一种梨不定芽嫁接快速繁育方法技术

本发明专利技术属于梨的繁育技术领域，具体公开了一种梨不定芽嫁接快速繁育方法。该方法选用1～2年生杜梨或豆梨实木苗为砧木，选用秋子梨或黄金梨组织培养继代增殖获得的不定芽为接穗，嫁接前对砧木和接穗进行预处理，然后在大棚或温室中进行嫁接，嫁接方法采用“T”字形芽接，不定芽接穗茎基部斜切，之后将斜切后的不定芽茎基部浸蘸激素混合液，将浸蘸后的不定芽嫁接入砧木茎干的“T”字形切口，对嫁接口封严、套塑料袋处理，之后进行嫁接后管理即可。本发明专利技术提供的梨不定芽嫁接快速繁育方法，在大棚或温室内培育，操作简单，培育期短，成活率高，可有效解决梨不定根再生难的问题，为梨组织培养再生、工厂化育苗和功能基因组学研究提供了技术支撑。

A rapid propagation method for adventitious bud grafting of pear

The invention belongs to the technical field of pear breeding, and specifically discloses a rapid propagation method of pear adventitious bud grafting. The adventitious buds obtained from tissue culture and subculture of Qiuzi pear or Jinjin pear were used as scions. The rootstocks and Scions were pretreated before grafting, and then grafted in greenhouse or greenhouse. The stem base of adventitious buds grafted scions was oblique. After cutting, the base of the adventitious bud stem after oblique cutting is dipped in the hormone mixture, the adventitious bud after dipping is grafted into the \T\ shaped notch of the rootstock stem, and the grafting joint is sealed and covered with plastic bags. After grafting, the management can be carried out. The rapid propagation method of pear adventitious bud grafting provided by the invention has the advantages of simple operation, short incubation period and high survival rate, and can effectively solve the difficult problem of pear adventitious root regeneration, providing technical support for pear tissue culture and regeneration, factory seedling raising and functional genomics research.

