一种促进免疫低下模型小鼠食欲的方法技术

本发明专利技术涉及模型动物领域，具体是一种促进免疫低下模型小鼠食欲的方法，包括以下步骤：a)制作南极磷虾蛋白肽混合物：将南极磷虾肉糜采用碱性蛋白酶酶解至酶解液的水解度为32‑36％，干燥后制成所述的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)；b)给免疫低下模型小鼠灌胃步骤a的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)，灌胃量为20‑60g/kg，灌胃周期为10‑14天。本发明专利技术优点在于：提供了一种能有效促进改善免疫低下动物的食欲，且解决其食欲低下的问题的方法。

A method to promote appetite of immunosuppressed mice

The invention relates to the field of model animals, in particular to a method for promoting appetite of immunocompromised model mice, comprising the following steps: a) making a mixture of Antarctic krill protein peptides: hydrolyzing the Antarctic krill minced meat with alkaline protease to the hydrolysate with a hydrolysis degree of 32_36%, and preparing the mixture of the Antarctic krill protein peptides after drying. Compound (KPPs); b) Antarctic krill protein peptide mixture (KPPs) in step a of gastric administration was administered to immunocompromised mice. The dosage of KPPs was 20 60g/kg, and the period of gastric administration was 10 14 days. The invention has the advantages of providing a method which can effectively promote and improve the appetite of an immunocompromised animal and solve the problem of its low appetite.

