一种积雪草总苷脂质体及其制备方法技术

本发明专利技术提出一种积雪草总苷脂质体及其制备方法，属于药品及药品制造技术领域。积雪草总苷脂肢体包括卵磷脂、胆固醇、积雪草总苷和超纯水，且卵磷脂与胆固醇的质量比为4‑8﹕1；卵磷脂与积雪草总苷的质量比为20‑40：1；有机相与水相的体积比为5‑7﹕1。方法：按一定比例称取卵磷脂、胆固醇，将卵磷脂、胆固醇溶于氯仿；再加入积雪草总苷的水溶液，冰水浴超声，形成均匀乳剂；将乳剂旋转蒸发至形成凝胶状态，加入适量超纯水溶液；继续旋蒸1小时使胶体脱落，冰水浴超声即得脂质体本发明专利技术的有益效果：本发明专利技术具有良好的透皮性能及缓释效果，能够长期有效的作用于病灶，实现更好的治疗效果。

Centella asiatica total glycoside liposome and preparation method thereof

The invention provides a Centella asiatica total glycoside liposome and a preparation method thereof, which belongs to the technical field of medicine and drug manufacture. The extremities of Centella asiatica total glycosides include lecithin, cholesterol, Centella asiatica total glycosides and ultrapure water, and the mass ratio of lecithin to cholesterol is 4 8:1; the mass ratio of lecithin to Centella asiatica total glycosides is 20 40:1; and the volume ratio of organic phase to water phase is 5 7:1. Methods: lecithin and cholesterol were selected according to a certain proportion, then lecithin and cholesterol were dissolved in chloroform, then added the water solution of Centella asiatica total glucoside, ice water bath ultrasound was formed, the homogeneous emulsion was formed, the emulsion was rotated and evaporated to form gel state, and an appropriate amount of ultra pure water solution was added, and the gel was dropped for 1 hours, and the ice water bath ultrasonic was removed. The invention has good transdermal performance and sustained release effect, can effectively act on the lesion for a long time, and achieves better therapeutic effect.