【技术实现步骤摘要】
一种梨不定芽嫁接快速繁育方法
本专利技术涉及梨的育苗扩繁
，特别是涉及一种梨不定芽嫁接快速繁育方法。
技术介绍
我国是梨的初生中心之一，栽培历史悠久，现在我国梨产量和面积均是世界第一位，经济地位和社会地位显著。组织培养是整个生命科学的基础，特别是随着脱毒快繁技术和功能基因组学的发展，对组织培养高效再生体系的要求也越来越高。相比其它作物，梨组织培养技术发展较晚，其外植体再生通常分为两个阶段：第一阶段是不定芽的再生，不定芽通过初代培养即可获得，不定芽获得后通过增殖可以获得大量的无性系材料，该阶段再生、增殖问题基本已经解决；第二阶段是不定根的诱导和再生，该阶段相对较难，不定再生根诱导中存在再生率低，再生后根发育或吸收不正常，炼苗后难以成活或成活后生长慢等问题，因此限制了组织培养技术在梨属植物上的广泛应用。所以如何解决不定芽增殖后不定芽根再生难、再生率低和根发育不正常等问题已经成为梨组织培养亟待解决的问题。为解决以上问题，前人进行了大量研究，包括利用激素直接诱导、试管嫁接等，但或者效果不理想，或者操作比较繁琐。例如陈蕾等“梨组织培养及器内嫁接技术的研究”一文，其中主要研究了梨的器内(试管内)嫁接，后期需要经历较长的炼苗期才可以移栽到瓶外，操作繁琐，且嫁接后生长慢。
技术实现思路
本专利技术主要解决的技术问题是提供一种梨不定芽嫁接快速繁育方法，在大棚或温室内培育，操作简单，培育期短，成活率高，平均成活率可达到90％，可有效解决梨不定根再生难的问题，为梨组织培养再生、工厂化育苗和功能基因组学研究提供了技术支撑。为解决上述技术问题，本专利技术采用的一个技术方案是：一种梨不定芽嫁接快速繁育方法，包括以下步骤：S1：砧木和接穗的选取砧木：选用1～2年生杜梨或豆梨实木苗，所述实木苗要求健壮，无病虫害，茎干部位光滑便于嫁接；接穗：选用由秋子梨或黄金梨组织培养继代增殖获得的不定芽，要求不定芽长度为1.5～3.0cm，粗度约0.15cm；S2：砧木和接穗的预处理砧木：嫁接时提前1w对砧木进行浇水，便于离皮并增加树液的流动性；接穗：嫁接前活化处理，所述活化处理为暗培养1w后，光照培养13d；S3：嫁接嫁接在可控温度和湿度的大棚或温室中进行，温度为20～30℃，相对湿度50～80％；嫁接方法采用“T”字形芽接，首先在砧木茎干中上部选择较为光滑的地方，用手术刀开“T”字形切口，要求深达木质部，接着用刀开韧皮部；然后取不定芽接穗，在不定芽茎基部斜切，要求手术刀与不定芽茎夹角为30°，之后将斜切后的不定芽茎基部快速浸蘸激素混合液，所述激素混合液组成为：0.1mg/LIAA+0.5mg/LTDZ；将浸蘸后的不定芽嫁接入砧木茎干的“T”字形切口中，嫁接口用封口膜绑缚封严，然后用塑料袋套在嫁接的不定芽上，并用封口膜绑扎在砧木主干上，以保持嫁接口微环境的湿度，用针在塑料袋上打3～4个小孔用于透气；S4：嫁接后管理嫁接后应保持环境的阴凉湿润，避免阳光照射，定期进行浇水和病虫害防控，20d后进行摘袋，摘袋时首先用剪刀剪开塑料袋顶部进行炼苗，待到接穗增长1～2cm时，摘除塑料袋，正常培养。其中，步骤S1中，由秋子梨组织培养继代增殖获得不定芽时，秋子梨增殖培养基为：NN69+TDZ3.0mg/L+IBA0.3mg/L+蔗糖25g/L+琼脂7g/L，培养基pH值为5.8，增殖环境条件为温度25±1℃，光照3000lx，光照时长16h/d。其中，步骤S1中，由黄金梨组织培养继代增殖获得不定芽时，黄金梨增殖培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.10mg/L+蔗糖25g/L+琼脂7g/L，培养基pH值为5.8，增殖环境条件为温度25±1℃，光照3000lx，光照时长16h/d。优选地，步骤S3中，将浸蘸后的不定芽嫁接入砧木茎干的“T”字形切口中，要求不定芽切面朝外紧贴砧木茎的韧皮部。优选地，步骤S1中，砧木选用1年生杜梨实木苗。优选地，步骤S1中，接穗选用由秋子梨组织培养继代增殖获得的不定芽。优选地，嫁接在冬暖式大棚中进行，温度为20～30℃，相对湿度约80％。影响嫁接成活的主要因素除了接穗和砧木的亲和力外，嫁接的技术也是主要因素。本专利技术提供的梨不定芽嫁接快速繁育方法，主要在于优化了嫁接技术，首先确定了对嫁接成活率影响显著的以下因素：嫁接环境、砧木株龄、接穗木质化程度、不同生长激素以及砧木和接穗预处理方式，然后在研究过程中分别考察了嫁接环境、砧木株龄、接穗木质化程度、不同生长激素以及砧木和接穗预处理方式对嫁接后植株成活率的影响，在此基础上，本专利技术提供的梨不定芽嫁接快速繁育方法，通过在嫁接之前对砧木和接穗进行预处理，即砧木嫁接时提前1w进行浇水，接穗嫁接前活化处理，活化处理为暗培养1w后，光照培养13d，可以促进其分裂和进行半木质化处理，提高了成活率；嫁接在可控温度和湿度的大棚或温室中进行，通过控制合适的温度和湿度，成活率也得到了提高；斜切后的不定芽茎基部快速浸蘸激素混合液，激素混合液组成为：0.1mg/LIAA+0.5mg/LTDZ，能促进形成层的活动，从而促进伤口愈合，最终稳定获得了高的嫁接成活率，平均成活率达90％。本专利技术的有益效果是：本专利技术提供的梨不定芽嫁接快速繁育方法，操作简单，培育期短，成活率高，可有效解决梨不定根再生难的问题，为梨组织培养再生、工厂化育苗和功能基因组学研究提供了技术支撑。附图说明图1是本专利技术以1年生杜梨实木苗为砧木、秋子梨不定芽为接穗，在不同的嫁接环境中得到的嫁接成活率示意图；图2是本专利技术以1年生豆梨实木苗为砧木、秋子梨不定芽为接穗，在不同的嫁接环境中得到的嫁接成活率示意图；图3是本专利技术以1年生杜梨实木苗为砧木、黄金梨不定芽为接穗，在不同的嫁接环境中得到的嫁接成活率示意图；图4是本专利技术以1年生豆梨实木苗为砧木、黄金梨不定芽为接穗，在不同的嫁接环境中得到的嫁接成活率示意图；图5是本专利技术以杜梨实木苗为砧木、秋子梨不定芽为接穗，不同的砧木株龄得到的嫁接成活率示意图；图6是本专利技术以杜梨实木苗为砧木、黄金梨不定芽为接穗，不同的砧木株龄得到的嫁接成活率示意图；图7是本专利技术以杜梨实木苗为砧木、秋子梨不定芽不同木质化程度得到的嫁接成活率示意图；图8是本专利技术以杜梨实木苗为砧木、秋子梨不定芽为接穗，不同预处理得到的嫁接成活率示意图；图9是本专利技术实施例中用手术刀开“T”字形切口的示意图；图10是本专利技术实施例中将不定芽嫁接入“T”字形切口的示意图；图11是本专利技术实施例中用parafilm封口膜绑缚封严嫁接口的示意图；图12是本专利技术实施例中用塑料袋套在嫁接的不定芽上、并用parafilm封口膜绑扎在砧木主干上的示意图；图13是本专利技术实施例培育成功的梨苗照片。具体实施方式下面对本专利技术的技术方案进行详细说明。首先考察了以下因素对嫁接成活率的影响。一、嫁接环境、砧木和接穗对嫁接成活率的影响嫁接分别选择以下3种环境条件：室内(温度20～25℃，相对湿度≈50％)；冬暖式大棚(温度20～30℃，相对湿度≥80％)；田间(温度20～30℃，相对湿度≈65％)。分别在1w(1周)、2w和3w进行成活率统计。结果见图1-图4所示。分别在室内、大棚和田间进行了不定芽嫁接，结果表明嫁接环境条件对嫁接成活率影响较大，田间嫁接成活率较低，与大棚和室内差异极显著，其最本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种梨不定芽嫁接快速繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：砧木和接穗的选取砧木：选用1～2年生杜梨或豆梨实木苗，所述实木苗要求健壮，无病虫害，茎干部位光滑便于嫁接；接穗：选用由秋子梨或黄金梨组织培养继代增殖获得的不定芽，要求不定芽长度为1.5～3.0cm，粗度约0.15cm；S2：砧木和接穗的预处理砧木：嫁接时提前1w对砧木进行浇水；接穗：嫁接前活化处理，所述活化处理为暗培养1w后，光照培养13d；S3：嫁接嫁接在可控温度和湿度的大棚或温室中进行，温度为20～30℃，相对湿度50～80％；嫁接方法采用“T”字形芽接，首先在砧木茎干中上部选择较为光滑的地方，用手术刀开“T”字形切口，要求深达木质部，接着用刀开韧皮部；然后取不定芽接穗，在不定芽茎基部斜切，要求手术刀与不定芽茎夹角为30°，之后将斜切后的不定芽茎基部快速浸蘸激素混合液，所述激素混合液组成为：0.1mg/L IAA+0.5mg/L TDZ；将浸蘸后的不定芽嫁接入砧木茎干的“T”字形切口中，嫁接口用封口膜绑缚封严，然后用塑料袋套在嫁接的不定芽上，并用封口膜绑扎在砧木主干上，以保持嫁接口微环境的湿度，用针在塑料袋上打3～4个小孔用于透气；S4：嫁接后管理嫁接后应保持环境的阴凉湿润，避免阳光照射，定期进行浇水和病虫害防控，20d后进行摘袋，摘袋时首先用剪刀剪开塑料袋顶部进行炼苗，待到接穗增长1～2cm时，摘除塑料袋，正常培养。...

