一种鲜荷叶纳米汁及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种鲜荷叶纳米汁的制备方法、公开了它的纳米溶液性质、公开了它对癌细胞迁移和侵袭的抑制作用。因而本发明专利技术公开了它在制备治疗和预防癌转移药物中的应用。

Fresh lotus leaf nano juice and preparation method and application thereof

The invention discloses a preparation method of fresh lotus leaf nano-juice, discloses the properties of its nano-solution, and discloses its inhibitory effect on the migration and invasion of cancer cells. Therefore, the invention discloses its application in preparing medicine for treating and preventing cancer metastasis.

【技术实现步骤摘要】
一种鲜荷叶纳米汁及其制备方法和应用专利
本专利技术涉及一种鲜荷叶纳米汁的制备方法、涉及它的纳米溶液性质、涉及它对癌细胞迁移和侵袭的抑制作用。因而本专利技术涉及它在制备治疗和预防癌转移药物中的应用。本专利技术属于生物医药领域。
技术介绍
肿瘤严重威胁人类的健康。除了自身对肿瘤患者的预后恶劣之外，肿瘤并发的转移进一步恶化患者的预后。例如，超过90％以上肿瘤患者都是死于转移。肿瘤转移由多个事件构成，下游事件是迁移和侵袭。肿瘤细胞离开原发部位之后，迁移到其它部位并通过侵袭进入正常组织。进入正常组织的肿瘤细胞在短暂休眠之后，便开始无节制增殖形成继发性癌。这种转移既可以是广泛的也可以是全身性的，后果非常严重。因为在肿瘤转移的事件链中迁移和侵袭是下游事件，所以抑制肿瘤细胞迁移和侵袭是预防肿瘤转移的最终的有效策略。由于现有抗肿瘤药物没有抗肿瘤转移作用，所以肿瘤化疗的临床疗效不理想。专利技术抗肿瘤转移的药物是临床的迫切需求。荷叶是民间广泛流传的健康食材，被认为有多样性治疗作用。民间有荷叶可以减肥、降血压、降血脂、清热解暑、利湿、健脾、增加冠脉流量和防治心律失常之说。由于没有严格的药效学研究，所以这些说法的基础仅仅是经验。此外，这些说法与抑制肿瘤细胞迁移和侵袭没有丝毫牵连。专利技术人长期从事蔬菜鲜汁的治疗作用研究。对荷叶的全组分分析使专利技术人认识到，荷叶鲜汁可以消除高尿酸血症。对荷叶的全组分分析还使专利技术人认识到，与民间烹制或干燥的荷叶不同，荷叶鲜汁不存在高温、油盐和佐料的影响。因而荷叶的全组分有能力以它们的天然状态发挥作用并形成纳米结构，帮助口服吸收。根据这些认识，专利技术人提出了本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一个内容是提供一种鲜荷叶汁。本专利技术的第二个内容是提供制备鲜荷叶纳米汁的方法，该方法包括:(1)表面无泥沙的新鲜荷叶1000kg于浸泡池中用3000kg-5000kg自来水水浸泡2小时。之后用3000kg-5000kg水至少洗3次，滤除水，得到清洁的新鲜荷叶；(2)将清洁的新鲜荷叶放到水浪气饱清洗机中，在链条传动下用反渗透纯化水再清洗之后，通过传递窗进入30万级洁净区；(3)将荷叶送入离心式榨汁机破碎和榨汁，获得45±2kg鲜荷叶原汁；(4)将鲜荷叶原汁装桶(10kg/桶)并密封；(5)将密封的鲜荷叶原汁桶(10kg/桶)经传递窗递出洁净区，入5℃库放置待用；(6)按生产指令单用量从5℃库提出鲜荷叶原汁，在缓冲间用紫外灯照射30分钟对外皮消毒；(7)经外皮消毒的鲜荷叶原汁通过传递窗进入洁净配料间；(8)在200l配料罐中将消毒的鲜荷叶原汁用纯净水稀释，配制浓度为20％(W/W)的鲜荷叶汁，搅拌30分钟后200目过滤，得到鲜荷叶汁滤液；(9)将鲜荷叶汁滤液灌装(100ml/瓶)，之后传出净化区；(10)瓶装鲜荷叶汁滤液于0.16mpa灭菌20分钟、冷却、贴标；(11)灭菌后的瓶装鲜荷叶汁滤液装箱(12瓶/箱),入阴凉成品库放储存待用；(12)测定鲜荷叶汁滤液组分的纳米尺寸。本专利技术的第三个内容是提供鲜荷叶纳米汁对肿瘤细胞转移和侵袭的治疗和预防作用。附图说明图1鲜荷叶纳米汁的丁达尔效应。图2鲜荷叶汁组分的纳米尺寸。图3鲜荷叶纳米汁的Zeta电位。具体实施方式为了进一步阐述本专利技术，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本专利技术进行具体描述，不应当理解为对本专利技术的限制。实施例1制备鲜荷叶纳米汁表面无泥沙的新鲜荷叶1000kg于浸泡池中用3000kg-5000kg自来水水浸泡2小时。