植物调控元件和其用途制造技术

本发明专利技术提供适用于调节植物中的基因表达的重组DNA分子和构建体，以及其核苷酸序列。本发明专利技术还提供包含含有可操作地连接至异源可转录DNA分子的DNA分子的重组DNA分子的转基因植物、植物细胞、植物部分和种子，以及其使用方法。

【技术实现步骤摘要】
植物调控元件和其用途本申请是申请日为2014年3月11日、申请号为201480022713.6的专利技术名称为“植物调控元件和其用途”的专利技术专利申请的分案申请。相关申请的引用本申请要求2013年3月14日提交的美国临时序列号61/785,268的权益，所述申请以引用的方式整体并入本文。序列表的并入名称为“MONS332WO.txt”的文件中含有的序列表通过电子方式提交来与本文一起提交并且以引用的方式并入本文，所述序列表是52.7千字节(在Microsoft中测量的大小)并且创建于2014年3月11日。专利
本专利技术涉及植物分子生物学、植物遗传工程和适用于调节植物中的基因表达的DNA分子的领域。
技术介绍
调控元件是通过调节可操作连接可转录DNA分子的转录来调控基因活性的遗传元件。这类元件可包括启动子、前导区、内含子和3′未翻译区域并且适用于植物分子生物学和植物遗传工程领域。专利技术概述本专利技术提供用于包含调控元件的植物和构建体中的新颖调控元件。本专利技术还提供包含调控元件的转基因植物细胞、植物和种子。在本文公开的一个实施方案中，调控元件可操作地连接至可转录DNA分子。在某些实施方案中，可转录DNA分子相对于调控序列是异源的。本文还提供制造和使用本文公开的调控元件的方法，包括包含调控元件的构建体，和包含可操作地连接至相对于调控元件异源的可转录DNA分子的调控元件的转基因植物细胞、植物和种子。因此，在一方面，本专利技术提供包含选自由以下组成的组的DNA序列的重组DNA分子：(a)具有与SEQIDNO:1-37中任何一个至少约85％序列同一性的DNA序列；(b)包含SEQIDNO:1-37中任何一个的DNA序列；和(c)SEQIDNO:1-37中任何一个的片段，其中所述片段具有基因调控活性；其中所述DNA序列可操作地连接至异源可转录DNA分子。“异源可转录DNA分子”是指所述可转录DNA分子相对于其可操作地连接的所述DNA序列为异源的。在具体实施方案中，重组DNA分子包含与SEQIDNO:1-37中任何一个的DNA序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性的DNA序列。在具体实施方案中，异源可转录DNA分子包含具有农艺学重要性的基因，如能够在植物中提供除草剂抗性或害虫抗性的基因。在其他实施方案中，本专利技术提供包含如本文提供的重组DNA分子的构建体。在另一方面，本文提供转基因植物细胞，其包括包含选自由以下组成的组的DNA序列的重组DNA分子：(a)具有与SEQIDNO:1-37中任何一个至少约85％序列同一性的DNA序列；(b)包含SEQIDNO:1-37中任何一个的DNA序列；和(c)SEQIDNO:1-37中任何一个的片段，其中所述片段具有基因调控活性；其中所述DNA序列可操作地连接至异源可转录DNA分子。在某些实施方案中，转基因植物细胞是单子叶植物细胞。在其他实施方案中，转基因植物细胞是双子叶植物细胞。在仍然另一个方面，本文进一步提供转基因植物或其部分，其包括包含选自由以下组成的组的DNA序列的重组DNA分子：(a)具有与SEQIDNO:1-37中任何一个至少85％序列同一性的DNA序列；(b)包含SEQIDNO:1-37中任何一个的DNA序列；和(c)SEQIDNO:1-37中任何一个的片段，其中所述片段具有基因调控活性；其中所述DNA序列可操作地连接至异源可转录DNA分子。在具体实施方案中，转基因植物是相对于起始转基因植物的任何世代的子代植物并且包含重组DNA分子。本文还提供包含在生长时产生这类转基因植物的重组DNA分子的转基因种子。在另一方面，本专利技术提供产生商品产品的方法，其包括获得含有本专利技术的重组DNA分子的转基因植物或其部分并且从其中产生所述商品产品。在一个实施方案中，商品产品是加工种子、颗粒、植物部分和粗粉。在仍然另一个方面，本专利技术提供产生包含本专利技术的重组DNA分子的转基因植物的方法，其包括用本专利技术的重组DNA分子来转化植物细胞以产生转化植物细胞并且使转基因植物从所述转化植物细胞再生。附图简述图1：展示本专利技术的表达盒配置。序列简述SEQIDNO:1-30、38-41、49和56是3′UTR序列。SEQIDNO:31、35、42、47、48、50、51、52、53、54和55是调控表达元件组(EXP)的DNA序列，其包含5′可操作地连接至前导序列的启动子序列，所述前导序列5′可操作地连接至内含子序列；或5′可操作地连接至前导序列的启动子序列。SEQIDNO:32、36和43是启动子序列。SEQIDNO:33和37是前导序列。SEQIDNO:34是内含子序列。SEQIDNO:44是具有可加工内含子的β-葡糖醛酸酶(GUS)的编码序列。SEQIDNO:45和46是荧光素酶编码序列。专利技术详述本专利技术提供在植物中具有基因调控活性的DNA分子。这些DNA分子的核苷酸序列提供为SEQIDNO:1-37。这些DNA分子能够影响植物组织中的可操作地连接可转录DNA分子的表达，并且因此调控转基因植物中的可操作地连接转基因的基因表达。本专利技术还提供修饰、产生和使用这些分子的方法。本专利技术还提供包括含有本专利技术的重组DNA分子的转基因植物细胞、植物、植物部分和种子的组合物，和制备和使用所述组合物的方法。提供以下定义和方法是为了更好地界定本专利技术以及指导本专利技术的一般技术人员实践本专利技术。除非另外指出，否则术语应按照相关
的普通技术人员的常规用法来理解。DNA分子如本文使用，术语“DNA”或“DNA分子”是指基因组或合成来源的双链DNA分子，即，脱氧核苷酸碱基的聚合物。如本文使用，术语“DNA序列”是指DNA分子的核苷酸序列。本文使用的命名法对应于美国联邦法规§1.822的标题37，并且在WIPO标准ST.25(1998)，附录2，表1和3的表中阐明。如本文使用，“重组DNA分子”是包含在没有人为干预的情况下完全不会自然出现的组合DNA分子的DNA分子。例如，重组DNA分子可为包含相对于彼此异源的至少两个DNA分子的DNA分子，包含与在自然界中存在的DNA序列有偏差的DNA序列的DNA分子，或通过遗传转化并入宿主细胞的DNA中的DNA分子。如本文使用，术语“序列同一性”是指两个最佳比对DNA序列相同的程度。最优序列比对通过手动地比对两个序列，例如，参考序列和另一个DNA序列，以在具有适当内部核苷酸插入、缺失或间隙的序列比对中最大限度地提高核苷酸匹配的数目来建立。如本文使用，术语“参考序列”是指提供为SEQIDNO:1-37的DNA序列。如本文使用，术语“％序列同一性”或“％同一性”是同一性分率乘以100。与参考序列最佳比对的DNA序列的“同一性分率”是最优比对中的核苷酸匹配的数目，除以参考序列中的核苷酸的总数，例如，整个参考序列的全长中的核苷酸的总数。因此，本专利技术的一个实施方案提供包含DNA序列的DNA分子，所述DNA序列在与本文提供为SEQIDNO:1-37的参考序列最佳比对时，与参考序列具有至少约85％同一性、至少约86％同一性、至少约87％同一性、至少约88％同一性至少约89％同一性、至少约90％同一性、至少约91％同一性、至少约92本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含选自由以下组成的组的DNA序列的重组DNA分子：a)与SEQ ID NO:30具有至少85％序列同一性的DNA序列；b)包含SEQ ID NO:30的DNA序列；和c)SEQ ID NO:30的片段，其中所述片段具有基因调控活性；其中所述DNA序列可操作地连接至异源可转录DNA分子。

