骤(6)中，优选的，所述的评价番茄品种的高温干旱特性标准：(|WLR1h-胁迫-WLR1h-对照|+|WLR20h-胁迫-WLR20h-对照|)/2的值≤0.8，则该番茄基因型的耐高温干旱特性强；(|WLR1h-胁迫-WLR1h-对照|+|WLR20h-胁迫-WLR20h-对照|)/的值≥22.0，则该番茄基因型对高温干旱复合胁迫较为敏感。与现有技术相比，本专利技术的有益效果：本专利技术利用对照和高温干旱复合胁迫处理48h后叶片失水率(WLR)在短时间(1h)和长时间(20h)后的变化，可在短时间内快速准确比较番茄幼苗的耐高温干旱特性，对番茄耐高温干旱复合胁迫特性评价的准确率可达100％，为作物的耐高温干旱复合胁迫特性的评价和材料筛选提供有效方法，有利于作物耐逆育种。同时，本专利技术方法使用的每个人工气候箱最多可放置8个穴盘，每个穴盘最多可播种16个番茄品种，即一批最多可比较128个番茄品种。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述。基于本专利技术实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1一种快速比较番茄幼苗耐高温干旱特性的方法：步骤(1)、将番茄种子播于装有品氏有机基质(Pindstrup，丹麦)的穴盘中，穴盘的长度为54cm，宽度为27cm，共50孔；每个孔播2粒种子，每个番茄品种播种3个孔；将穴盘置于温室或大棚内，在外界温度、光照、水分和湿度等适宜的条件下培育；播种14天后，若一个孔出2棵苗，则仅保留一棵苗；步骤(2)、播种23天后，将穴盘置于人工气候箱内适应，人工气候箱的温度设置为26/18℃(14h/10h，白天/黑夜)，相对湿度为60％，光照强度为25000lux；人工气候箱共4层，每层放置2个穴盘；高温干旱处理前，每天早上8:00使用500mL日本园试配方营养液浸没穴盘；步骤(3)、播种后第30天，取第1片完全展开叶作为对照叶片，立即用天平称取鲜重(即FW0h-对照，精确到小数点后四位数，同下)，室内常温自然放置1h和20h后，用相同的天平分别称取叶片鲜重(即FW1h-对照、FW20本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速比较番茄品种耐高温干旱特性的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤(1)、将基质装入穴盘中，播种前基质浇透水，将待比较的番茄种子播于穴盆中，每孔播2粒种子，播种后覆盖一层基质；播种7‑14天后，去除多余的苗，每孔保留一棵苗；步骤(2)、播种18‑23天后，将幼苗置于人工气候箱内适应培养，每天早上8:00使用日本园试配方营养液浸没穴盘；步骤(3)、幼苗在人工气候箱内适应培养第7天，取第1片完全展开叶作为对照叶片，立即称取对照叶片鲜重FW0h‑对照，常温室内自然放置1h和20h后，分别称取叶片鲜重FW1h‑对照、FW20h‑对照；步骤(4)、对照叶片称重当天晚上19:00开始40℃高温处理48h，并停止灌溉；步骤(5)、高温干旱处理后，取第1片完全展开叶，立即称取胁迫处理叶片鲜重FW0h‑胁迫，室内常温自然放置1h和20h后，分别称取叶片鲜重FW1h‑胁迫、FW20h‑胁迫；步骤(6)、计算对照叶片失水率：WLR1h‑对照＝[(FW1h‑对照‑FW0h‑对照)/FW0h‑对照]*100，WLR20h‑对照＝[(FW20h‑对照‑FW0h‑对照)/FW0h‑对照]*100；计算胁迫处理叶片失水率：WLR1h‑胁迫＝[(FW1h‑胁迫‑FW0h‑胁迫)/FW0h‑胁迫]*100，WLR20h‑胁迫＝[(FW20h‑胁迫‑FW0h‑胁迫)/FW0h‑胁迫]*100；分别计算1h和20h对照叶片和胁迫处理叶片失水率的差值的绝对值，根据|WLR1h‑胁迫‑WLR1h‑对照|和|WLR20h‑胁迫‑WLR20h‑对照|的平均值，评价不同番茄品种的高温干旱特性。...

【技术特征摘要】
1.一种快速比较番茄品种耐高温干旱特性的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤(1)、将基质装入穴盘中，播种前基质浇透水，将待比较的番茄种子播于穴盆中，每孔播2粒种子，播种后覆盖一层基质；播种7-14天后，去除多余的苗，每孔保留一棵苗；步骤(2)、播种18-23天后，将幼苗置于人工气候箱内适应培养，每天早上8:00使用日本园试配方营养液浸没穴盘；步骤(3)、幼苗在人工气候箱内适应培养第7天，取第1片完全展开叶作为对照叶片，立即称取对照叶片鲜重FW0h-对照，常温室内自然放置1h和20h后，分别称取叶片鲜重FW1h-对照、FW20h-对照；步骤(4)、对照叶片称重当天晚上19:00开始40℃高温处理48h，并停止灌溉；步骤(5)、高温干旱处理后，取第1片完全展开叶，立即称取胁迫处理叶片鲜重FW0h-胁迫，室内常温自然放置1h和20h后，分别称取叶片鲜重FW1h-胁迫、FW20h-胁迫；步骤(6)、计算对照叶片失水率：WLR1h-对照＝[(FW1h-对照-FW0h-对照)/FW0h-对照]*100，WLR20h-对照＝[(FW20h-对照-FW0h-对照)/FW0h-对照]*100；计算胁迫处理叶片失水率：WLR1h-胁迫＝[(FW1h-胁迫-FW0h-胁迫)/FW0h-胁迫]*100，WLR20h-胁迫＝[(FW20h-胁迫-FW0h-胁迫)/FW0h-胁迫]*100；分别计算1h和20h对照叶片和胁迫处理叶片失水率的差值的绝对值，根据|WLR1h-胁迫-WLR1h-对照|和|WLR20h-胁迫-WLR20h-对照|的平均值，评价不同番茄品种的高温干旱特性。2.根据权利要求1所述的快速比较番茄品种耐高温干旱特性的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的基质是品氏有机基质。3.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：周蓉，赵统敏，王银磊，赵丽萍，宋刘霞，余文贵，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32