一种蕾二歧灯芯柳珊瑚来源的海洋真菌及其在制备抗菌药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于海洋药物，具体涉及一种蕾二歧灯芯柳珊瑚来源的海洋真菌及其在制备抗菌药物中的应用。本发明专利技术所述海洋真菌Phoma sp.的菌种保藏信息：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2017年4月1日；保藏编号：CGMCC No.13881；分类命名：茎点霉Phoma sp。

【技术实现步骤摘要】
一种蕾二歧灯芯柳珊瑚来源的海洋真菌及其在制备抗菌药物中的应用
本专利技术属于海洋药物，具体涉及一种蕾二歧灯芯柳珊瑚来源的海洋真菌及其在制备抗菌药物中的应用。
技术介绍
海洋，由于其高压、高盐、少氧、少光照等特殊的环境，使其能够产生一些结构新颖的化合物。联苯醚糖苷化合物到目前为止仍属于结构少见的化合物，仅有8个此类化合物被报道，其中仅有一个是来源于海洋中的海绵真菌，而未见有来源于珊瑚及珊瑚真菌的联苯醚糖苷类化合物被报道。
技术实现思路
本专利技术提供一种海洋真菌Phomasp.，该真菌分离自蕾二歧灯芯柳珊瑚，其中蕾二歧灯芯柳珊瑚是专利技术人于2008年9月采集自中国南海西沙群岛。本专利技术所述海洋真菌Phomasp.的菌种保藏信息：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2017年4月1日；保藏编号：CGMCCNo.13881；分类命名：茎点霉Phomasp.。本专利技术的另一实施方案提供一种式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于式(I)、式(II)化合物具有如下结构：本专利技术的另一实施方案提供一种同时制备式(I)化合物和式(II)化合物的制备方法，其特征包括以下步骤：先在菌种培养基中对海洋真菌Phomasp.进行菌种培养，再在发酵培养基中对该海洋真菌进行发酵培养，得发酵物后，用乙酸乙酯浸提2～6次，合并乙酸乙酯浸提液后减压浓缩得粗浸膏，进行色谱分离，分别得式(I)、式(II)化合物；其中所述的菌种培养基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、琼脂、粗海盐、水；所述的发酵培养基中含有大米、粗海盐、水；所述的色谱分离为依次进行正相硅胶柱色谱分离、凝胶柱色谱分离和高效液相色谱分离。上述制备方法中所述的菌种培养基优选含有葡萄糖0.10％–10％、酵母膏0.01％–4.0％、蛋白胨0.01％–4.0％、琼脂0.10％–6.0％、粗海盐0.05％–10％，其余为水，上述百分含量均为重量百分比；培养温度为5–45℃；培养时间为3–10天；所述的发酵培养基中大米、粗海盐和水的含量为每个500mL锥形瓶中含有大米50–150g，粗海盐0.05–10g，水50–150mL；培养温度为5–45℃；培养时间为20–50天；所述的正相硅胶柱色谱分离为先采用固定相为100～200目硅胶，流动相为80％–100％(体积百分比，下同)的乙酸乙酯/石油醚混合溶剂，洗脱体积优选为1-5个柱体积，然后再采用的固定相为200～300目硅胶，流动相为90％–100％的二氯甲烷/甲醇混合溶剂，洗脱体积优选为2-3个柱体积；凝胶柱色谱分离的固定相为sephadexLH-20，流动相为50％的二氯甲烷/甲醇混合溶剂，洗脱体积优选为1-5个柱体积；高效液相色谱分离中采用的色谱为半制备C18色谱柱，Kromasil,7μm,10×250mm，首先以45％的甲醇/水混合溶液作为流动相，制备得到式(II)化合物，然后以55％的甲醇/水混合溶液作为流动相，制备得到式(I)化合物。本专利技术提供一种抗菌剂，其特征在于包含上述的式(I)、(II)化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分；还可包括其他抗菌活性成分和/或药学上可接受的载体或赋形剂。本专利技术提供上述的式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于预防和/或治疗由白色葡萄球菌(Staphylococcusalbus)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、大肠杆菌(Escherichiacoli)或副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)引起的疾病。本专利技术的另一实施方案提供上述海洋真菌Phomasp.在制备抗菌药物中的应用。本专利技术的另一实施方案提供上述海洋真菌Phomasp.在制备式(I)和/或式(II)化合物中的应用。