本发明专利技术公开了含甲基咪唑类功能基团的香豆素类衍生物及其制备方法和应用，该香豆素类衍生物的具体化合物结构为7‑[6‑(2‑甲基咪唑)己氧基]香豆素。通过7‑羟基香豆素与1,6‑二溴己烷发生烷基化反应制备7‑(6‑溴己氧基)香豆素，由7‑(6‑溴己氧基)香豆素与2‑甲基咪唑发生取代反应制得7‑[6‑(2‑甲基咪唑)己氧基]香豆素，该化合物对鲤春病毒血症病毒等弹状病毒具有良好的抗病毒及杀灭作用。
Coumarin derivatives containing methimidazole functional groups and their preparation methods and Applications
The invention discloses coumarin derivatives containing methyl imidazole functional groups, a preparation method and application thereof. The specific compound structure of the coumarin derivatives is 7 [6 [(2] methyl imidazole] hexyl] coumarin. 7(6_bromohexyl) coumarin was prepared by alkylation of 7_hydroxycoumarin with 1,6_dibromohexane. 7[6(2_methylimidazole) hexyl] coumarin was prepared by substitution reaction of 7(6_bromohexyl) coumarin with 2_methylimidazole. The compound was found to be effective against cyprinovirus and other elastoviruses. Its antiviral and killing effects.
【技术实现步骤摘要】
含甲基咪唑类功能基团的香豆素类衍生物及其制备方法和应用
本专利技术涉及抗弹状病毒活性物质，具体涉及含甲基咪唑类功能基团的香豆素类衍生物(7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素)及其制备方法和抗病毒活性的应用。
技术介绍
香豆素类化合物是一类重要的有机杂环化合物，具有抗凝血、抗肿瘤、杀虫、抑菌、抗病毒等广泛的生物学活性，广泛的应用于医药和农药领域。自鲤春病毒血症病毒和传染性造血器官坏死病病毒被分离、鉴定，研究人员一直在努力寻找可有效防控这两种弹状病毒的手段。渔用疫苗的研究、应用和高效、低毒、低残留、环境污染小的无公害水产渔药基础创新研究及产业化是当前控制病害发生、保障水产品安全和生态安全的有效手段。然而，渔用疫苗大规模的商业化以及在世界范围内推广应用进程仍然十分缓慢。另外，病原体的变异和抗原的多样性也是影响渔用疫苗使用最重要的因素之一。因此，药物防治技术研究对于鲤春病毒血症和其它病毒病的防控与健康养殖有重要意义。香豆素类衍生物的构效研究目前尚未涉及其抗病毒活性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种含甲基咪唑类功能基团的香豆素类衍生物及其制备方法和应用。为达到上述目的，本专利技术采用了以下技术方案：一种含甲基咪唑类功能基团的香豆素类衍生物，该香豆素类衍生物为7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素，结构如式1所示：其中，R为2-甲基咪唑。上述含甲基咪唑类功能基团的香豆素类衍生物的制备方法，包括以下步骤：第一步，将4.8～5.0g7-羟基香豆素以及13.8～14.0g无水碳酸钾加入溶剂(例如丙酮)中后于20～25℃下搅拌2～3h得物料A，向物料A中加入22～24g1,6-二溴己烷后于60～65℃下回流反应20～24h，反应后减压蒸除溶剂得物料B，向物料B中加水后用氯仿进行萃取，萃取得到位于底层的有机相用无水硫酸钠干燥后减压浓缩得固体粗品，该固体粗品经柱层析分离纯化，得到7-(6-溴己氧基)香豆素，结构如式2所示：第二步，将0.6～0.7g7-(6-溴己氧基)香豆素以及1.3～1.5g无水碳酸钾加入溶剂(例如乙腈)中后于20～25℃下搅拌1～2h得物料C，向物料C中加入0.5～0.6g2-甲基咪唑后于20～25℃下搅拌20～24h，然后减压蒸除溶剂得物料D，向物料D中加水后用氯仿进行萃取，萃取得到位于底层的有机相用无水硫酸钠干燥后减压浓缩得固体粗品，该固体粗品经柱层析分离纯化，得到7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素，结构如式3所示：优选的，所述减压浓缩的温度为45～60℃；所述柱层析采用硅胶作为层析柱填料，以石油醚/乙酸乙酯混合液或氯仿/甲醇混合液为洗脱试剂，石油醚或氯仿与乙酸乙酯或甲醇的体积比为4～10:1。上述含甲基咪唑类功能基团的香豆素类衍生物在制备抗病毒药物或用于杀灭体内外病毒的药物中的应用。优选的，所述病毒为弹状病毒，例如鱼类等水产动物鲤春病毒血症病毒。本专利技术的有益效果体现在：本专利技术公开的含甲基咪唑类功能基团的香豆素类衍生物为7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素，对鲤春病毒血症病毒等弹状病毒具有良好的杀灭作用，可应用于防治病毒病害。本专利技术通过7-羟基香豆素与1,6-二溴己烷发生烷基化反应制备7-(6-溴己氧基)香豆素，由7-(6-溴己氧基)香豆素与2-甲基咪唑发生取代反应制得7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素，目标化合物容易分离，产率较高。