The invention discloses a method for constructing a sufB gene deletion strain of Salmonella enteritidis, and the sufB gene deletion of Salmonella enteritidis can reduce the virulence of Salmonella enteritidis, and the sufB gene deletion of Salmonella enteritidis can be applied to the vaccine of Salmonella enteritidis. The present invention uses Red homologous recombination method to construct Salmonella enteritidis sufB gene deletion strain, and studies its biological characteristics and virulence. It is clear that sufB gene deletion causes the virulence decline of Salmonella enteritidis, and provides reference for designing Salmonella enteritidis vaccine target, thereby preventing and treating Salmonella enteritidis infection, and at the same time can further explore the virulence. Physiological functions of Salmonella enteritidis SufB protein.
【技术实现步骤摘要】
肠炎沙门菌sufB基因缺失的应用
本专利技术涉及一种基因缺失株的构建方法，具体地说，涉及一种肠炎沙门菌sufB基因缺失的应用及sufB基因缺失株的构建方法，属于生物
技术介绍
肠炎沙门菌是一种重要的食源性人兽共患病原菌，给畜牧业生产和人类健康造成重大威胁。近年来，随着肉、蛋、奶的消费水平不断提高，由食源途径造成的肠炎沙门菌感染问题日益凸显。临床上，肠炎沙门菌感染可引起幼龄动物的败血症和系统感染，但在成年动物中多不表现明显症状，病原在动物机体中长期存在。活性氧的杀伤作用是机体巨噬细胞杀伤外来病原的重要手段。研究发现，沙门菌能够感染宿主巨噬细胞，并随其游移造成系统感染，其具有的活性氧耐受特性在这一过程中发挥关键作用。铁硫簇是普遍存在于生物体的重要活性物质，与光合和呼吸链电子传递密切相关。目前，已经发现至少三种不同类型的铁硫簇生物合成系统，即NIF、ISC、SUF系统。其中NIF系统与细菌固氮作用相关，ISC系统为生物生命活动所必需，SUF系统与氧化应激和缺氧条件有关，但非生命所必需。sufB是细菌铁硫簇SUF系统的成员，参与构成SufBCD复合体，起到支架作...
【技术保护点】
1.肠炎沙门菌sufB基因缺失用于降低肠炎沙门菌的毒力。
【技术特征摘要】
1.肠炎沙门菌sufB基因缺失用于降低肠炎沙门菌的毒力。2.肠炎沙门菌sufB基因缺失在肠炎沙门菌疫苗中的应用。3.肠炎沙门菌sufB基因缺失株的构建方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)利用引物P1和P2，构建sufB基因敲除打靶片段；所述引物序列为：P1：5’-CGCAAAGCGTAACGAACCTGAGTGGATGCTGGAATTTCGTCTCAATGCCTATAGAGCCTGTGTAGGCTGGAGCTGCTTCG-3’，SEQIDNO：1；P2：5’-GCGAAAATAGGTGGATAACTCCATTGGGCAACGCACGCCTTTGGGAACATAGATAAATGATGGGAATTAGCCATGGTCC-3’，SEQIDNO：2；(2)将质粒pKD46转入C50336感受态细胞，获得C50336/pKD46阳性菌株；(3)阳性菌株接种于带有氨苄青霉素抗性的液体LB培养基中，添加L-阿拉伯糖诱导培养，并制备感受态...
【专利技术属性】
技术研发人员：张志强，史秋梅，吴同垒，高桂生，李巧玲，苏硕青，
申请(专利权)人：河北科技师范学院，
类型：发明
国别省市：河北,13
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