【技术实现步骤摘要】
一种促进免疫低下模型小鼠食欲的方法
本专利技术涉及模型动物领域，具体地说，是一种促进免疫低下模型小鼠食欲的方法。
技术介绍
生物活性肽是蛋白质中25个氨基酸通过肽键以不同组成和排列方式构成的不同肽类的总称，是源于蛋白质的多功能化合物。近年来的研究表明，生物活性肽具有多种生物学功能：易消化吸收，提高饲料的适口性，促进摄食，提高饲料转化率，加快动物机体内蛋白质合成，提高生长速度等作用。其食用安全性极高，是当前国际食品界最热门的研究课题和极具发展前景的功能因子。海洋动物的生长环境与陆生动物截然不同，在长期的生物进化过程中，具有与陆生动物不同的基因组成及蛋白质结构，因此，海洋动物蛋白经生物酶解处理后的产物极有可能蕴含大量具有不同生物学功能的肽段。南极磷虾隶属节肢动物门、甲壳纲、磷虾目，我们通常所说的南极磷虾一般指南极大磷虾(EuphausiasuperbaDana)，广泛分布于环南极水域，营养价值丰富，资源蕴藏量巨大，最新估计的现存量在6.5到10亿吨之间，目前广为接受的说法为5亿吨左右，是可供人类利用的海洋动物资源中蕴藏量最为丰富的一种，被视为人类潜在的、重要的后备蛋白库。目前，磷虾资源处于未充分开发状态，尚有巨大的开发利用潜力。研究表明，南极磷虾蛋白质酶解液将富含多种必需氨基酸，尤其是赖氨酸和谷氨酸，还富含生物活性肽。目前多见南极磷虾粉作为水产动物，如真鲷、三文鱼、淡水虹鳟鱼饲料蛋白源的相关研究，而对南极磷虾肽的开发及生物学活性的研究较少。中国专利号为ZL201010575072.0“南极大磷虾蛋白肽混合物的制备方法”公开了以南极磷虾为原料制备南极磷虾蛋白肽混合物，中国专利文献CN103834711A“冰鲜南极磷虾的蛋白水解产物的制备及其用途”则进一步公开了南极磷虾蛋白水解产物可作为组链霉菌发酵所需氮源，组链霉菌产生的总放线菌素产量与蛋白胨等现有商品化氮源组产量相当，且高效液相色谱-质谱分析结果表明南极磷虾蛋白水解产物组发酵产生放线菌素D的结构类似物多样性更好。但关于南极磷虾肽混合物的生物学功能和应用的研究比较少。动物实验中发现免疫力低下的小鼠，普遍存在对食物缺乏欲望，表现为摄食行为不积极，摄食量下降，长期下去，不仅对消化道系统更对其生长发育产生严重影响，而食欲不振严重者会进一步引发厌食，引发身体一系列后续疾病反应。一般当遇到食欲不振时，可利用具有香味的食物，来刺激并且提高胃液的分泌及增进食欲。但是，目前市面上并没有一种高效价廉的改善食欲的保健食品。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能有效促进改善免疫低下动物的食欲，且解决其食欲低下的问题的方法。本专利技术解决上述问题的技术方案如下：通过给免疫低下模型小鼠膳食中补充海洋蛋白多肽粉的方式来实现促进其食欲的目的。具体采用灌胃方式给免疫低下模型小鼠补充南极磷虾蛋白肽混合物的方式，从摄食量和体重增加方面提供一种有效促进免疫低下模型小鼠食欲的方法。本专利技术的第一方面，提供一种促进免疫低下模型小鼠食欲的方法，包括以下步骤：a)制作南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)：将南极磷虾肉糜采用碱性蛋白酶酶解至酶解液的水解度为32-36％，干燥后制成所述的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)；b)给免疫低下模型小鼠灌胃步骤a的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)，灌胃量为20-60g/kg，灌胃周期为10-14天。本专利技术选择上述酶解液的水解度是以体外抗氧化活性的结果为参考依据的。水解度越高，表示蛋白质大分子被酶解成小片段的程度越高，根据文献报告，有生物学功能的多肽分子量范围大多在2-10KDa，如果水解程度过高，有生物学功能的多肽会被进一步水解成游离氨基酸，反而使其生物学功能降低。专利技术人做过不同水解度的肽液的体外抗氧化活性的实验结果也证实了这一点。优选的，所述的步骤a制作南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)的步骤为：将冰冻南极磷虾解冻绞成磷虾肉糜，按照原料与水1：1-1：3的比例加入超纯水搅拌混匀，调至合适pH(9.5±0.5)，加入600-1000U/g碱性蛋白酶，50-55℃水浴中进行酶解(2-4h)，沸水浴灭酶10min，冷却至室温，300目筛绢过滤除渣，滤液冷冻冻干或者喷雾干燥，制得所述的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)。在本专利技术的一个优选实施方式中，所述的步骤a制作南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)的步骤为：将冰冻南极磷虾解冻绞成磷虾肉糜，按照原料与水1：1的比例加入超纯水搅拌混匀，调至合适pH(9.5±0.5)，加入600U/g碱性蛋白酶，52℃水浴中进行酶解4h，沸水浴灭酶10min，冷却至室温，300目筛绢过滤除渣，滤液冷冻冻干或者喷雾干燥，制得所述的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)。其中酶解液的水解度为32.4％。在本专利技术的另一个优选实施方式中，所述的步骤a制作南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)的步骤为：将冰冻南极磷虾解冻绞成磷虾肉糜，按照原料与水1：3的比例加入超纯水搅拌混匀，调至合适pH(9.5±0.5)，加入1000U/g碱性蛋白酶，55℃水浴中进行酶解2h，沸水浴灭酶10min，冷却至室温，300目筛绢过滤除渣，滤液冷冻冻干或者喷雾干燥，制得所述的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)。其中酶解液的水解度是35.6％。优选的，所述的步骤b用环丙酰胺对小鼠进行免疫缺陷造模，注射环丙酰胺一周后的小鼠经检测符合免疫低下模型动物标准。本专利技术的第二方面，提供南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)在制备促进免疫低下模型小鼠食欲的食品或药物中的应用，所述的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)是将南极磷虾肉糜采用碱性蛋白酶酶解至酶解液的水解度为32-36％，干燥后制成。优选的，所述的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)的制备方法为：将冰冻南极磷虾解冻绞成磷虾肉糜，按照原料与水1：1-1：3的比例加入超纯水搅拌混匀，调至合适pH(9.5±0.5)，加入600-1000U/g碱性蛋白酶，50-55℃水浴中进行酶解(2-4h)，沸水浴灭酶10min，冷却至室温，300目筛绢过滤除渣，滤液冷冻冻干或者喷雾干燥，制得所述的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)。本专利技术的第三方面，提供一种促进免疫低下模型小鼠食欲的食品或药物，所述的食品或药物中包括南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)，所述的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)是将南极磷虾肉糜采用碱性蛋白酶酶解至酶解液水解度为32-36％，干燥后制成。优选的，所述的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)的制备方法为：将冰冻南极磷虾解冻绞成磷虾肉糜，按照原料与水1：1-1：3的比例加入超纯水搅拌混匀，调至合适pH(9.5±0.5)，加入600-1000U/g碱性蛋白酶，50-55℃水浴中酶解2-4h，沸水浴灭酶10min，冷却至室温，300目筛绢过滤除渣，滤液冷冻冻干或者喷雾干燥，制得所述的南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)。本专利技术优点在于：1、本专利技术提供了一种能有效促进改善免疫低下动物的食欲，且解决其食欲低下的问题的方法；2、本专利技术通过研究南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)是否具有提高免疫低下模型小鼠的食欲，提高其摄食量，从而实现开发南极磷虾蛋白肽混合物(KPPs)为人类功能性保健食品原料或者特殊营养强化剂可能。开发南极磷虾蛋白肽制品不仅可满足人们对食品的营养要求，更能满足人们对食品的保本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种促进免疫低下模型小鼠食欲的方法，其特征在于，包括以下步骤：a)制作南极磷虾蛋白肽混合物：将南极磷虾肉糜采用碱性蛋白酶酶解至酶解液的水解度为32‑36％，干燥后制成所述的南极磷虾蛋白肽混合物；b)给免疫低下模型小鼠灌胃步骤a的南极磷虾蛋白肽混合物，灌胃量为20‑60g/kg，灌胃周期为10‑14天。