附图说明图1为7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素的总合成路线示意图；图2为图1中7-(6-溴己氧基)香豆素的合成路线示意图；图3为图1中7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素的合成路线示意图；图4为7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素对SVCVN、P、M和G蛋白表达的抑制率曲线；图5为7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素作用下感染SVCV的EPC细胞形态学显微照片；图6为10mg/L7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素处理48h和72h后EPC细胞内凋亡小体染色结果；图7为10mg/L7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素处理48h和72h后SVCV感染EPC细胞凋亡率。具体实施方式下面结合附图和实施例对本专利技术做详细说明。本专利技术提供了一种化学合成的香豆素衍生物，该香豆素类衍生物抗病毒效果优良，且合成过程相对简单、收率高、易于转化。在合成、筛选7-取代香豆素类衍生物的研究过程中，发现7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素对鲤春病毒血症病毒具有良好的杀灭活性，具有防治病毒病害的应用价值。化合物7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素可按照如图1所示的合成路线制备。(一)化合物的制备(1)7-(6-溴己氧基)香豆素(中间体化合物)的制备参见图2，将4.86g(30mmol)购买得到的7-羟基香豆素、13.8g无水K2CO3(100mmol)以及120mL丙酮加入到250mL圆底烧瓶中，室温搅拌2h后，向所述圆底烧瓶中再加入22g(90mmol)1,6-二溴己烷，60℃下回流反应24h。减压蒸除(45℃，0.05MPa负压)反应体系中的丙酮，向所述圆底烧瓶中加入100mL蒸馏水并用氯仿萃取(150mL×4)，合并下层有机相；向有机相中加入20～30g无水硫酸钠静置过夜，过滤除去硫酸钠固体、减压浓缩(45℃，0.05MPa负压)得固体化合物粗品。粗品经硅胶柱层析(V石油醚:V乙酸乙酯＝4:1)分离纯化，TLC检测收集含有中间体化合物的洗脱部分，减压浓缩除去洗脱试剂(55℃，0.05MPa负压)，得6.63g白色针状固体。(2)7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素(目标化合物，简称化合物1)的制备参见图3，向含有40mL乙腈的100mL圆底烧瓶中加入0.65g(2mmol)7-(6-溴己氧基)香豆素以及1.38g(10mmol)无水K2CO3，室温搅拌1h后向所述圆底烧瓶中再加入0.53g(6mmol)2-甲基咪唑，继续室温下搅拌24h，反应完毕，减压蒸除溶剂(70℃，0.07MPa负压)，向所述圆底烧瓶中加入30mL去离子水并用氯仿萃取(50mL×3)，合并下层有机相；向有机相中加入20～30g无水硫酸钠静置过夜，过滤除去硫酸钠固体、减压浓缩(45℃，0.05MPa负压)得固体化合物粗品。粗品经硅胶柱层析(V氯仿:V甲醇＝10:1)分离纯化，TLC检测收集含有目标化合物的洗脱部分，减压浓缩除去洗脱试剂(55℃，0.05MPa负压)，得0.589g白色胶状固体。(3)中间体化合物和目标化合物结构数据列于表1、2中：表1.化合物的性状表2.化合物的1HNMR、13CNMR与ESI-MS数据从表1可以看出，本专利技术提供的中间体化合物与目标化合物的制备方法具有较高的产率，从表2可以确定中间体化合物与目标化合物的结构，即通过williamson反应合成中间体化合物，表2中氢谱中4.03-1.46，碳谱中的33.87-25.32为烷烃侧链的化学位移，这证明反应的正确性。中间体化合物与2-甲基咪唑通过取代反应生成目标化合物，表2中氢谱的6.90-6.87,2.35和126.48,120.82,12.47等为2-甲基咪唑的化学位移，这证明反应产物结构的正确性。(二)化合物1(7-[6-(2-甲基咪唑)己氧基]香豆素)抗鲤春病毒血症病毒活性测本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.含甲基咪唑类功能基团的香豆素类衍生物，其特征在于：该香豆素类衍生物的结构如式1所示：
【技术特征摘要】
1.含甲基咪唑类功能基团的香豆素类衍生物，其特征在于：该香豆素类衍生物的结构如式1所示：其中，R为2-甲基咪唑。2.制备如权利要求1所述的含甲基咪唑类功能基团的香豆素类衍生物的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将7-羟基香豆素与1,6-二溴己烷通过烷基化反应，制备得到7-(6-溴己氧基)香豆素；2)将7-(6-溴己氧基)香豆素与2-甲基咪唑通过取代反应，制备得到所述香豆素类衍生物。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)具体包括以下步骤：将4.8～5.0g7-羟基香豆素以及13.8～14.0g碳酸钾加入溶剂中后于20～25℃下搅拌2～3h得物料A，向物料A中加入22～24g1,6-二溴己烷后于60～65℃下回流反应20～24h，反应后减压蒸除溶剂得物料B，向物料B中加水后用氯仿进行萃取，萃取得到的有机相用无水硫酸钠干燥后减压浓缩得固体粗品A，将固体粗品A经柱层析分离纯化，得到7-(6-溴己氧基)香豆素。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤2)具体包括以下步骤：将0.6～0.7g7-(6-溴己氧基)香豆素以及1.3～1.5g碳酸钾...
【专利技术属性】
技术研发人员：王高学，刘镭，胡洋，刘广路，沈毓峰，陈伟超，朱斌，凌飞，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61
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