分析方法和分析装置制造方法及图纸

本发明专利技术提供分析方法和分析装置，为了评价是否适合于医药品，利用拉曼光谱分析法来分析蛋白质溶液。取得多种浓度的蛋白质溶液的拉曼光谱，基于包含在拉曼光谱中的规定峰，计算根据蛋白质分子之间的相互作用而变化的指标，基于相对于浓度变化的指标的变化来确定蛋白质能够变性的浓度阈值。对确定的阈值与抗体医药品等的作为医药品所需要的蛋白质溶液的浓度进行比较，判断蛋白质溶液是否适合于医药品。例如，作为医药品所需要的浓度在确定的阈值以上时，判断为蛋白质溶液不适合于医药品。蛋白质溶液不适合于医药品时，可以改变蛋白质溶液的条件反复进行分析。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】分析方法和分析装置
本专利技术涉及利用拉曼光谱分析法来分析高浓度蛋白质溶液的方法和分析装置。
技术介绍
近年来，不断开发使用核酸或蛋白质等生物材料的医药品。例如具有使用抗体的抗体医药品。抗体是蛋白质的一种，使用抗体医药品等蛋白质的医药品是蛋白质溶液的形式。为了在患者体内发挥效果，用作医药品的蛋白质溶液是高浓度的溶液。蛋白质溶液达到高浓度时，因蛋白质的分子间的相互作用，有时会发生蛋白质的结构变化或蛋白质凝集等蛋白质变性。由于蛋白质变性时作为医药品的效果也变化，所以为了进行抗体医药品的制造和质量管理，需要测量蛋白质结构是否变化等高浓度的蛋白质溶液的状态。测量高浓度的蛋白质溶液的状态比较困难，以往，测量稀释的蛋白质溶液，通过外推测量结果来推测高浓度的蛋白质溶液的状态。但是，在上述方法中，不能准确地测量高浓度的蛋白质溶液的状态。直接测量高浓度蛋白质溶液的状态的方法有X线小角度散射法和中子散射法。此外，在专利文献1中公开了使用拉曼光谱分析法来精制抗体。现有技术文献专利文献1：日本专利公开公报特表2013-537235号X线小角度散射法和中子散射法存在如下问题：装置的规模大、测量成本大，并且不能得到与蛋白质的结构相关的信息。相对于此，拉曼光谱分析法的测量成本比较小，能够直接测量高浓度蛋白质溶液的状态并得到与蛋白质的结构相关的信息。但是，并未确立有如下方法：利用拉曼光谱分析法来分析高浓度蛋白质溶液的状态，并且评价蛋白质溶液是否适用于医药品。
技术实现思路
鉴于上述问题，本专利技术的目的在于提供分析方法和分析装置，利用拉曼光谱分析法来分析蛋白质溶液，以便评价是否适用于医药品。本专利技术提供一种分析方法，利用拉曼光谱分析法来分析蛋白质溶液，所述分析方法的特征在于，利用拉曼光谱分析法，分别取得使特定蛋白质溶解的多种浓度的蛋白质溶液的拉曼光谱，基于包含在拉曼光谱中的一个或多个规定峰，对各浓度计算根据蛋白质溶液中的蛋白质分子之间的相互作用而增减的指标，根据对各浓度计算的所述指标确定浓度范围，在该浓度范围内相对于浓度的增大而变化的所述指标的变化量是在规定范围之内，基于确定的浓度范围，确定成为所述特定蛋白质是否变性的判断基准的浓度阈值，将确定的阈值与对所述特定蛋白质确定的特定浓度值进行比较。本专利技术还提供一种分析方法，利用拉曼光谱分析法来分析蛋白质溶液，所述分析方法的特征在于，利用拉曼光谱分析法，分别取得使特定蛋白质溶解的多种浓度的蛋白质溶液的拉曼光谱，基于包含在拉曼光谱中的一个或多个规定峰，对各浓度计算根据蛋白质溶液中的蛋白质分子之间的相互作用而增减的指标，基于相对于浓度的变化的所述指标的变化，确定成为所述特定蛋白质是否变性的判断基准的浓度阈值。本专利技术的分析方法的特征在于，所述指标是表示蛋白质中的酪氨酸的OH基作为氢供体起作用的同时也作为氢受体起作用的程度的、拉曼光谱中规定的两个峰的强度比。