【技术特征摘要】
1.一种促进免疫低下模型小鼠食欲的方法，其特征在于，包括以下步骤：a)制作南极磷虾蛋白肽混合物：将南极磷虾肉糜采用碱性蛋白酶酶解至酶解液的水解度为32-36％，干燥后制成所述的南极磷虾蛋白肽混合物；b)给免疫低下模型小鼠灌胃步骤a的南极磷虾蛋白肽混合物，灌胃量为20-60g/kg，灌胃周期为10-14天。2.根据权利要求1所述的促进免疫低下模型小鼠食欲的方法，其特征在于，所述的步骤a制作南极磷虾蛋白肽混合物的步骤为：将冰冻南极磷虾解冻绞成磷虾肉糜，按照原料与水1：1-1：3的比例加入超纯水搅拌混匀，调至pH9.5±0.5，加入600-1000U/g碱性蛋白酶，50-55℃水浴中酶解2-4h，沸水浴灭酶10min，冷却至室温，300目筛绢过滤除渣，滤液冷冻冻干或者喷雾干燥，制得所述的南极磷虾蛋白肽混合物。3.根据权利要求1所述的促进免疫低下模型小鼠食欲的方法，其特征在于，所述的步骤b用环丙酰胺对小鼠进行免疫缺陷造模，注射环丙酰胺一周后的小鼠经检测符合免疫低下模型动物标准。4.南极磷虾蛋白肽混合物在制备促进免疫低下模型小鼠食欲的食品或药物中的应用，其特征在于，所述的南极磷虾蛋白肽混合物是将南极磷虾肉糜采用碱性蛋白酶酶解至酶解液的水解度为32-36％，...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄艳青，陆建学，龚洋洋，黄洪亮，刘志东，李子牛，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院东海水产研究所，
类型：发明
国别省市：上海,31