本专利技术中术语“药学上可接受的盐”是指非毒性的无机或有机酸和/或碱的加成盐，可参见“Saltselectionforbasicdrugs”,Int.J.Pharm.(1986),33,201–217。具体实施方式为了便于对本专利技术的进一步理解，下面提供的实施例对其做了更详细的说明。但是这些实施例仅供更好的理解专利技术而并非用来限定本专利技术的范围或实施原则，本专利技术的实施方式不限于以下内容。实施例1(1)海洋真菌Phomasp.菌种的培养真菌Phomasp.的菌种培养所用的培养基含有葡萄糖1.0％(重量百分比，下同)、酵母膏0.1％、蛋白胨0.2％、琼脂1.0％、粗海盐3.0％，其余为水，使用时制成试管斜面，真菌菌株在28℃下培养5天。(2)海洋真菌Phomasp.的发酵真菌Phomasp.的发酵培养所用的发酵培养基为每个500mL锥形瓶中含有大米80g，粗海盐2g，水120mL，真菌菌株于25-28℃静置发酵培养28天，得发酵物；共使用50个500mL锥形瓶发酵。(3)本专利技术式(I)、式(II)化合物的分离提取取步骤(2)所得的发酵物，用乙酸乙酯浸提3次，浸提液减压浓缩得到粗浸膏，先进行正相硅胶柱色谱分离，固定相：100～200目硅胶，流动相为80％(体积百分比)的乙酸乙酯/石油醚混合溶剂，洗脱3个柱体积，洗脱液浓缩后再进行正相硅胶柱色谱分离，固定相：200～300目硅胶，流动相为90％(体积百分比)的二氯甲烷/甲醇混合溶剂，洗脱2个柱体积，洗脱液浓缩后进行SephadexLH20凝胶柱色谱分离，流动相：50％(体积百分比)的二氯甲烷/甲醇混合溶剂，洗脱液浓缩后进行高效液相色谱分离，固定相：半制备C18色谱柱(Kromasil,7μm,10×250mm)，先以45％的甲醇/水混合溶液作为流动相，制备得到式(II)化合物，为无色无定型粉末；然后以55％的甲醇/水混合溶液作为流动相，制备得到式(I)化合物，为无色无定型粉末。式(I)化合物结构为：结构确证数据：1HNMR(CD3OD,600MHz)δ:6.60(1H,brs,H-4′),6.39(1H,brs,H-2′),6.35(1H,d,J＝2.9Hz,H-3),6.31(1H,d,J＝2.9Hz,H-5),6.29(1H,brs,H-6′),5.55(1H,d,J＝4.5Hz,H-1″),4.13(1H,dd,J＝6.4,4.5Hz,H-2″),4.10(1H,dt,J＝3.5,3.5Hz,H-4″),4.06(1H,dd,J＝6.5,3.2Hz,H-3″),3.74(3H,s,4-OMe),3.69(1H,dd,J＝12.1,3.4Hz,Ha-5″),3.63(1H,dd,J＝12.2,3.8Hz,Hb-5″),2.24(3H,s,5′-Me),2.03(3H,s,6-Me)；13CNMR(CD3OD,150MHz)δ:160.7(C,C-1′),159.8(C,C-3′),158.7(C,C-4),151.8(C,C-2),141.3(C,C-5′),135.6(C,C-1),134.0(C,C-6),111.7(CH,C-4′),110.4(CH,C-6′),107.8(CH,C-5),101.4(CH,C-3),102.6(CH,C-2′),102.3(CH,C-1″),87.5(CH,C-4″),73.4本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种海洋真菌Phoma sp.，其特征在于其菌种保藏信息如下：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2017年4月1日；保藏编号：CGMCC No.13881；分类命名：茎点霉Phoma sp.。

【技术特征摘要】
1.一种海洋真菌Phomasp.，其特征在于其菌种保藏信息如下：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2017年4月1日；保藏编号：CGMCCNo.13881；分类命名：茎点霉Phomasp.。2.一种式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于式(I)、式(II)化合物具有如下结构：3.一种同时制备权利要求2所述的式(I)化合物和式(II)化合物的制备方法，其特征包括以下步骤：先在菌种培养基中对权利要求1所述的海洋真菌Phomasp.进行菌种培养，再在发酵培养基中对该海洋真菌进行发酵培养，得发酵物...

【专利技术属性】
技术研发人员：王长云，邵长伦，史婷，齐君，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：山东,37