The present invention discloses a coding gene of DNA enzyme of Trichogramma brevis, whose nucleotide sequence is shown as SEQ ID NO:1 or SEQ ID NO:2, integrates the coding gene of DNA enzyme of Trichogramma brevis into the expression system of yeast genomic DNA, and obtains the DNA enzyme of Trichogramma brevis by high-density fermentation and ethanol induction. Columns are shown as SEQ ID NO:3 or SEQ ID NO:4. The DNA enzyme of Trichogramma brevis has strong DNA degrading activity, and is successfully applied to remove trace DNA contamination in PCR or qRT_PCR reaction system, and improves the accuracy of pathogenic bacteria nucleic acid detection kit.
【技术实现步骤摘要】
一种短管赤眼蜂DNA酶及其制备方法与应用
本专利技术属于生物工程
,具体是一种短管赤眼蜂DNA酶及其制备方法与应用。
技术介绍
DNA酶广泛存在于多种哺乳动物、虾类、昆虫和植物中,对于个体的发育、细胞正常的老化凋亡、以及防御系统的构建具有重要的生物学功能。DNA酶是一种多功能核酸内切酶,可以以非特异性的方式切割DNA,作用于两个脱氧核糖核苷酸之间的3',5'-磷酸二酯键,将DNA链切割开并将其降解成单个核苷酸或寡聚核苷酸。其中研究最多的是哺乳动物和人类的DNA酶,例如来源于牛胰腺的DNaseI被广泛应用于生物学研究和医学分子检测试剂盒,而来源于人的重组DNaseI还被应用于一些疾病的治疗,例如囊肿性纤维化(cysticfibrosis,CF)、肺不张和复杂性肺炎伴胸腔积液和脓胸等。在科学研究和分子临床诊断中,DNA酶是一个功能强大的工具,可用于一系列的分子生物学应用,包括:反转录PCR(RT-PCR,包括荧光定量法和传统的凝胶成像法)去除模板中DNA污染造成的假阳性,组织和细胞RNA提取后基因组DNA污染的去除,核酸法检测病毒和致病菌时模板中DNA污染的去除 ...
【技术保护点】
1.一种短管赤眼蜂DNA酶,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4所示。
【技术特征摘要】
1.一种短管赤眼蜂DNA酶,其特征在于,其氨基酸序列如SEQIDNO:3或SEQIDNO:4所示。2.根据权利要求1所述的一种短管赤眼蜂DNA酶,其特征在于,所述短管赤眼蜂DNA酶的活性高度依赖于二价镁离子,加入高于镁离子浓度的螯合剂EDTA后可有效抑制其酶活。3.一种重组载体,其特征在于,在质粒pPic9K上插入了含有权利要求2所述的短管赤眼蜂DNA酶的编码基因。4.一种重组细胞,其特征在于,将权利要求3所述的重组载体转化入宿主细胞中获得。5.一种权利要求1所述的短...
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