用于建立比格犬心功能不全模型的方法和试剂盒技术

本发明专利技术提供了一种用于建立比格犬心功能不全模型的方法和试剂盒。所述的试剂盒，其特征在于，包含静脉滴注用预混粉剂或含有静脉滴注用预混粉剂的注射液，所述的静脉滴注用预混粉剂由盐酸多柔比星，奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌组成，含有静脉滴注用预混粉剂的注射液中静脉滴注用预混粉剂的浓度为0.4mg/mL，盐酸多柔比星，奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌的质量比为3∶1∶1。采用上述比格犬心功能不全模型的试剂盒可以方便、高效地建立比格犬的心功能不全模型，可以运用于临床医学的研究。

Method and kit for establishing Beagle heart failure model

The invention provides a method and kit for establishing beagle dog heart failure model. The kit is characterized in that it contains premixed powder for intravenous drip or injection containing premixed powder for intravenous drip. The premixed powder for intravenous drip consists of doxorubicin hydrochloride, omeprazole sodium and Bacillus licheniformis. The premixed powder for intravenous drip is used for intravenous drip in injection containing premixed powder for intravenous drip. The concentration of the powder was 0.4 mg/mL, the mass ratio of doxorubicin hydrochloride, omeprazole sodium and Bacillus licheniformis was 3:1:1. The above kit can be used to establish the Beagle canine cardiac insufficiency model conveniently and efficiently, and can be used in clinical medicine research.

