一种对药物性肝损伤具有修复和治疗作用的枸杞提取物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种对药物性肝损伤具有修复和治疗作用枸杞提取物的制备方法，该方法是将枸杞子粉碎、过筛后置于多功能提取罐中，在高速剪切和搅拌低温纯水提取，固液分离后经大孔吸附树脂混合树脂模拟床富集，膜过滤分离纯化，干燥，灭菌而得。经检测，该提取物中，枸杞多糖含量≥65%，甜菜碱含量≥3.0%。活性实验结果表明，本发明专利技术制备的枸杞提取物对利福平肝损伤以及异烟肼引起的肝损伤具有较好的保护作用。

Preparation method of Lycium barbarum extract for repairing and curing drug-induced liver injury

The invention discloses a preparation method of Lycium barbarum extract, which has the function of repairing and treating drug-induced liver injury. The method is that Lycium barbarum extract is crushed, screened and placed in a multi-functional extraction tank, extracted by high-speed shearing and stirring low-temperature pure water, separated by solid-liquid and enriched by macroporous adsorption resin mixed resin simulated bed, and filtered by membrane. Separation, purification, drying and sterilization. The content of Lycium barbarum polysaccharide was more than 65% and the content of betaine was more than 3%. The experimental results show that the Lycium barbarum extract prepared by the invention has better protective effect on rifampicin-induced liver injury and isoniazid-induced liver injury.

【技术实现步骤摘要】
一种对药物性肝损伤具有修复和治疗作用的枸杞提取物的制备方法
本专利技术涉及一种枸杞提取物，尤其涉及一种对药物性肝损伤具有显著的修复和治疗作用的枸杞提取物的制备方法，属于食品、保健食品及药品