【技术特征摘要】
2013.03.14 US 61/785,2681.一种包含选自由以下组成的组的DNA序列的重组DNA分子：a)与SEQIDNO:30具有至少85％序列同一性的DNA序列；b)包含SEQIDNO:30的DNA序列；和c)SEQIDNO:30的片段，其中所述片段具有基因调控活性；其中所述DNA序列可操作地连接至异源可转录DNA分子。2.如权利要求1所述的重组DNA分子，其中所述DNA序列与SEQIDNO:30的所述DNA序列具有至少90％序列同一性。3.如权利要求1所述的重组DNA分子，其中所述DNA序列与SEQIDNO:30的所述DNA序列具有至少95％序列同一性。4.如权利要求1所述的重组DNA分子，其中所述异源可转录多核苷酸分子包含具有农艺学重要性的基因。5.如权利要求4所述的重组DNA分子，其中所述具有农艺学重要性的基因在植物中赋予除草剂耐性。6.如权利要求4所述的重组DNA分子，其中所述具有农艺学重要性的基因在植物中赋予害虫抗性。7.一种转基因植物细胞，其包括包含选自由以下组成的组的DNA序列的重组DNA分子：a)与SEQIDNO:30具有至少85％序列同一性的DNA序列；b)包含SEQIDNO:30的DNA序列；和c)SEQIDNO:30的片段，其中所述片段...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·M·奇拓尔，A·J·米亚莫托，A·M·尼克尔斯，M·乌法托勒，M·W·彼得森，
申请(专利权)人：孟山都技术公司，
类型：发明
国别省市：美国,US