【技术实现步骤摘要】
一种积雪草总苷脂质体及其制备方法
本专利技术属于药品及药品制造
，特别涉及一种积雪草总苷脂质体及其制备方法。
技术介绍
积雪草总苷(centellatotalglucosides，CTG)是伞形科植物积雪草的提取物，有效成分为三萜型皂苷及其衍生物类，其中以积雪草苷、羟基积雪草苷的含量最高，活性最强。现代药理研究表明：CTG不仅能够促进细胞生长，加速伤口愈合，修复皮肤损伤，还具有抗氧化，抗溃疡、消炎等作用。临床上常用于手术创伤、烧伤，增生性疤痕等疾病的治疗。但由于CTG中多为极性大分子，不容易透过皮肤表皮到达病变部位，单纯的促渗不能完全达到治疗疾病的目的。将药物包封于脂质体中，不仅可以发挥良好的促透作用，还可使药物尽可能少的进入血液循环，集中于皮肤病灶，形成药物贮库，缓释药物，是理想化的皮肤局部给药载体。与普通外用制剂相比，脂质体可以增加药物的治疗指数，减少给药次数及剂量，提高患者的顺应性。因此有必要优化CTG脂质体的制备工艺，并对其理化性质及体外透皮特性进行考察。
技术实现思路
针对积雪草总苷脂质体的处方优化问题，本专利技术在前期工作研究的基础上，通过采用单因素结合Box-Behnken效应面法优化积雪草总苷脂质体的制备工艺。一种积雪草总苷脂质体，包括卵磷脂、胆固醇、积雪草总苷和超纯水，且卵磷脂与胆固醇的质量比为4-8﹕1；卵磷脂与积雪草总苷的质量比为20-40：1；有机相与水相的体积比为5-7﹕1。进一步的，卵磷脂与胆固醇的质量比4﹕1，卵磷脂与积雪草总苷的质量比23.22﹕1，有机相与水相的体积比7﹕1。一种积雪草总苷脂质体的制备方法，包括以下步骤：S1、按一定比例称取卵磷脂、胆固醇，将卵磷脂、胆固醇溶于氯仿；S2、再加入积雪草总苷的水溶液，冰水浴超声，形成均匀乳剂；S3、将乳剂旋转蒸发至形成凝胶状态，加入适量超纯水溶液；S4、继续旋蒸1小时使胶体脱落，冰水浴超声即得脂质体。进一步的，所述将乳剂旋转蒸发至形成凝胶状态，加入适量超纯水溶液，水化温度为50℃。本专利技术的有益技术效果为：本专利技术的积雪草总苷脂质体中羟基积雪草苷、积雪草苷体外12h累计释放率分别为52.10％、45.97％，CTG脂质体2种成分透皮速率较小于原料药溶液，脂质体组表现出明显的缓释性；脂质体组2种有效成分的皮肤滞留量均高于水溶液对照组，提示药物主要集中于皮肤病灶，以贮库的形式产生缓释作用。附图说明为了使本专利技术的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本专利技术提供如下附图进行说明：图1为A和B(1)、A和C(2)、B和C(3)的交互作用对Y1影响的等高线图(a)及三维效应面图(b)；图2为A和B(1)、A和C(2)、B和C(3)的交互作用对Y2影响的等高线图(a)及三维效应面图(b)；图3为CTG脂质体的电镜图(a)、粒径分布(b)和Zeta电位(c)；图4羟基积雪草苷(a)、积雪草苷(b)累计释放量Q与时间t的曲线；图5为羟基积雪草苷、积雪草苷累积透皮量Qn与时间t的曲线；图6为羟基积雪草苷、积雪草苷皮肤滞留量Qs与时间t柱状图；其中：A表示卵磷脂-胆固醇的质量比；B表示卵磷脂-CTG的质量比；C表示有机相-水相的体积比；Y1积雪草苷的包封率；Y2羟基积雪草苷的包封率。具体实施方式为了使本
人员能更好地理解本专利技术的目的、技术方案和有益效果，下面结合具体实施例和说明附图来进行完整的描述。实施例11、CTG脂质体包封率的测定取CTG脂质体，加入甲醇破乳，0.22μm滤膜过滤，取续滤液测定脂质体的总药物含量W总。采用超滤离心管分离脂质体和游离药物，另取CTG脂质体于超滤离心管内，4000r/min离心20min取外管溶液，测定游离药物的含量W游。按下式计算包封率：Y包封率＝(1－W游/W总)×100％2、CTG脂质体制备方法的筛选1)薄膜分散法称取卵磷脂200mg、胆固醇50mg，氯仿溶解，旋转蒸发至形成均匀脂质薄膜。继续抽真空20min除尽有机溶剂。加入CTG的水溶液振荡水合1h使薄膜脱落。冰水浴超声至形成脂质体混悬液。积雪草、苷羟基积雪草苷的包封率分别为65.50％、56.79％。2)乙醇注入法称取卵磷脂200mg、胆固醇50mg，无水乙醇溶解，缓慢匀速滴入CTG的水溶液，300r/min恒温搅拌1h，旋蒸除乙醇，冰水浴超声得CTG脂质体。积雪草苷、羟基积雪草苷的包封率分别为61.77％、52.51％。3)逆相蒸发法称取卵磷脂200mg、胆固醇50mg，溶于氯仿，加入CTG的水溶液，冰水浴超声，形成均匀乳剂。旋转蒸发至形成凝胶状态，加入适量水溶液，继续旋蒸1h使胶体脱落。冰水浴超声即得脂质体。积雪草苷、羟基积雪草苷的包封率分别为74.11％、60.05％。以上3种方法以逆相蒸发法制备的脂质体具有较大的水容积，适合于水溶性药物的包封，CTG脂质体的包封率最高。故选择逆相蒸发法用于CTG脂质体的制备。3、CTG脂质体单因素考察1)卵磷脂-胆固醇的质量比固定卵磷脂-CTG的质量比为20﹕1，有机相-水相的体积比为5﹕1，水化介质为2ml超纯水，选取卵磷脂-胆固醇的质量比分别为2﹕1、3﹕1、4﹕1、5﹕1、6﹕1制备脂质体，见表1，结果表明：随着卵磷脂的增加，两种成分的包封率均呈先增大后减小的趋势；当卵磷脂-胆固醇的质量比较小时(2:1、3:1)，在水化阶段，胶体脱落困难，放置过夜脂质体溶液产生絮凝沉淀现象，提示卵磷脂-胆固醇的质量比在4-8﹕1时具有较好的稳定性。表1卵磷脂-胆固醇的质量比对CTG包封率的影响2)卵磷脂-CTG的质量比固定卵磷脂-胆固醇的质量比为4﹕1，有机相-水相的比为5：1，水化介质为2ml超纯水，选取卵磷脂-CTG的质量比分别为1﹕1、5﹕1、10﹕1、20﹕1、40﹕1制备脂质体，见表2，结果表明：卵磷脂-CTG的质量比是影响脂质体包封率的显著因素，过大或过小包封率均较低，其中卵磷脂-CTG的质量比为20﹕1时，脂质体包封率高。表2卵磷脂-CTG的质量比对CTG包封率的影响3)有机相-水相的体积比固定卵磷脂-胆固醇的质量比为4﹕1，卵磷脂-CTG的质量比为20：1，水化介质为2ml超纯水，选取有机相-水相的比为4﹕1、5﹕1、6﹕1、7﹕1、8﹕1制备脂质体，见表3，结果表明：当有机相-水相的体积比在5-7﹕1间时，形成的乳剂较均一，无分层现象，且包封率高。表3有机相-水相的体积比对CTG包封率的影响实施例21、CTG脂质体处方优化的实验数据为进一步优化CTG脂质体处方，在单因素考察的基础上，选取卵磷脂-胆固醇的质量比(A)、卵磷脂-CTG的质量比(B)、有机相-水相的体积比(C)3个显著变量，以积雪草苷、羟基积雪草苷的包封率Y1、Y2为响应值，采用Box-Behnken效应面法进行优化设计，通过Dseign-Expert软件对实验结果进行响应面分析，试验安排及结果见表4，方差分析见表5。表4：响应面分析方案和实验结果表5：方差分析方差来源平方和自由度F值P值方差来源平方和自由度F值P值Y1模型988.37919.280.0004Y2模型1143.31917.440.0005A294.76151.740.0002A160.38122.020.0022B132.11123.190.0019B217.67129本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种积雪草总苷脂质体，其特征在于：包括卵磷脂、胆固醇、积雪草总苷和超纯水，且卵磷脂与胆固醇的质量比为4‑8﹕1；卵磷脂与积雪草总苷的质量比为20‑40∶1；有机相与水相的体积比为5‑7∶1。

【技术特征摘要】
1.一种积雪草总苷脂质体，其特征在于：包括卵磷脂、胆固醇、积雪草总苷和超纯水，且卵磷脂与胆固醇的质量比为4-8﹕1；卵磷脂与积雪草总苷的质量比为20-40∶1；有机相与水相的体积比为5-7∶1。2.根据权利要求1所述的一种积雪草总苷脂质体，其特征在于：卵磷脂与胆固醇的质量比4﹕1，卵磷脂与积雪草总苷的质量比23.22﹕1，有机相与水相的体积比7﹕1。3.一种积雪草总苷脂质体的...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨荣平，
申请(专利权)人：西南大学，重庆悦花越有生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50