技术介绍
肝脏每分钟要完成500多种功能，以保持身体的正常运转，因此被人们称为“物质代谢中枢”、人体内最大的“化工厂”和“清洁器”，是人体内最大的“解毒工厂”。肝脏是药物代谢的主要场所，大多数药物在体内都要经过肝脏转化或结合作用，由脂溶性变为水溶性，然后从胆汁或尿液排出，某些药物在这个过程中会产生对肝脏有毒性的代谢产物；此外，药物本身及其代谢产物还可以扰乱机体的免疫平衡，最终诱发自身免疫反应。因此，肝脏是最易受到药物影响的器官，容易出现“药物性肝损伤”。药物性肝损伤（DILI）是指由药物或其代谢产物引起的肝脏损害。国际共识意见对药物导致肝脏损害采用统一的术语“肝损伤”，根据用药后肝功能异常情况，将肝损伤定义为血清ALT或总胆红素升高至正常值上限2倍以上；或AST、碱性磷酸酶(ALP)和总胆红素同时升高，且其中至少有1项升高至正常值上限2倍以上。目前我们日常生活中接触的药物及保健品已超过30000种，明确可以引起药物性肝损伤的药物超过1000种，包括抗结核药物、抗肿瘤药物、抗甲状腺药物、抗感染及非甾体抗炎药物、免疫抑制药、麻醉药以及中草药等等。其中临床最常见的是抗结核药物和抗肿瘤药物。因此，药物性肝损伤已成为一个不容忽视的严重公共卫生问题。据世界卫生组织统计，药物性肝损伤已经上升为全球肝病死亡原因的第五位。因为90%的药物需要在肝脏中代谢，所以肝脏成为药物不良反应发生的重要场所。药物性肝损伤迄今仍缺乏特异的治疗，现代医学在干预肝损伤的治疗方面并无特异性药物，主要治疗原则是及时停用肝毒性药物、支持治疗、监测和防治急性肝衰竭。轻者在停药后或经一般对症处理后可很快好转，重者则需住院治疗。治疗方法包括：停用致病药物，早期清除和排泄体内药物，一般治疗，药物治疗，急性肝功能衰竭的治疗，人工肝支持治疗，肝移植等。枸杞子有滋补肝肾的功效，为我国传统名贵中药材，也是享誉海内外的滋补食疗珍品，在我国已有2000多年的食用历史，被历版《中国药典》收载。现代科学研究表明，枸杞中的多种因子对损伤的肝细胞有着独特的修复作用，尤其是枸杞糖肽，是枸杞子保护肝脏的主要成分，能够通过缓解细胞炎症和氧化应激损伤发挥作用，对酒精、四氯化碳以及药物诱导的化学性肝损伤均具有显著的保护作用，其保护肝脏的能力和公认的肝脏保护剂水飞蓟素相媲美。因此，从枸杞中提取一种能够有效修复和预防药物性肝损伤的枸杞提取物，将其用于食品、保健食品、特殊医疗用途食品和药品的主要原料，具有十分重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种对药物性肝损伤具有修复和治疗作用的枸杞提取物的制备方法，将其应用于食品、保健食品、特殊医疗用途食品和药品，为药物性肝损伤的治疗提供新的途径。本专利技术枸杞提取物的制备方法，包括以下工艺步骤：（1）高速剪切破壁提取：将枸杞子粉碎，过40目筛后，置于多功能提取罐中，加入枸杞子粉体重量10~12倍的纯水，在高速剪切和搅拌下，于60+5℃提取0.5~2h，得枸杞提取混合液；所述高速剪切转速为6000~10000rpm，搅拌速度为100~200rpm。（2）固液分离：将上述枸杞提取混合液经粗滤，精滤，得枸杞提取液。其中，粗滤可采用三足式离心进行粗滤，滤布孔径为200~400目；也可采用蝶式离心机或卧式离心机进行粗滤，转速均为2000~4000rpm。精滤可采用管式离心机进行精滤，转速为10000~16000rpm；也可采用陶瓷膜过滤装置进行精滤。（3）大孔吸附树脂洗脱：将枸杞提取液泵入大孔吸附树脂混合树脂模拟床进行吸附，并收集吸附残液；待上样结束后先用纯水洗脱，再用质量百分数50~60%的乙醇溶液解吸附，回收溶剂至无醇味，得到解吸附液。其中，吸附流速1.0~2.0BV/h；洗脱流速2~4BV/h；解吸附流速3~4BV/h，温度控制在30~40℃。大孔吸附树脂混合树脂模拟床包含有2~4根大孔吸附树脂柱，其中至少有2根大孔吸附树脂柱串联；大孔吸附树脂柱的径高比为1:8~1:12。大孔吸附树脂为D101、LX-11、LX-60、LSA-10、LX-28、LX-38、AB-8中至少一种。优选：AB-8与D101以1:0.3~1:3质量比的混合树脂。（4）膜过滤系统分离：将上述吸附残液先经过微滤膜进行微滤，收集透过液并泵入纳滤膜进行纳滤，收集截留液；所述微滤膜的分子量50000~75000Da，控制压力在2~6bar、温度在25~40℃；纳滤膜，分子量为3500~5000Da，控制压力为5~10bar，温度为25~40℃。。（5）干燥、灭菌：将步骤（3）所得解吸附液和步骤（4）所得截留液充分混合，干燥，灭菌，得到枸杞提取物。干燥可采用冷冻干燥、喷雾干燥、真空干燥或鼓风干燥，优选喷雾干燥。喷雾干燥的条件为：进风温度：120~180℃，出风温度：80~120℃，料液密度：0.9~1.1。灭菌方式可采用Co-60辐射灭菌、紫外照射灭菌、电子束灭菌中的至少一种。本专利技术制备的枸杞提取物的有效成分为枸杞多糖和甜菜碱，其中，枸杞多糖含量≥65%，甜菜碱含量≥3.0%。具体检查方法按照《中国药典》2015版第一部枸杞子中“枸杞多糖”和“甜菜碱”含量测定方法执行。以本专利技术制备的枸杞提取物作为有效成分，和食品、保健食品、特殊医学用途配方食品或药品中可接受的辅料或添加剂进行复配，制备成食品、保健食品或药物制剂。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术对枸杞子提取物的制备方法、有效成分及对药物性肝损伤具有修复和治疗作用做进一步说明。实施例1（1）取优质枸杞子，依次用自来水、纯净水清洗，干燥，粉碎，过40目筛；（2）取25公斤枸杞子粉，加入多功能提取罐中，再加入250L纯化水，开启高速剪切机，设定转速为8000rpm；开启搅拌，使其转速为120rpm，待温度升至60℃开始计时，提取0.5h，得枸杞提取混合液；（3）将枸杞提取混合液泵入三足式离心机，滤布孔径为200目，离心机转速为3000rpm，收集离心液200L；再将离心液泵入管式离心机，转速为16000rpm，收集离心液，得到枸杞提取液约200L；（4）将上述枸杞提取液泵入大孔吸附树脂混合树脂模拟床（径高比1:12，2根树脂柱串联，AB-8:D101为2:1），上样流速为1.5BV/h，收集吸附残液；待上样结束后先用2BV纯水洗脱（洗脱流速为3BV/h）后，再用4BV60%乙醇溶液解吸附（解吸附流速为3BV/h），收集60%乙醇解吸浓缩附液，回收溶剂至无醇味；（5）将上述吸附残液利用50000Da的膜系统进行微滤（压力2~4bar，温度30±5℃），收集透过液；透过液再次泵入分子量为3500Da的纳滤膜系统进行纳滤（压力为6~10bar，温度为30±5℃）；收集截留液并与步骤（4）所得解吸附浓缩液混合；（6）将上述混合液进行喷雾干燥（进口温度160℃，出口温度100℃），收集干粉，得到枸杞提取物（TCLP）。其各项性能指标见表1。实施例2（1）取50公斤优质枸杞子，依次用自来水、纯净水清洗，干燥，粉碎，过40目筛；（2）将枸杞子粉本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种对药物性肝损伤具有修复和治疗作用枸杞提取物的制备方法，包括以下工艺步骤：（1）高速剪切破壁提取：将枸杞子粉碎，过40目筛后，置于多功能提取罐中，加入枸杞子粉体重量10~12倍的纯水，在高速剪切和搅拌下，于60+5℃提取0.5~2 h，得枸杞提取混合液；（2）固液分离：将上述枸杞提取混合液经粗滤，精滤，得枸杞提取液；（3）大孔吸附树脂洗脱：将枸杞提取液泵入大孔吸附树脂混合树脂模拟床进行吸附，并收集吸附残液；待吸附结束后先用纯水洗脱，再用质量百分数50~60%的乙醇溶液解吸附，并回收溶剂至无醇味，得到解吸附液；（4）膜过滤系统分离：将上述收集的吸附残液先经过微滤膜进行微滤，收集透过液并泵入纳滤膜进行纳滤，收集截留液；（5）干燥、灭菌：将步骤（3）所得解吸附液和步骤（4）所得截留液充分混合，干燥，灭菌，得到枸杞提取物。

