一种植物RNA修饰和编辑的系统及方法技术方案

本发明专利技术公开了一种植物RNA修饰和编辑的系统及方法，使用具有甲基转移酶的重组核酸酶dCas13a‑RsmB与dPspCas13b‑RsmB和具有腺嘌呤脱氨酶活性的重组核酸酶dPspCas13b‑hADAR(E488Q/T375G)对RNA进行胞嘧啶C甲基化修饰和腺嘌呤A到次黄嘌呤I的特异性转换，具有高效性和特异性等特点，是一种高效快速的RNA修饰和编辑系统。

A system and method for modifying and editing plant RNA

The present invention discloses a system and method for plant RNA modification and editing. RNA is modified by cytosine C methylation using recombinant nuclease dCas13a_RsmB with methyltransferase, dPspCas13b_RsmB with adenine deaminase and recombinant nuclease dPspCas13b_hADAR (E48Q/T5G) with adenine A to hypoxanthine I. Specific conversion, with high efficiency and specificity, is an efficient and rapid RNA modification and editing system.

【技术实现步骤摘要】
一种植物RNA修饰和编辑的系统及方法
本专利技术涉及基因工程
，尤其涉及一种植物RNA修饰和编辑的系统及方法，具体涉及使用具有甲基转移酶的重组核酸酶dCas13a-RsmB与dPspCas13b-RsmB和具有腺嘌呤脱氨酶活性的重组核酸酶dPspCas13b-hADAR(E488Q/T375G)对RNA进行胞嘧啶C甲基化修饰和腺嘌呤A到次黄嘌呤I的特异性转换。
技术介绍
在遗传学的研究过程中基因编辑工具的作用是非常重要的，近几年发现的CRISPR基因编辑技术以其特异性强、靶向性好、适用性广等特点成为广大科研工作者研究和开发的热点。利用CRISPR系统对基因组DNA进行敲除进而研究基因功能的方法是非常便利和高效的。CRISPR系统不仅能进行基因组DNA的敲除还可以通过融合突变的Cas蛋白序列与有催化功能的蛋白实现各种靶向基因编辑操作，如融合脱氨酶实现A-I和C-U的定点编辑。以上多种编辑修饰方式都是在DNA水平上进行的，而RNA作为重要的遗传信息传递介质对其的研究一直受到很大的限制，直到张峰在2016年发现沙氏纤毛菌(Leptotrichiashahii)中存在一种新型的CRIS本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种植物RNA修饰和编辑的系统，其特征在于：包括靶向RNA的具有RNA修饰和编辑功能的重组核酸酶及其靶向RNA的gRNA。

【技术特征摘要】
1.一种植物RNA修饰和编辑的系统，其特征在于：包括靶向RNA的具有RNA修饰和编辑功能的重组核酸酶及其靶向RNA的gRNA。2.根据权利要求1所述的一种植物RNA修饰和编辑的系统，其特征在于：所述重组核酸酶是将靶向RNA的无切割活性的核酸酶dCas13a和dPspCas13b分别与甲基转移酶结构域和腺嘌呤脱氨酶进行融合，形成的具有甲基转移酶活性的重组核酸酶dCas13a-RsmB与dPspCas13b-RsmB和具有腺嘌呤脱氨酶活性的重组核酸酶dPspCas13b-hADAR。3.一种植物RNA修饰和编辑的方法，其特征在于：应用权利要求1或2所述的植物RNA修饰和编辑系统，将相应功能的酶引导到相应RNA上，实现植物RNA的修饰和编辑。4.如权利要求3所述的一种植物RNA修饰和编辑的方法，其特征在于：利用所述重组核酸酶在靶位点处进行胞嘧啶碱基的甲基化和腺嘌呤碱基的脱氨，最终实现植物RNA的m5C甲基化修饰和A转换为I。5.如权利要求4所述的一种植物RNA修饰和编辑的方法，其特征在于：所述植物RNA的修饰方法包括建立RNAm5C甲基化修饰的体外表达系统；所述体...

【专利技术属性】
技术研发人员：王东，刘志红，张月婷，贺热情，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：江西,36