一种复合多表位表达盒、其组成的重组病毒及应用制造技术

本发明专利技术涉及一种复合多表位表达盒、其组成的重组病毒及应用，尤其涉及一种新城疫病毒插入IBV表位盒嵌合重组病毒和采用这个病毒制备的疫苗，所述表达盒包含有：(a)来源于鸡传染性支气管炎病毒Holte株和鸡传染性支气管炎病毒QX样株的S1蛋白的T细胞表位；(b)来源于鸡传染性支气管炎病毒澳大利亚T株的S1蛋白的B细胞表位。本发明专利技术将鸡传染性支气管炎病毒的多表位嵌合S‑T/B基因插入至LaSota株的骨架中，使得LaSota株可以表达S1‑T/B蛋白，可达到同时预防ND和IB两种疫病的目的，且T细胞表位和B细胞表位协同增效，使得病毒免疫时间更早，免疫反应更全面。

A recombination multi epitope expression cassette and its recombinant virus and its application

The invention relates to a compound multi-epitope expression box, a recombinant virus composed of the recombinant virus and its application, in particular to a new castle disease virus inserted into an IBV epitope box chimeric recombinant virus and a vaccine prepared with the virus. The expression box comprises: (a) an infectious bronchitis virus Holte strain from chicken and an infectious bronchitis virus from chicken. T cell epitopes of S1 protein of QX-like strain; (b) B cell epitopes of S1 protein of Avian Infectious Bronchitis Virus Australian T strain. The invention inserts the multi-epitope chimeric S_T/B gene of avian infectious bronchitis virus into the skeleton of LaSota strain, so that LaSota strain can express S1_T/B protein, and can prevent ND and IB simultaneously. The synergistic effect of T cell epitope and B cell epitope makes the immune time of the virus earlier and the immune response better. All round.

【技术实现步骤摘要】
一种复合多表位表达盒、其组成的重组病毒及应用
本专利技术涉及基因和蛋白质工程领域，具体涉及一种复合多表位表达盒、其组成的重组病毒及应用，尤其涉及一种新城疫病毒插入IBV表位盒嵌合重组病毒和采用这个病毒制备的疫苗。
技术介绍
ND(防治新城疫，Newcastledisease)是一种急性高度致死性的禽类疫病，世界动物卫生组织(OIE)要求必须上报的传染性。ND的病原为新城疫病毒(Newcastlediseasevirus，NDV)，为副黏病毒科(Paramyxoviridae)、禽腮腺炎病毒属(Avulavirus)成员。NDV为单股负链RNA病毒，基因组全长约15.8kb，包括6个开放阅读框架，分别编码核蛋白(NP)、磷蛋白(P)、基质蛋白(M)、融合蛋白(F)、血凝素－神经氨酸酶(HN)和大聚合酶蛋白(L)。根据毒力差异，NDV可分为强毒株(Velogenic)、中等毒力株(Mesogenic)和弱毒株(Lentogenic)。强毒株可引起禽的急性、致死性感染，具有较高的死亡率。弱毒株仅引起轻度的呼吸道感染或肠道感染，因而被广泛地运用于新城疫活疫苗的生产。在众多NDV活疫苗中，以L本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种复合多表位表达盒，其特征在于，所述表达盒包含有：(a)来源于鸡传染性支气管炎病毒Holte株和鸡传染性支气管炎病毒QX样株的S1蛋白的T细胞表位；(b)来源于鸡传染性支气管炎病毒澳大利亚T株的S1蛋白的B细胞表位。

【技术特征摘要】
1.一种复合多表位表达盒，其特征在于，所述表达盒包含有：(a)来源于鸡传染性支气管炎病毒Holte株和鸡传染性支气管炎病毒QX样株的S1蛋白的T细胞表位；(b)来源于鸡传染性支气管炎病毒澳大利亚T株的S1蛋白的B细胞表位。2.根据权利要求1所述的复合多表位表达盒，其特征在于，所述T细胞表位的氨基酸序列如SEQIDNO.1-4所示；优选地，所述B细胞表位的氨基酸序列如SEQIDNO.5-7所示；优选地，所述T细胞表位和B细胞表位中的不同表位采用柔性小分子linker连接；优选地，所述柔性小分子linker为KAA、AAY、AAA、GAAA、KAAA，其核苷酸序列如8-12所示。3.根据权利要求1或2所述的复合多表位表达盒，其特征在于，所述表达盒前后还包含酶切位点；优选地，所述酶切位点为SpeI、XhoI、BamHI、EcoRI、NdeI、PstI或XhoI中的任意一种，优选为SpeI和XhoI；优选地，所述表达盒前的酶切位点之后还包含KOZAK序列，其核苷酸序列如SEQIDNO.13所示；优选地，所述表达盒的氨基酸序列如SEQIDNO.14所示；优选地，所述表达盒的核苷酸序列如S...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁铲，邵华斌，谭磊，温国元，于圣青，仇旭升，廖瑛，孟春春，孙英杰，宋翠萍，
申请(专利权)人：中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心，
类型：发明
国别省市：上海,31