多特异性抗体制造技术

本发明专利技术涉及用于研究和治疗的根据式A(A1)n‑X:Y‑B(B1)m的异二聚体系连的双特异性蛋白质复合物及其文库/多重复合物，特别是检测在其他方面未知的靶标对的协同生物学功能的体外/离体方法。这样的复合物可以用于捕获从特定细胞分泌的可溶性分子，用于治疗、用于研究和用于实验目的，例如用于通过鉴定与病理或预后相关的细胞群体来表征患者群体的测定。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】多特异性抗体专利
本公开内容涉及新的双特异性蛋白质复合物形式和检测异二聚体系连的双特异性蛋白质复合物中的协同生物学功能的方法(特别是体外/离体方法)，双特异性蛋白质复合物的文库/多重复合物以及其试剂盒和组合物。本公开内容还涉及双特异性蛋白质复合物用于捕获从特定细胞分泌的可溶性分子、用于治疗、用于研究和用于实验目的(特别是用于通过鉴定与病理或预后相关的细胞群体来表征患者群体的测定)的用途。本公开内容还扩展至制备所述双特异性复合物的方法。专利技术背景体内生物学机制是极其复杂的信号级联，其难以解析(deconvolute)和理解。T细胞的活化需要至少两种信号。T细胞受体对抗原的识别被认为是第一信号，第二信号产生自共刺激，其由T细胞上的另外的表面分子与抗原呈递细胞上的另外的分子的连接(ligation)产生。因此T细胞活化能够用于阐明生物学功能的调节可能需要多种信号。其它生物学过程同样复杂或更复杂。尽管基于细胞的体外筛选具有对体内机制的见解以及能够帮助获得对体内机制的见解，但如何鉴定调节生物学功能的合适配体对仍存在问题。广泛预计双特异性抗体在下一代生物治疗剂中起主要作用(D.Holmes本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.具有式A(A1)n‑X:Y‑B(B1)m的多特异性蛋白质复合物，其中：A(A1)n‑X是第一融合蛋白；Y‑B(B1)m是第二融合蛋白；X:Y是异二聚体系链；:是X和Y之间的结合相互作用；其中A是多特异性蛋白质复合物的第一蛋白质组分，其选自scFv、sdAb、Fab或Fab'片段；B是多特异性蛋白质复合物的第二蛋白质组分，其选自scFv、sdAb、Fab或Fab'片段；A1和B1独立地选自scFv或sdAb；附接至未被X占据的A的N端或C端，是附接至未被Y占据的B的Fab或Fab'片段的重链或轻链的N端或C端的scFv或sdAb，n是0或1，m是0或1，条件是n或m中的至少一个是1；其中X选...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.12.03 GB 1521393.71.具有式A(A1)n-X:Y-B(B1)m的多特异性蛋白质复合物，其中：A(A1)n-X是第一融合蛋白；Y-B(B1)m是第二融合蛋白；X:Y是异二聚体系链；:是X和Y之间的结合相互作用；其中A是多特异性蛋白质复合物的第一蛋白质组分，其选自scFv、sdAb、Fab或Fab'片段；B是多特异性蛋白质复合物的第二蛋白质组分，其选自scFv、sdAb、Fab或Fab'片段；A1和B1独立地选自scFv或sdAb；附接至未被X占据的A的N端或C端，是附接至未被Y占据的B的Fab或Fab'片段的重链或轻链的N端或C端的scFv或sdAb，n是0或1，m是0或1，条件是n或m中的至少一个是1；其中X选自抗原或抗体或其结合片段，并且所述X附接至A或A1的N端或C端；和Y选自抗原或抗体或其结合片段，并且所述Y附接至B或B1的N端或C端；其中A1附接至未被X占据的A的N端或C端；其中B1附接至未被Y占据的B的N端或C端；并且条件是当X是抗原时，Y是对由X代表的抗原具有特异性的抗体或其结合片段，并且当Y是抗原时，X是对由Y代表的抗原具有特异性的抗体或其结合片段。2.根据权利要求1所述的多特异性蛋白质复合物，其中：其中A选自具有重链和轻链的Fab或Fab'片段；其中B选自具有重链和轻链的Fab或Fab'片段；其中X是结合对的第一结合配偶体，其独立地选自抗原或抗体或其结合片段，并且所述X附接至A的Fab或Fab'的轻链或重链的C端；和其中Y是结合对的第二结合配偶体，其独立地选自抗原或抗体或其结合片段，并且所述Y附接至B的Fab或Fab'的轻链或重链的C端；A1是附接自没有被X占据的A的Fab或Fab'片段的重链或轻链的C端的scFv或sdAb，B1是附接自没有被Y占据的B的Fab或Fab'片段的重链或轻链的C端的scFv或sdAb，n是0或1，m是0或1，条件是n或m中的至少一个是1，并且条件是当X是抗原时，Y是对由X代表的抗原具有特异性的抗体或其结合片段，并且当Y是抗原时，X是对由Y代表的抗原具有特异性的抗体或其结合片段。