一种蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备方法及蚕蛹蛋白抗氧化肽的应用技术

本发明专利技术提供了一种蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备方法，属于食品加工技术领域。所述制备方法包括：1)将蚕蛹粉与石油醚混合，超声，固液分离；2)将脱脂蚕蛹粉、水和蚕蛹蛋白水解酶混合进行酶解；3)将蚕蛹粉酶解液灭酶，离心，将得到的上清液采用0.40～0.50μm滤膜过滤，收集滤液；4)将滤液采用3000Da的超滤膜超滤，收集透过液，得到超滤液；5)将超滤液采用200Da的超滤膜超滤，收集截留物。本发明专利技术制备得到的蚕蛹蛋白肽中必需氨基酸含量达到43％左右，总抗氧化能力、对超氧阴离子(O2·)的清除能力、对·OH清除能力以及对DPPH的清除能力均较强。

【技术实现步骤摘要】
一种蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备方法及蚕蛹蛋白抗氧化肽的应用
本专利技术属于食品加工
，具体涉及一种蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备方法及蚕蛹蛋白抗氧化肽的应用。
技术介绍
目前我国产茧量约60万吨，占世界的80％左右。蚕蛹(Silkwormpupa)是蚕蛾科昆虫家蚕蛾(BombyxmoilL.)的蛹，蚕蛹是传统中药，《本草纲目》、《圣济总录》、《圣惠方》、《东医宝鉴》等古代医药经典著作都对蚕蛹功能有详细记载，认为蚕蛹具有生津止渴、消食理气、镇惊、壮阳、键脾胃、祛风湿、长肌退热等功效。蚕蛹中蛋白质含量高达45％～55％，多为球蛋白，富含18种氨基酸，其中人体必需的8种氨基酸含量超过总量的40％，必需氨基酸与非必需氨基酸之比大于0.6，高于世界卫生组织和联合国粮农组织(WHO/FAO)提出的参考蛋白模式，是一种全价的优质蛋白，具有潜在的食用价值。虽然蚕蛹蛋白是优质蛋白，但是由于分子量大其水溶性较差，不仅影响它们在食品工业中的应用，也影响人体对它的消化吸收。蚕蛹蛋白还存在着大约30kDa以上的大分子蛋白，可能引起部分人出现过敏反应，这些都阻碍了蚕蛹蛋白在食品中的应用，也给蚕蛹蛋白的直接利用带来了风险。而且，由于蚕蛹缫丝通常采用的条件是高温强碱，因此缫丝后的蚕蛹不仅有很难除尽的腥味，而且蛋白质发生变性，脂肪也发生氧化而产生出严重的酸败味，消费者难以接受这些不良风味，目前主要将蚕蛹用作饲料，而将其直接作为食品原料的较少，影响了蚕蛹附加值的提升。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备方法及蚕蛹蛋白抗氧化肽的应用，具有较强的抗氧化功能，且易于消化吸收，可作为食品食用。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备方法，包括如下步骤：1)将蚕蛹粉与石油醚混合，超声脱脂，固液分离，得到的固相进行干燥，得到脱脂蚕蛹粉；2)将所述步骤1)中的脱脂蚕蛹粉、水和蚕蛹蛋白水解酶混合进行酶解，得到蚕蛹粉酶解液；3)将所述步骤2)的蚕蛹粉酶解液灭酶，离心，将得到的上清液采用0.40～0.50μm滤膜过滤，收集滤液；4)将所述步骤3)中的滤液采用3000Da的超滤膜超滤，收集透过液，得到超滤液；5)将所述步骤4)中的超滤液采用200Da的超滤膜超滤，收集截留物；所述截留物为蚕蛹蛋白抗氧化肽。优选的，所述步骤2)中脱脂蚕蛹粉、水和蚕蛹蛋白水解酶的质量比为5～8:95～105:2.5～4；所述蚕蛹蛋白水解酶的比活力为0.5×105～2.0×105U/g。优选的，所述步骤2)中酶解的温度为50～60℃，酶解的时间为4～6h。优选的，所述步骤2)中酶解时的pH值为7.0～8.0。优选的，所述步骤1)中蚕蛹粉的质量与石油醚的体积比为1g:6～10mL。优选的，所述步骤1)中超声脱脂的次数为2～4次，超声的功率为100～150W，超声的时间为30～50min/次，超声的温度为35～45℃。优选的，其特征在于，所述步骤1)中蚕蛹粉的粒度为140～160目。优选的，所述步骤1)中干燥的温度为50～60℃，干燥的时间为45～60min。优选的，所述步骤5)中收集截留物后还包括将所述截留物进行冷冻干燥；所述冷冻干燥的温度为-40～-20℃，所述冷冻干燥的时间为8～12h。本专利技术提供了一种上述方案所述的方法制备得到的蚕蛹蛋白抗氧化肽在制备食品或抗氧化药品中的应用。本专利技术提供了一种蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备方法，先将蚕蛹粉经石油醚进行脱脂，防止蚕蛹粉中的脂肪在肽的制备过程中发生氧化及与蛋白质发生乳化，得到脱脂蚕蛹粉后再利用蚕蛹蛋白水解酶进行酶解，使与抗氧化活性有关的芳香族氨基酸、支链氨基酸、酸性氨基酸、碱性氨基酸的比例都升高，且使这些氨基酸残基暴露，提高抗氧化活性。进一步进行过滤，超滤，使制备得到的蚕蛹蛋白肽中必需氨基酸含量达到43％左右，符合FAO/WHO(联合国粮农组织FAO或世界卫生组织WHO)提出的必需氨基酸含量在40％左右的要求。同时制备得到的蚕蛹蛋白肽分子量在200～3000Da，易于消化吸收。