本专利技术的分析方法的特征在于，所述指标是表示蛋白质中的色氨酸所含的吲哚环的N-H位点在作为氢供体起作用的同时也作为氢受体起作用的程度的、拉曼光谱中规定的两个峰的强度比。本专利技术的分析方法的特征在于，所述指标是表示蛋白质中色氨酸的结构上的规定角度的宽度的、拉曼光谱中规定峰的宽度。本专利技术的分析方法的特征在于，所述指标是起因于蛋白质中的苯基丙氨酸的规定峰与起因于酰胺基的规定峰的强度比。本专利技术的分析方法的特征在于，在与多种浓度相关的拉曼光谱间，对起因于蛋白质中的酰胺基的规定峰的峰形状进行比较，判断与低浓度下的峰形状相比高浓度的峰形状是否变化，与低浓度下的峰形状相比高浓度的峰形状变化时，判断为在峰形状变化的浓度以上的浓度下所述蛋白质溶液不适合于医药品。本专利技术的分析方法的特征在于，基于所述阈值与所述特定浓度值的比较结果，判断所述蛋白质溶液是否适合于医药品，所述蛋白质溶液不适合于医药品时，对调整了所述特定蛋白质以外的成分的蛋白质溶液反复进行分析。本专利技术还提供一种分析装置，基于拉曼光谱来分析蛋白质溶液，所述分析装置的特征在于包括：存储部，存储对特定蛋白质确定的特定浓度值、以及对使所述特定蛋白质溶解的多种浓度的蛋白质溶液分别取得的拉曼光谱；计算部，基于包含在拉曼光谱中的一个或多个规定峰，对各浓度计算根据蛋白质溶液中的蛋白质分子之间的相互作用而增减的指标；第一确定部，根据对各浓度计算的所述指标确定浓度范围，在该浓度范围内相对于浓度的增大而变化的所述指标的变化量是在规定范围之内；第二确定部，基于确定的浓度范围，确定成为所述特定蛋白质是否变性的判断基准的浓度阈值；以及比较部，将确定的阈值与所述特定浓度值进行比较。本专利技术还提供一种分析装置，基于拉曼光谱来分析蛋白质溶液，所述分析装置的特征在于包括：存储部，存储对特定蛋白质确定的特定浓度值、以及对使所述特定蛋白质溶解的多种浓度的蛋白质溶液分别取得的拉曼光谱；计算部，基于包含在拉曼光谱中的一个或多个规定峰，对各浓度计算根据蛋白质溶液中的蛋白质分子之间的相互作用而增减的指标；以及确定部，根据相对于浓度变化的所述指标的变化，确定成为所述特定蛋白质是否变性的判断基准的浓度阈值。本专利技术还提供一种分析装置，对蛋白质溶液进行分析，所述分析装置的特征在于包括：存储部，存储有对使特定蛋白质溶解的蛋白质溶液利用拉曼光谱分析法预先确定的、成为所述特定蛋白质是否变性的判断基准的浓度阈值；以及比较部，将对所述特定蛋白质确定的特定浓度值与所述阈值进行比较。在本专利技术中，取得多种浓度的蛋白质溶液的拉曼光谱，基于拉曼光谱，确定与蛋白质分子之间的相互作用对应的指标相对于浓度的变化而几乎不变化的浓度范围，确定成为蛋白质是否变性的判断基准的浓度阈值，并且与作为医药品所需要的蛋白质溶液的浓度进行比较。在指标相对于浓度的变化而几乎不变化的浓度范围内，蛋白质分子之间的相互作用饱和，蛋白质有可能变性，基于上述浓度范围，可以确定蛋白质能够变性的浓度阈值。通过对确定的阈值与作为医药品所需要的蛋白质溶液的浓度进行比较，可以评价作为医药品所需要的浓度下的蛋白质溶液的状态。在本专利技术中，取得多种浓度的蛋白质溶液的拉曼光谱，基于拉曼光谱，计算与蛋白质分子之间的相互作用对应的指标，基于与浓度变化对应的指标的变化，确定成为蛋白质是否变性的判断基准的浓度阈值。基于蛋白质分子之间的相互作用在饱和时大体固定的指标等、根据拉曼光谱得到的指标相对于浓度变化的变化，可以确定蛋白质能够变性的浓度阈值。此外，在本专利技术中，使用表示酪氨酸的OH基作为氢供体起作用的同时也作为氢受体起作用的程度的指标。