3.根据权利要求1或权利要求2所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中A是Fab片段。4.根据权利要求1至3中任一项所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中B是Fab片段。5.根据权利要求1至4中任一项所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中X任选通过接头与Fab或Fab'片段中重链的C端融合。6.根据权利要求1至5中任一项所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中Y任选通过接头与Fab或Fab'片段中重链的C端融合。7.根据权利要求1至6中任一项所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中X独立地选自scFv、sdAb和肽，条件是当X是肽时，Y是抗体或其结合片段，例如scFv或VHH，并且当X是scFv或sdAb时，Y是抗原，例如肽。8.根据权利要求1至7中任一项所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中Y独立地选自scFv、sdAb和肽，条件是当Y是肽时，X是抗体或结合片段，例如scFv或sdAb，并且当Y是scFv或sdAb时，X是抗原，例如肽。9.根据权利要求7或8所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中所述肽的长度在5至25个氨基酸的范围内。10.根据权利要求1至9中任一项所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中X和Y之间的结合亲和力为5nM或更强。11.根据权利要求10所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中X和Y之间的结合亲和力为900pM或更强，例如800pM、700pM、600pM、500pM、400pM或300pM。12.根据权利要求1至11中任一项所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中X或Y是对肽GCN4(SEQIDNO：1或SEQIDNO：1的氨基酸1至38)具有特异性的scFv或sdAb。13.根据权利要求12所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中所述scFv是52SR4(SEQIDNO：3或SEQIDNO：3的氨基酸1至243)。14.根据权利要求1至13中任一项所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中X或Y是肽GCN4(SEQIDNO：1或SEQIDNO：1的氨基酸1至38)。15.根据权利要求1至14中任一项所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中A和/或B对独立地选自包含以下的组的抗原具有特异性：细胞表面受体例如T细胞或B细胞信号传导受体，共刺激分子，检查点抑制剂，天然杀伤细胞受体，免疫球蛋白受体，TNFR家族受体，B7家族受体，粘附分子，整联蛋白，细胞因子/趋化因子受体，GPCR，生长因子受体，激酶受体，组织特异性抗原，癌症抗原，病原体识别受体，补体受体，激素受体或可溶性分子例如细胞因子，趋化因子，白三烯，生长因子，激素，酶和离子通道。16.根据权利要求1至15中任一项所述的多特异性蛋白质复合物、例如双特异性蛋白质复合物，其中A1和/或B1对独立地选自包含以下的组的抗原具有特异性：细胞表面受体例如T细胞或B细胞信号传导受体，共刺激分子，检查点抑制剂，天然杀伤细胞受体，免疫球蛋白受体，TNFR家族受体，B7家族受体，粘附分子，整联蛋白，细胞因子/...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·J·赖特，
申请(专利权)人：UCB生物制药私人有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时,BE