【技术特征摘要】
1.一种对药物性肝损伤具有修复和治疗作用枸杞提取物的制备方法，包括以下工艺步骤：（1）高速剪切破壁提取：将枸杞子粉碎，过40目筛后，置于多功能提取罐中，加入枸杞子粉体重量10~12倍的纯水，在高速剪切和搅拌下，于60+5℃提取0.5~2h，得枸杞提取混合液；（2）固液分离：将上述枸杞提取混合液经粗滤，精滤，得枸杞提取液；（3）大孔吸附树脂洗脱：将枸杞提取液泵入大孔吸附树脂混合树脂模拟床进行吸附，并收集吸附残液；待吸附结束后先用纯水洗脱，再用质量百分数50~60%的乙醇溶液解吸附，并回收溶剂至无醇味，得到解吸附液；（4）膜过滤系统分离：将上述收集的吸附残液先经过微滤膜进行微滤，收集透过液并泵入纳滤膜进行纳滤，收集截留液；（5）干燥、灭菌：将步骤（3）所得解吸附液和步骤（4）所得截留液充分混合，干燥，灭菌，得到枸杞提取物。2.如权利要求1所述一种对药物性肝损伤具有修复和治疗作用枸杞提取物的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述高速剪切转速为6000~10000rpm，搅拌速度为100~200rpm。3.如权利要求1所述一种对药物性肝损伤具有修复和治疗作用枸杞提取物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中的粗滤采用三足式离心进行粗滤，滤布孔径为200~400目；或采用蝶式离心机、卧式离心机进行粗滤，转速均为2000~4000rpm。4.如权利要求1所述一种对药物性肝损伤具有修复和治疗作用枸杞提取物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中的精滤采用管式离心机进行精滤，转速为10000~16000rpm；或采用陶...

【专利技术属性】
技术研发人员：邸多隆，刘建飞，
申请(专利权)人：中国科学院兰州化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃,62