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高产聚γ-谷氨酸的工程菌及其构建方法与应用技术

技术编号:19075230 阅读:163 留言:0更新日期:2018-09-29 17:35
本发明专利技术提供了一种高产聚γ‑谷氨酸的工程菌及其构建方法与应用。本发明专利技术公开的高产聚γ‑谷氨酸的工程菌为强化表达dltB基因的重组微生物,所述强化表达为引入一个或多个拷贝的dltB基因和/或将dltB基因的表达元件替换为具有较高活性的表达元件。本发明专利技术通过提高dltB基因的表达获得的工程菌发酵生产聚γ‑谷氨酸产量提高20%以上。本发明专利技术获得的工程菌能够提高发酵生产聚γ‑谷氨酸的产量、降低生产成本,具有良好的市场应用价值。

【技术实现步骤摘要】
高产聚γ-谷氨酸的工程菌及其构建方法与应用
本专利技术涉及基因工程和微生物发酵领域,具体涉及高产聚γ-谷氨酸的工程菌及其构建方法与应用。
技术介绍
聚γ-谷氨酸(poly-γ-glutamicacid,γ-PGA)是一类天然的阴离子型生物高分子聚合物,主要由L-谷氨酸和D-谷氨酸单体通过γ-酰胺键聚合而成。γ-PGA分子上带有大量游离的带负电荷的羧基,使其具有与大量金属阳离子结合的能力和亲水的性能。这些结构特点使得γ-PGA具备良好的水溶性、较强的吸附能力、可生物降解、对人体和环境无毒害等特性,在医药、食品、化妆品、环境保护及农业等领域具有广泛的应用。作为γ-PGA的合成前体的L-谷氨酸的来源主要有两种,一种是是通过外源培养基的添加;另一种则是通过微生物细胞代谢途径中的三羧酸循环(TCA)的重要中间产物α-酮戊二酸经过谷氨酸脱氢酶催化生成。γ-PGA合成的另一个前体D-谷氨酸则通过L-谷氨酸经谷氨酸异构(消旋酶)消旋而来。目前,提高菌株γ-PGA产量的研究报道一般集中在针对合成、分解途径的改造和优化。细胞代谢产物的膜转运过程是代谢产物胞外积累的关键步骤,胞内合成的代谢产物需要被高效地本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.高产聚γ‑谷氨酸的工程菌,其特征在于,所述工程菌为强化表达dltB基因的重组微生物,所述强化表达为引入一个或多个拷贝的dltB基因和/或将dltB基因的表达元件替换为具有较高活性的表达元件。

【技术特征摘要】
1.高产聚γ-谷氨酸的工程菌,其特征在于,所述工程菌为强化表达dltB基因的重组微生物,所述强化表达为引入一个或多个拷贝的dltB基因和/或将dltB基因的表达元件替换为具有较高活性的表达元件。2.根据权利要求1所述的工程菌,其特征在于,所述dltB具有如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列或具有如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列经一个或多个氨基酸替换、缺失、或插入的氨基酸序列但具有如SEQIDNO.1所示的蛋白相同功能。3.根据权利要求2所述的工程菌,其特征在于,所述dltB具有如SEQIDNO.2所示的核苷酸序列或具有特异性序列且能够表达与SEQIDNO.2所示的核苷酸序列相同功能的蛋白。4.根据权利要求1所述的工程菌,其特征在于,所述dltB来源于细菌,优选来源于芽胞杆菌属细菌。5.根据权利要求1所述的工程菌,其特征在于,所述重组微生物为重组地衣芽胞杆菌。6.权利要求1-5任一所述工程菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)构建dltB基因表达...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈守文何鹏辉蔡冬波陈耀中王世依莫非马昕
申请(专利权)人:湖北大学
类型:发明
国别省市:湖北,42

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