蛋白质分子之间相互作用时，酪氨酸的OH基作为氢供体和氢受体两者起作用。上述指标相对于浓度的变化而几乎不变化时，蛋白质分子之间的相互作用饱和。因此，通过使用上述指标，可以确定蛋白质分子之间的相互作用饱和的浓度范围。此外，在本专利技术中，使用表示色氨酸中包含的吲哚环的N-H位点作为氢供体起作用的同时也作为氢受体起作用的程度的指标。蛋白质分子之间相互作用时，N-H位点作为氢供体和氢受体两者起作用。上述指标相对于浓度的变化而几乎不变化时，蛋白质分子之间的相互作用饱和。因此，通过使用上述指标，可以确定蛋白质分子之间的相互作用饱和的浓度范围。此外，在本专利技术中，使用表示色氨酸的结构上的规定角度的宽度的指标。蛋白质分子之间的相互作用大时本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分析方法，利用拉曼光谱分析法来分析蛋白质溶液，所述分析方法的特征在于，利用拉曼光谱分析法，分别取得使特定蛋白质溶解的多种浓度的蛋白质溶液的拉曼光谱，基于包含在拉曼光谱中的一个或多个规定峰，对各浓度计算根据蛋白质溶液中的蛋白质分子之间的相互作用而增减的指标，根据对各浓度计算的所述指标确定浓度范围，在该浓度范围内相对于浓度的增大而变化的所述指标的变化量是在规定范围之内，基于确定的浓度范围，确定成为所述特定蛋白质是否变性的判断基准的浓度阈值，将确定的阈值与对所述特定蛋白质确定的特定浓度值进行比较。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.01.27 JP 2016-0136791.一种分析方法，利用拉曼光谱分析法来分析蛋白质溶液，所述分析方法的特征在于，利用拉曼光谱分析法，分别取得使特定蛋白质溶解的多种浓度的蛋白质溶液的拉曼光谱，基于包含在拉曼光谱中的一个或多个规定峰，对各浓度计算根据蛋白质溶液中的蛋白质分子之间的相互作用而增减的指标，根据对各浓度计算的所述指标确定浓度范围，在该浓度范围内相对于浓度的增大而变化的所述指标的变化量是在规定范围之内，基于确定的浓度范围，确定成为所述特定蛋白质是否变性的判断基准的浓度阈值，将确定的阈值与对所述特定蛋白质确定的特定浓度值进行比较。2.一种分析方法，利用拉曼光谱分析法来分析蛋白质溶液，所述分析方法的特征在于，利用拉曼光谱分析法，分别取得使特定蛋白质溶解的多种浓度的蛋白质溶液的拉曼光谱，基于包含在拉曼光谱中的一个或多个规定峰，对各浓度计算根据蛋白质溶液中的蛋白质分子之间的相互作用而增减的指标，基于相对于浓度的变化的所述指标的变化，确定成为所述特定蛋白质是否变性的判断基准的浓度阈值。3.根据权利要求1或2所述的分析方法，其特征在于，所述指标是表示蛋白质中的酪氨酸的OH基作为氢供体起作用的同时也作为氢受体起作用的程度的、拉曼光谱中规定的两个峰的强度比。4.根据权利要求1至3中任意一项所述的分析方法，其特征在于，所述指标是表示蛋白质中的色氨酸所含的吲哚环的N-H位点在作为氢供体起作用的同时也作为氢受体起作用的程度的、拉曼光谱中规定的两个峰的强度比。5.根据权利要求1至4中任意一项所述的分析方法，其特征在于，所述指标是表示蛋白质中色氨酸的结构上的规定角度的宽度的、拉曼光谱中规定峰的宽度。6.根据权利要求1至5中任意一项所述的分析方法，其特征在于，所述指标是起因于蛋白质中的苯基丙氨酸的规定峰与起因于酰胺基的规定峰的强度比。7.根据权利要求1至6中任意一项所述的分析方法，其特征在于，在与多种浓度...

【专利技术属性】
技术研发人员：津本浩平，太田周志，野口慎太郎，
申请(专利权)人：株式会社堀场制作所，
类型：发明
国别省市：日本,JP