乳杆菌细菌和组合物以及采用其生产产品的方法和用途技术

本发明专利技术涉及鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)细菌。本发明专利技术还涉及包含所述细菌的组合物、使用所述细菌来生产发酵乳产品的方法、由此获得的产品和所述细菌用于生产发酵乳产品的用途。

【技术实现步骤摘要】
乳杆菌细菌和组合物以及采用其生产产品的方法和用途本申请是申请日为2016年8月30日、申请人为科.汉森有限公司、专利技术名称为“具有抗真菌活性的发酵乳杆菌细菌”的中国专利申请201680059331.X的分案申请。
本专利技术涉及具有抗真菌活性的发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)细菌，包含所述细菌的组合物、特别是包含所述细菌的附属培养物，使用所述细菌或所述培养物生产发酵乳产品的方法和由此获得的发酵乳产品，包括食品、饲料和药品。
技术介绍
几十年来，乳酸菌(lacticacidbacteria，LAB)已被用于延长食品的保质期。在发酵期间，LAB产生乳酸以及其他有机酸，其引起发酵产品的pH降低。具有酸性pH的产品不能支持大多数微生物(包括病原菌和腐败菌)的进一步生长。然而，酵母菌和霉菌的生长不受低pH影响，并且经常导致发酵乳产品变质。除产生有机酸之外，一些LAB还产生具有抗微生物活性并且特别是抗真菌活性的代谢物。例如，欧洲专利申请号EP0221499描述了鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)NRRL-B-15972的抗真菌特性，其当在补充有黄瓜汁的琼脂培养基上培养时能够抑制不同霉菌的生长。类似地，欧洲专利申请号EP0576780涉及鼠李糖乳杆菌LC-705，其是在补充有酪蛋白水解物和酵母提取物的基于乳清的培养基上明显抑制青霉属(Penicillium)、枝孢菌属(Cladosporium)、镰孢霉属(Fusarium)和假丝酵母属(Candida)生长的菌株。欧洲专利申请号EP1442113描述了具有抗微生物作用的詹氏丙酸杆菌(Propionibacteriumjensenii)和乳杆菌属物种(Lactobacillussp.)例如鼠李糖乳杆菌的混合物及其用于生物保护的用途。欧洲专利申请号EP13717237描述了具有抗真菌作用的副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)菌株，并且欧洲专利申请号EP13714671描述了具有抗真菌作用的鼠李糖乳杆菌菌株。Gerez等,2013提供了对具有抗真菌作用的LAB及其用于保护面包和水果的用途的概述。具有抗真菌作用的培养物还可商购获得，并且包括Chr.Hansen的培养物以及Dupont,SACCO和Bioprox的培养物。开发具有抗真菌作用的培养物是一个巨大的挑战，因为其需要鉴定在实际食品应用中提供显著抗真菌作用的培养物。在选择生物保护性培养物候选物时需要谨慎评估的另一个因素是对食品的感官特性的影响。商业化产品中已经确定的一个问题是后酸化的程度，即产品已达到期望pH后培养物酸化的持续。这代表一个问题，特别是在升高的储存温度下、在产品冷却之前发酵产品保持在发酵罐中期间，或在熟化步骤期间。还考虑到商业化生物保护性培养物产生过量的双乙酰风味成分，导致“奶油”风味，这可以被视为不期望的风味影响(Aunsbjerg等,2015)。因此，仍然需要具有抗真菌作用和最小风味影响的新的且有利的食品级细菌。
技术实现思路
本专利技术提供了发酵乳杆菌物种的细菌，其具有以至少50％抑制以保藏号:DSM32093保藏的真菌离生青霉(Penicilliumsolitum)的生长或以保藏号:DSM32094保藏的真菌短密青霉(Penicilliumbrevicompactum)的生长的能力。通过不懈努力，鉴定到一组新的发酵乳杆菌菌株，其在生产发酵产品的方法中用作生物保护性菌株时提供显著的抗真菌作用和额外优点。鉴定到总共10种不同的使离生青霉(P.solitum)或短密青霉(P.brevicompactum)的生长抑制至少50％的发酵乳杆菌菌株。本专利技术的发酵乳杆菌菌株的进一步特征还可以在于具有使发酵乳产品中由由起子培养物在发酵期间产生的乙醛浓度降低至少50％的能力。在一个相关实施方案中，本专利技术的发酵乳杆菌菌株的进一步特征还可以在于，所述细菌仅分泌少量的双乙酰(diacetyl)，例如0至5ppm的范围。作为替选或补充，本专利技术的发酵乳杆菌菌株的特征可以在于，与不包含所述发酵乳杆菌的用相同起子培养物发酵的乳产品相比，所述发酵乳杆菌菌株增加包含所述发酵乳杆菌的发酵乳产品在发酵后储存期间的pH。