【技术特征摘要】
1.一种梨不定芽嫁接快速繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：砧木和接穗的选取砧木：选用1～2年生杜梨或豆梨实木苗，所述实木苗要求健壮，无病虫害，茎干部位光滑便于嫁接；接穗：选用由秋子梨或黄金梨组织培养继代增殖获得的不定芽，要求不定芽长度为1.5～3.0cm，粗度约0.15cm；S2：砧木和接穗的预处理砧木：嫁接时提前1w对砧木进行浇水；接穗：嫁接前活化处理，所述活化处理为暗培养1w后，光照培养13d；S3：嫁接嫁接在可控温度和湿度的大棚或温室中进行，温度为20～30℃，相对湿度50～80％；嫁接方法采用“T”字形芽接，首先在砧木茎干中上部选择较为光滑的地方，用手术刀开“T”字形切口，要求深达木质部，接着用刀开韧皮部；然后取不定芽接穗，在不定芽茎基部斜切，要求手术刀与不定芽茎夹角为30°，之后将斜切后的不定芽茎基部快速浸蘸激素混合液，所述激素混合液组成为：0.1mg/LIAA+0.5mg/LTDZ；将浸蘸后的不定芽嫁接入砧木茎干的“T”字形切口中，嫁接口用封口膜绑缚封严，然后用塑料袋套在嫁接的不定芽上，并用封口膜绑扎在砧木主干上，以保持嫁接口微环境的湿度，用针在塑料袋上打3～4个小孔用于透气；S4：嫁接后管理嫁接后应保持环境的阴凉湿润，避免阳光照射，定期进行浇水和病虫害防控，20d后进行摘袋，摘袋时首先用剪刀剪开塑料袋顶部进行炼苗，待到接穗...

【专利技术属性】
技术研发人员：李鼎立，吴礽超，李晓宁，王然，马春晖，王彩虹，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：山东,37