实施例结果表明：相较于采用蚕蛹蛋白水解专用酶+风味蛋白酶酶解时得到的蚕蛹蛋白肽的总抗氧化能力、对超氧阴离子(O2·)的清除能力、对·OH清除能力以及对DPPH的清除能力分别依次提高73.8％～85.7％、107.6％～112.6％、74.1％～80.6％和29.9％～32.53％；相较于采用蚕蛹蛋白水解专用酶+木瓜蛋白酶酶解，本专利技术的制备方法在总抗氧化能力、对超氧阴离子(O2·)的清除能力、对·OH清除能力以及对DPPH的清除能力方面分别依次提高49.0％～59.2％、50.6％～55.8％、52.7％～58.4％和34.2％～36.8％。具体实施方式本专利技术提供了一种蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备方法，包括如下步骤：1)将蚕蛹粉与石油醚混合，超声脱脂，固液分离，得到的固相进行干燥，得到脱脂蚕蛹粉；2)将所述步骤1)中的脱脂蚕蛹粉、水和蚕蛹蛋白水解酶混合进行酶解，得到蚕蛹粉酶解液；3)将所述步骤2)的蚕蛹粉酶解液灭酶，离心，将得到的上清液采用0.40～0.50μm滤膜过滤，收集滤液；4)将所述步骤3)中的滤液采用3000Da的超滤膜超滤，收集透过液，得到超滤液；5)将所述步骤4)中的超滤液采用200Da的超滤膜超滤，收集截留物；所述截留物为蚕蛹蛋白抗氧化肽。本专利技术将蚕蛹粉与石油醚混合，超声脱脂，固液分离，得到的固相进行干燥，得到脱脂蚕蛹粉。本专利技术中，所述蚕蛹粉的质量与石油醚的体积比优选为1g:6～10mL，更优选为1g:8mL。本专利技术中，所述蚕蛹粉的粒度优选为140～160目，更优选为150目。本专利技术中，所述蚕蛹粉的制备方法优选为将缫丝蚕蛹在40～50℃下干燥120～180min后粉碎、过筛。所述缫丝蚕蛹的干燥温度优选为45℃。所述缫丝蚕蛹的干燥时间优选为150min。本专利技术对所述缫丝蚕蛹的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本专利技术中，所述石油醚的沸程优选为60～90℃。本专利技术对所述石油醚的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本专利技术实施例中采用的石油醚购自成都市科龙化工试剂厂。本专利技术中，所述超声脱脂的次数优选为2～4次，更优选为3次。所述超声的功率优选为100～150W，更优选为120W。所述超声的时间优选为30～50min/次，更优选为40min/次。所述超声的温度优选为35～45℃，更优选为40℃。本专利技术中，得到的固相进行干燥时的温度优选为50～60℃，更优选为55℃。得到的固相进行干燥的时间优选为45～60min，更优选为50min。本专利技术将蚕蛹粉与石油醚混合，超声，有利于脱除蚕蛹粉中的脂肪，防止在后续的水解过程中脂肪影响蛋白质在水溶液中的溶解影响肽的获得，同时还可以防止在后续过程中脂肪发生氧化以及脂肪与蛋白质发生乳化，影响多肽产品品质及蛋白质溶液的分离。将所述固相进行干燥后，本专利技术优选将得到的干燥后的固相进行粉碎。所述粉碎的粒度优选为190～210目，更优选为200目。本专利技术将干燥后的固相进行粉碎可以使固相更均匀，利于后续的酶解。本专利技术对所述超声和干燥采用的设备没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。得到脱脂蚕蛹粉后，本专利技术将所述脱脂蚕蛹粉、水和蚕蛹蛋白水解酶混合进行酶解本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备方法，包括如下步骤：1)将蚕蛹粉与石油醚混合，超声脱脂，固液分离，得到的固相进行干燥，得到脱脂蚕蛹粉；2)将所述步骤1)中的脱脂蚕蛹粉、水和蚕蛹蛋白水解酶混合进行酶解，得到蚕蛹粉酶解液；3)将所述步骤2)的蚕蛹粉酶解液灭酶，离心，将得到的上清液采用0.40～0.50μm滤膜过滤，收集滤液；4)将所述步骤3)中的滤液采用3000Da的超滤膜超滤，收集透过液，得到超滤液；5)将所述步骤4)中的超滤液采用200Da的超滤膜超滤，收集截留物，所述截留物为蚕蛹蛋白抗氧化肽。

【技术特征摘要】
1.一种蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备方法，包括如下步骤：1)将蚕蛹粉与石油醚混合，超声脱脂，固液分离，得到的固相进行干燥，得到脱脂蚕蛹粉；2)将所述步骤1)中的脱脂蚕蛹粉、水和蚕蛹蛋白水解酶混合进行酶解，得到蚕蛹粉酶解液；3)将所述步骤2)的蚕蛹粉酶解液灭酶，离心，将得到的上清液采用0.40～0.50μm滤膜过滤，收集滤液；4)将所述步骤3)中的滤液采用3000Da的超滤膜超滤，收集透过液，得到超滤液；5)将所述步骤4)中的超滤液采用200Da的超滤膜超滤，收集截留物，所述截留物为蚕蛹蛋白抗氧化肽。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中脱脂蚕蛹粉、水和蚕蛹蛋白水解酶的质量比为5～8:95～105:2.5～4；所述蚕蛹蛋白水解酶的比活力为0.5×105～2.0×105U/g。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中酶解的温度为50～60℃，酶解的时间为4～6h。4.根据权利要求1～3任意一项所述的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄先智，丁晓雯，沈以红，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆,50