The invention relates to the field of molecular diagnosis technology, * specifically discloses a primer and probe for detecting porcine epidemic diarrhea virus wild strain, and a TaqMan real-time fluorescence quantitative PCR method. The sequences of primers and probes, such as SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 and SEQ ID NO:3 *, show that they can specifically detect the wild strain of porcine epidemic diarrhea virus. The TaqMan real-time fluorescence quantitative PCR method is used to amplify the samples by using the primers and probes. If Cq is less than 36, it is positive * that is, the wild strain of porcine epidemic diarrhea virus. This method has strong specificity, high sensitivity, good repeatability and high clinical detection rate, which provides an important technical means for rapid detection and prevention of PED.
【技术实现步骤摘要】
用于检测猪流行性腹泻病毒野毒株的引物和探针及TaqMan实时荧光定量PCR方法
本专利技术涉及分子诊断
，具体涉及一种用于检测猪流行性腹泻病毒野毒株的引物和探针及TaqMan实时荧光定量PCR方法。
技术介绍
猪流行性腹泻(porcineepidemicdiarrhea，PED)是由冠状病毒科、冠状病毒属的猪流行性腹泻病毒(PEDvirus，PEDV)引起的一种急性、高度接触性肠道传染病，主要危害7～10日龄仔猪，引起腹泻、呕吐、脱水甚至死亡。该病冬季多发，但近年来发病季节性不明显，一年四季均有发生。该病首先在英国暴发，而后遍及全球，我国于1976年首次对PED进行报道。2010年以来，PED在亚洲尤其是中国的流行相当严重，首先在我国华南地区暴发，随后遍及全国大部分省的猪场。此次PED暴发是由PEDV的变异株引起的，其临床症状、发病率和死亡率均比以前的PED严重。主要表现为流行范围广、初生仔猪发病率和死亡率高。疫苗免疫是当前防控PED的重要措施，以CV777减毒株为代表的活疫苗临床应用普遍，导致常规实验室诊断方法不能快速区分野毒株与疫苗株。ORF3基因是PE...
【技术保护点】
1.一种用于检测猪流行性腹泻病毒野毒株的引物和探针，其特征在于：F引物：序列如SEQ ID NO:1所示；R引物：序列如SEQ ID NO:2所示；TaqMan探针：序列如SEQ ID NO:3所示。
【技术特征摘要】
1.一种用于检测猪流行性腹泻病毒野毒株的引物和探针，其特征在于：F引物：序列如SEQIDNO:1所示；R引物：序列如SEQIDNO:2所示；TaqMan探针：序列如SEQIDNO:3所示。2.如权利要求1所述的用于检测猪流行性腹泻病毒野毒株的引物和探针，其特征在于：所述TaqMan探针的荧光报告基团为FAM，荧光淬灭基团为TAMRA。3.一种用于检测猪流行性腹泻病毒野毒株的试剂盒，其特征在于：包含权利要求1或2所述的引物和探针。4.如权利要求3所述的用于检测猪流行性腹泻病毒野毒株的试剂盒，其特征在于：还包含猪流行性腹泻病毒野毒株阳性参考品，所述阳性参考品为含有猪流行性腹泻病毒野毒株RNA的质粒。5.一种用于检测猪流行性腹泻病毒野毒株的TaqMan实时荧光定量PCR方法，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：宋勤叶，刘京，李丽敏，郭海勇，陈立功，
申请(专利权)人：河北农业大学，
类型：发明
国别省市：河北,13
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