【技术实现步骤摘要】
用于建立比格犬心功能不全模型的方法和试剂盒
本专利技术属于生物制模领域，涉及一种用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒，用于建立蒽环类化疗药物心脏毒性动物模型。
技术介绍
蒽环类药物是一类细胞毒类抗肿瘤的蒽环类药物，由于其抗肿瘤谱广、抗肿瘤作用强、疗效确切，因此被广泛应用于血液系统恶性肿瘤与各类实体肿瘤的一线治疗方案中，但与之相对，其严重的心脏毒性限制其在临床上的进一步使用。近年来，对多柔比星致心脏毒性的基础研究揭示了一些可能的分子机制，如自由基诱导的心肌氧化损伤，心肌细胞线粒体功能障碍，产生药物-铁复合物加重氧化损伤等。尸体解剖发现，蒽环类药物能导致心肌细胞出现空泡变性，纤维化等病理改变。但由于缺乏有效的组织病理标本与细胞样本，其确切的致心脏损伤的过程尚未完全阐明。由于医学伦理的相关要求，对已有多柔比星致心功能损害的患者，研究其心脏的细胞与病理改变在实际科研中难以开展。因此急需合适的动物模型来模拟临床中出现的多柔比星相关性心功能不全，并追踪其整个过程，从而对临床策略的制定提供重要的参考。此前报道的一些动物模型大多是用小鼠制备的，而小鼠心脏与人类心脏差异较大且小鼠的心率是人的8-10倍，使得对小鼠心功能的评估受到限制。此外小鼠模型采用短时间、大剂量腹腔注射表柔比星的方式给药，这与临床上的给药剂量、给药方式均有很大的差异，其所导致的不良反应也不尽相同。而比格犬的心血管系统与人类高度相似，表柔比星的给药方式与剂量也与人类相近，因此，是研究蒽环类药物致心功能不全的良好载体。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于建立比格犬心功能不全模型的方法和用于实施该方法的试剂盒，以提高建模成功率。为了达到上述目的，本专利技术提供了一种用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒，其特征在于，包含静脉滴注用预混粉剂或含有静脉滴注用预混粉剂的注射液，所述的静脉滴注用预混粉剂由盐酸多柔比星、奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌组成，盐酸多柔比星，奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌的质量比为3∶0.5-1.5∶0.5-1.5。优选地，所述的含有静脉滴注用预混粉剂的注射液中静脉滴注用预混粉剂的浓度为0.35-0.45mg/mL。更优选地，所述的盐酸多柔比星，奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌的质量比为3∶1∶1。更优选地，所述的含有静脉滴注用预混粉剂的注射液中静脉滴注用预混粉剂的浓度为0.4mg/mL。优选地，所述的盐酸多柔比星和奥美拉唑钠皆为分析纯。优选地，所述的盐酸多柔比星、奥美拉唑钠及地衣芽孢杆菌的总含量为200mg。优选地，所述的用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒还包含9％氯化钠注射液500mL。优选地，所述的用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒还包含静脉留置针、输液器、输液贴以及注射液专用容器中的至少一种。本专利技术还提供了上述的用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括：取含有静脉滴注用预混粉剂的注射液或采用静脉滴注用预混粉剂配制所述的含有静脉滴注用预混粉剂的注射液，按照静脉滴注用预混粉剂的用量为2.0-3.0mg/kg体重的剂量给比格犬静脉滴注，每1-2周进行一次，共进行7-9次，得到比格犬心功能不全模型。优选地，按照静脉滴注用预混粉剂的用量为2.5mg/kg体重的剂量给比格犬静脉滴注。本专利技术还提供了一种建立比格犬心功能不全模型的方法，其特征在于，包括：取含有静脉滴注用预混粉剂的注射液或采用静脉滴注用预混粉剂配制所述的含有静脉滴注用预混粉剂的注射液，所述的静脉滴注用预混粉剂由盐酸多柔比星、奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌组成，盐酸多柔比星，奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌的质量比为3∶0.5-1.5∶0.5-1.5，所述的含有静脉滴注用预混粉剂的注射液中静脉滴注用预混粉剂的浓度为0.35-0.45mg/mL，按照静脉滴注用预混粉剂的用量为2.0-3.0mg/kg体重的剂量给比格犬静脉滴注，每1-2周进行一次，共进行7-9次，得到比格犬心功能不全模型。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：1、本专利技术在使用多柔比星建立比格犬心功能不全模型的同时，加以辅助的奥美拉唑钠，避免上消化道出血等其他药物相关的不良反应，同时增加肠益生菌如地衣芽孢杆菌来调节肠道菌群以保护肠粘膜，以防止下消化道出血，并通过多次试验，确定了合理的给药剂量与给药间隔，改进给药方式，从而有效提高了建模的成功率，简化了建模步骤。本专利技术操作简便、可重复性高、成功率高，采用上述比格犬心功能不全模型的试剂盒可以方便、高效地建立比格犬的心功能不全模型，可以运用于临床医学的研究。2、本专利技术在给予科学的给药剂量，给药次数和给药周期后，能在短时间内(16周)快速建立比格犬心功能不全的模型。相较于此前已有报道的可重复的建模方式(静脉推注多柔比星1.5mg/kg/次，三周一次，累积剂量12-13mg/kg，24周成模)能提前平均60天的时间完成模型建立，因此更为快速高效。3、本专利技术确定了奥美拉唑钠与地衣芽孢杆菌用于预防多柔比星静滴后比格犬胃肠道出血的合理剂量。附图说明图1为使用配套软件对图像进行分析图；其中，A1为人工定位左室二尖瓣、心尖、左室流出道位置，apex定位心尖部，MV定位左室二尖瓣；B1为软件对心肌运动进行跟踪，电脑自动在左心室长轴两腔心、三腔心、四腔心切面及左心室短轴切面描记了心内膜边界；Cl为软件分析得到左心室舒张末期容积、收缩末期容积、射血分数等数据；图中左下角部分显示分析数据为：EDV(舒张末容积)24.2mlESV(收缩末容积)11.0mlEF(射血分数)54.4％。图2为显示基线(0周)-A2、4次给药后(8周)，-B2、8次给药(16周)-C2、最终成模(20周)-D2四个时间点的分析结果图(包括左心室舒张末期容积(ESV)、收缩末期容积(EDV)、射血分数(EF)等)。A2中图中左下角部分显示分析数据为：EDV(舒张末容积)24.2mlESV(收缩末容积)11.0mlEF(射血分数)54.4％；B2图中左下角部分显示分析数据为：EDV(舒张末容积)25.9mlESV(收缩末容积)13.8mlEF(射血分数)46.7％；C2图中左下角部分显示分析数据为：EDV(舒张末容积)20.7ml，ESV(收缩末容积)11.7mlEF(射血分数)43.2％；D2图中左下角部分显示分析数据为EDV(舒张末容积)27.1ml；ESV(收缩末容积)16.8mlEF(射血分数)38.2％。图3为四个时间点：0周、8周、16周、20周比格犬的左心室射血分数(LVEF)平均值的柱状图(20周与0周相比左心室射血分数发生了显著下降P<0.05)具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。此外应理解，在阅读了本专利技术讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。本实施例中的静脉留置针、输液器、输液贴以及注射液专用容器皆为市售产品。实施例一种用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒，包含静脉滴注用预混粉剂、9％氯化钠注射液500mL、静脉留置针、输液器、输液贴以及注射液专用容器。所述的静脉滴注用预混粉剂由盐酸多柔比星，奥美拉唑钠及地衣芽孢杆菌(BacillusLichenif本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒，其特征在于，包含静脉滴注用预混粉剂或含有静脉滴注用预混粉剂的注射液，所述的静脉滴注用预混粉剂由盐酸多柔比星、奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌组成，盐酸多柔比星，奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌的质量比为3∶0.5‑1.5∶0.5‑1.5。

【技术特征摘要】
1.一种用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒，其特征在于，包含静脉滴注用预混粉剂或含有静脉滴注用预混粉剂的注射液，所述的静脉滴注用预混粉剂由盐酸多柔比星、奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌组成，盐酸多柔比星，奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌的质量比为3∶0.5-1.5∶0.5-1.5。2.如权利要求1所述的用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒，其特征在于，所述的含有静脉滴注用预混粉剂的注射液中静脉滴注用预混粉剂的浓度为0.35-0.45mg/mL。3.如权利要求1所述的用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒，其特征在于，所述的盐酸多柔比星，奥美拉唑钠和地衣芽孢杆菌的质量比为3∶1∶1。4.如权利要求1所述的用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒，其特征在于，所述的含有静脉滴注用预混粉剂的注射液中静脉滴注用预混粉剂的浓度为0.4mg/mL。5.如权利要求1所述的用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒，其特征在于，所述的盐酸多柔比星、奥美拉唑钠及地衣芽孢杆菌的总含量为200mg。6.如权利要求1所述的用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒，其特征在于，还包含9％氯化钠注射液500mL。7.如权利要求1所述的用于建立比格犬心功能不全模型的试剂盒，其特征在于，还包含静脉留置针、输液器、输液贴以...

【专利技术属性】
技术研发人员：程蕾蕾，许宇辰，赵睿，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：上海,31