一种安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump及其鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump及其鉴定方法，一安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump，含一个270bp的完整开放阅读框ORF，ORF的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；其鉴定方法包括：第一步，筛选含有耐盐碱相关的基因片段；第二步，构建含有ump基因的原核表达载体；第三步，通过化转异源宿主Escherichia coli KNabc，将基因ump导入KNabc宿主中，对基因ump生理功能及编码的蛋白活性进行鉴定。本发明专利技术所提出的ump基因对盐碱地土壤改良具有重要意义，可用于构建高效耐盐碱工程菌株、开发微生物肥料和提高植物耐盐碱性的转基因植物领域的研究。

A salt tolerant gene UMP and its identification method of Bacillus halophilus

The invention discloses a saline-alkali tolerant gene UMP of Bacillus anda and its identification method, a saline-alkali tolerant gene UMP of Bacillus anda, which contains a 270 BP complete open reading frame ORF, and the nucleotide sequence of the ORF is shown as SEQ ID NO.1. The identification method includes: the first step, screening the genes related to saline-alkali tolerance; In the second step, the prokaryotic expression vector containing UMP gene was constructed. In the third step, the UMP gene was transferred into the host of KNabc by transforming the heterologous host Escherichia coli KNabc, and the physiological function of UMP gene and the activity of the encoded protein were identified. The UMP gene proposed by the invention is of great significance for soil improvement in saline-alkali soil, and can be used for the construction of high-efficient Saline-Alkali-Tolerant engineering strains, the development of microbial fertilizers and the study of transgenic plants to improve salt-alkali tolerance of plants.

【技术实现步骤摘要】
一种安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump及其鉴定方法
本专利技术涉及一种安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump及其鉴定方法，属于分子生物学和基因工程

技术介绍
土壤作为人类赖以生存的环境资源，保障了人们的基本生活，土壤盐渍化现象日趋严重，据联合国教科文组织和粮农组织的不完全统计，世界盐渍土壤面积约为109hm2；据我国第二次全国土壤普查结果显示，中国盐渍土总面积约36×l06hm2，占全国可利用土地面积4.88％。耕地盐渍化面积达到9.21×l06hm2，占全国耕地面积6.62％，且主要分布在东北、西北、华北和沿海地区；土壤的盐化不但影响到植物的生长，而且降低农、牧业产量，公共设施及出土遗迹也备受影响，被称为世界性低产土壤；因此，开发利用盐渍土壤对耕地面积的增加，农、林、牧、副、渔业的有利发展，生态环境的改善等发挥重要作用。目前，土壤盐渍化己经成为全球科研工作者的研究热点问题之一，人们及科研工作者非常重视盐渍土壤的改良及可持续利用这项工作。我国的东北地区作为农、林业和畜牧业生产基地，素以肥沃的黑土地著称，但目前，盐渍土面积在东北地区的已达到了3.84×l06hm2，约占全国总盐渍土地本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump，其特征在于，所述安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump，含一个270bp的完整开放阅读框ORF，ORF的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump，其特征在于，所述安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump，含一个270bp的完整开放阅读框ORF，ORF的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump表达的蛋白，其氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。3.根据权利要求2所述的安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump表达的蛋白，其特征在于，所述蛋白在荧光猝灭实验中具有Na+(Li+、K+)/H+逆向转运蛋白活性，且Na+(Li+、K+)/H+逆向转运蛋白活性具有pH依赖性。4.一种安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump的鉴定方法，其特征在于，所述鉴定方法包括以下步骤：第一步，通过基因文库与基因功能互补相结合的筛选技术，从安达喜盐芽胞杆菌中获得含有耐盐碱相关的基因片段，所述的耐盐碱相关的基因片段中含有一个长270bp的ump基因的完整开放阅读框ORF，ORF的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；第二步，构建含有ump基因的原核表达载体；第三步，通过化转异源宿主EscherichiacoliKNabc，将基因ump电击转化的方法导入至KNabc宿主中，对基因ump生理功能及编码的蛋白活性进行鉴定。5.根据权利要求4所述的安达喜盐芽胞杆菌耐盐碱基因ump的鉴定方法，其特征在于，所述第二步中构建含有ump基因的原核表达载体，其具体包括构建原核表达载体pET28b-ump和原核表达载体pET22b-ump；所述原核表达载体pET28b-ump和原核表达载体pET22b-...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜巨全，邵丽，徐桐，陈慧文，张正来，闫明雪，张伟，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23