因此，本专利技术提供了如上所述的细菌，包含其的组合物，使用所述细菌生产发酵乳产品的方法，以及由此获得的产品。附图说明图1：由用单独起子培养物(参考，第一列)、与4一起(第二列)、与YM-CPlus一起(第三列)或与发酵乳杆菌CHCC14591一起(第四列)发酵的乳制备的平板上霉菌的生长。平板已在7℃±1℃下孵育19天(顶行)和27天(底行)。目标污染物以500孢子/点的浓度添加：(A)P.carneum、(B)P.paneum和(C)娄地青霉(P.roqueforti)。图2：由用单独起子培养物(参考，第一列)、与4一起(第二列)、与YM-CPlus一起(第三列)或与发酵乳杆菌CHCC14591一起(第四列)发酵的乳制备的平板上霉菌的生长。平板已在25℃±1℃下孵育6天(顶行)和11天(底行)。目标污染物以500孢子/点的浓度添加：(A)P.carneum、(B)P.paneum和(C)娄地青霉。图3：由用单独起子培养物(参考，第一列)、与4一起(第二列)、与YM-CPlus一起(第三列)或与发酵乳杆菌CHCC14591一起(第四列)发酵的乳制备的平板上霉菌的生长。平板已在7℃±1℃下孵育19天(顶行)和27天(底行)。目标污染物以500孢子/点的浓度添加：(A)短密青霉、(B)皮落青霉(P.crustosum)和(C)离生青霉。图4：由用单独起子培养物(参考，第一列)、与4一起(第二列)、与YM-CPlus一起(第三列)或与发酵乳杆菌CHCC14591一起(第四列)发酵的乳制备的平板上霉菌的生长。平板已在25℃±1℃下孵育6天(顶行)和11天(底行)。目标污染物以500孢子/点的浓度添加：(A)短密青霉(DSM32093)、(B)皮落青霉和(C)离生青霉(DSM32093)。图5：由用单独起子培养物(参考，第一列)、与4一起(第二列)、与YM-CPlus一起(第三列)或与发酵乳杆菌CHCC14591一起(第四列)发酵的乳制备的平板上酵母的生长。平板已在7℃±1℃下孵育11天(顶行)或在25℃±1℃下孵育5天(底行)。目标污染物以1×103cfu/点(最上排)、1×102cfu/点(中间排)和1×101cfu/点(最下排)的浓度添加：(A)戴尔凯氏有孢圆酵母(Torulasporadelbrueckii)、(B)汉逊隐球酵母(Cryptococcushansenii)、(C)汉逊德巴利酵母(Debaryomyceshansenii)和(D)解脂耶氏酵母(Yarrowialipolytica)。图6：在7℃±1℃下储存14天后发酵乳产品中的双乙酰水平，所述发酵乳产品用单独起子培养物(参考)或者用与4、YM-CPlus或发酵乳杆菌CHCC14591组合的起子培养物发酵。LOD：检测界限。LOQ：定量界限。图7：由用单独起子培养物(参考，第一列)、与鼠李糖乳杆菌CHCC15860一起(第二列)、与发酵乳杆菌CHCC14591一起(第三列)或与鼠李糖乳杆菌CH本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.以保藏号DSM32092保藏于德国微生物保藏中心(DSMZ)的鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)细菌的菌株CHCC15860。

【技术特征摘要】
2015.08.31 EP 15183198.91.以保藏号DSM32092保藏于德国微生物保藏中心(DSMZ)的鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)细菌的菌株CHCC15860。2.组合物，其包含根据权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌细菌的菌株。3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述组合物还包含保藏为DSM32086的发酵乳杆菌菌株。4.根据权利要求2或3所述的组合物，其进一步包含至少一种冷冻保护性化合物。5.根据权利要求2至3中任一项所述的组合物，其中所述组合物是固体冷冻或冷冻干燥的起子培养物，所述起子培养物包含浓度为至少109个菌落形成单位/g冷冻材料或浓度为至少1010...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·L·M·尼尔森，蒂娜·霍恩贝克，P·拉斯马森，罗尼·波尔森，T·埃克哈特，贡纳尔·欧尔戈德，E·G·穆哈丹，
申请(专利权)人：科汉森有限公司，
类型：发明
国别省市：丹麦,DK