之后用3000kg-5000kg水至少洗3次，滤除水，得到清洁的新鲜荷叶。将自来水洗净的新鲜荷叶放到水浪气饱清洗机中，在链条传动下用反渗透纯化水再清洗，之后通过传递窗进入30万级洁净区。在30万级洁净区将荷叶送入离心式榨汁机破碎和榨汁，获得45±2kg鲜荷叶原汁。将鲜荷叶原汁装桶(10kg/桶)并密封。将密封的鲜荷叶原汁桶(10kg/桶)经传递窗递出洁净区，入5℃库放置待用。按生产指令单用量从5℃库中提出的鲜荷叶原汁进入缓冲间，并用紫外灯照射30分钟对外皮消毒。经外皮消毒的鲜荷叶原汁通过传递窗进入洁净配料间。在200l配料罐中将消毒的鲜红薯叶原汁用纯净水稀释，配制浓度为20％(W/W)的鲜荷叶汁。搅拌30分钟后200目过滤，得到鲜荷叶汁滤液。将鲜荷叶汁滤液灌装(100ml/瓶)，之后传出净化区。瓶装鲜荷叶汁滤液于0.16mpa灭菌20分钟、冷却、贴标。灭菌后的瓶装鲜荷叶汁滤液装箱(12瓶/箱),入阴凉成品库放储存待用。实施例2测定鲜荷叶汁的丁达尔效应将5ml鲜荷叶汁置于绿色透明的玻璃瓶中，用激光笔照射鲜荷叶汁的中部。波长为650nm的激光使绿色透明的鲜荷叶汁中部出现一条红色光道。可见，鲜荷叶汁有丁达尔效应(见图1)。因为丁达尔效应是纳米溶液的特性，所以绿色透明的鲜荷叶汁是纳米溶液。鲜荷叶汁的纳米形态是本专利技术制备鲜荷叶汁方法的意想不到的技术效果的证据。实施例3测定鲜荷叶纳米汁组分构成的纳米粒的平均粒径将2ml鲜荷叶纳米汁置于专用测定池中，25℃在粒径分析仪(Nano-ZS90；MalvernInstrumentsLtd,Malvern,UK)上测定平均粒径。结果表明，鲜荷叶纳米汁组分形成的纳米粒的平均粒径为54.7±11.2nm(见图2)。可见，鲜荷叶纳米汁组分形成的纳米粒的粒径处在最有利于人体吸收和输送的粒径范围。这是本专利技术制备的鲜荷叶纳米汁的意想不到的技术效果。实施例4测定鲜荷叶汁组分的纳米粒的Zeta电位将2ml鲜荷叶纳米汁置于专用测定池中，25℃在Zeta电位分析仪(ZetaPlusS/N21394,BrookhavenInstrumentsCorporation)上测定纳米粒表面的Zeta电位。结果表明，鲜荷叶汁中组分形成的纳米粒表面的Zeta电位为2.65±9.82mV(见图3)。可见，鲜荷叶汁组分形成的纳米粒的表面带电荷。实施例5制备鲜荷叶水煎液表面无泥沙的新鲜荷叶1000g于浸泡池中用3000g–5000g自来水水浸泡2小时。之后用3000g-5000g水至少洗3次，滤除水，得到清洁的新鲜荷叶。将自来水洗净的新鲜荷叶切碎放到烧瓶中，用3000g纯净化水加热至沸，萃取30min，倾出水提取液。共提取3次。得到的水提取液减压浓缩，获得45±2g鲜荷叶水煎液。鲜荷叶水煎液既没有测得丁达尔效应，也没有测得Zeta电位。实施例6测定鲜荷叶纳米汁抑制肿瘤细胞迁移活性本测定在标准的转运小室完成。因为Arg-Gly-Asp-Ser被公认为具有抗肿瘤细胞迁移活性，所以本专利技术选择它为阳性对照药。又因为HCCLM3是高转移人肝癌细胞，所以本专利技术选择它为迁移的肿瘤细胞。HCCLM3细胞消化之后，用无血清DMEM培养基洗3次，计数，配成细胞悬液，密度为2×106个/mL。阳性对照的转运小室的上室加入100μL细胞悬液的同时加入25μLArg-Gly-Asp-Ser，使其终浓度为20nM。空白对照转运小室的上室加入100μL细胞悬液的同时加入25μLDMEM培养基配制的溶液。鲜荷叶纳米汁转运小室的上室加入100μL细胞悬液的同时加入25μL原浓度的鲜荷叶纳米汁，或加入25μL稀释10倍的鲜荷叶纳米汁，或加入25μL稀释100倍的鲜荷叶纳米汁。转运小室的下室加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鲜荷叶汁，其特征在于它是新鲜荷叶的纳米汁，具有抗肿瘤细胞迁移和侵袭活性。

【技术特征摘要】
1.一种鲜荷叶汁，其特征在于它是新鲜荷叶的纳米汁，具有抗肿瘤细胞迁移和侵袭活性。2.制备权利要求1的鲜荷叶纳米汁的方法，该方法包括:(1)表面无泥沙的新鲜荷叶1000kg于浸泡池中用3000kg-5000kg自来水浸泡2小时，之后清洗3-5次，滤除水，得到清洁的新鲜荷叶；(2)将清洁的新鲜荷叶放到水浪气饱清洗机中，在链条传动下用反渗透纯化水再清洗之后，通过传递窗进入30万级洁净区；(3)将荷叶送入离心式榨汁机破碎和榨汁，获得40-50kg鲜荷叶原汁；(4)将鲜荷叶原汁装桶并密封；(5)将密封的鲜荷叶原汁桶经传递窗递出洁净区，入5℃库放置待用；...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭师奇，吴滨，赵明，
申请(专利权)人：北京智诚拓展广告传媒有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11