一种产多糖、腺苷和虫草素的融合菌株制造技术

本发明专利技术公开了一种产多糖、腺苷和虫草素的融合菌株。本发明专利技术公开的融合菌株为将蛹虫草菌与羊肚菌进行融合筛选得到融合菌株，得到的融合菌株具有以下特征：与蛹虫草菌和羊肚菌相比，融合菌株的生物量均增加，融合菌株的产物种类和产物产量也均增加；其中，产物种类体现在组成多糖的单糖种类、腺苷和虫草素上，该多糖的组成包括葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖。本发明专利技术得到的融合菌株，丰富了珍稀药食同源真菌的活性成分，实现了一菌多效以及蛹虫草资源和羊肚菌资源生物活性物质有效补充，从而生理活性成分多优并举，生理活性功能多效叠加的目的，具有极高的现实意义与应用价值。

A fusion strain producing polysaccharides, adenosine and cordycepin

The invention discloses a fusion strain producing polysaccharide, adenosine and cordycepin. The fusion strain disclosed in the invention is a fusion strain of Cordyceps militaris and Morchella, and the obtained fusion strain has the following characteristics: compared with Cordyceps militaris and Morchella militaris, the biomass of the fusion strain is increased, and the species and product yield of the fusion strain are also increased; among them, the product types are embodied; The polysaccharides consist of glucose, mannose, galactose, xylose and arabinose on the monosaccharide species, adenosine and cordycepin. The fusion strain obtained by the invention enriches the active ingredients of rare medicinal and food homologous fungi, realizes the effective supplement of one fungus with multi-effects and the bioactive substances of Cordyceps militaris and Morchella resources, thus the purpose of multi-excellent physiological active ingredients and multi-effect superposition of physiological active functions has extremely high practical significance and application value. Value.

【技术实现步骤摘要】
一种产多糖、腺苷和虫草素的融合菌株
本专利技术涉及生物
中，一种产多糖、腺苷和虫草素的融合菌株。
技术介绍
自然界中能够感染杀虫的子囊菌类真菌已被鉴定的达1500多种，统称为广义虫草菌，这些真菌在昆虫种群的自然调控中发挥着重要作用。而其中最具有代表性的冬虫夏草、蛹虫草和蝉花等为代表的虫草菌有悠久的食药用历史。蛹虫草(Cordycepsmilitaris)，又名北冬虫夏草，属于真菌界，分类学上属于真菌门，子囊菌亚门，核菌纲，球壳菌目，麦角菌科，虫草属。蛹虫草分布广、生长快、易培养、含有多种活性成分，对人体具有多种生理功能。近年来，科学工作者们在蛹虫草活性物质的生物合成途径、无性型的生物学特征、人工栽培、液体深层发酵培养、培养基组成、培养条件优化、菌丝体及代谢产物的化学成分检测、分离、提取、纯化及其功能、优良菌株选育、功能性食品研制、保健药物开发等方面进行了大量的研究，取得了许多可喜的成果。大量研究已检测或分离到蛹虫草含有的多类活性成分，如虫草素、腺苷、虫草酸(D-甘露醇)、虫草多糖、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)、麦角甾醇等，其对促进机体新陈代谢，提高机体免疫功能等具有积极意义。此外，蛹虫草还含有丰富的蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸、维生素及微量元素等成分。2009年原卫生部批准蛹虫草为新资源食品，认定其作为新保健食品，为冬虫夏草的良好替代品。2014年国家卫生计生委批准蛹虫草作为新食品原料，取消了对蛹虫草的食用量及使用范围等限制，更进一步体现了蛹虫草作为健康食品的安全性和可行性。随着现代技术的发展，采用液体深层发酵工程技术既可以快速生产蛹虫草菌丝体，也可以获得发酵液，同时还可以改进工艺参数，优化培养条件，富集目的生理活性物质，提高生物活性物质的含量，为大规模开发新型健康食品提供便利。羊肚菌同样作为世界著名的野生食(药)用菌,因其表面有蜂窝状的可孕头部,外观极似羊肚而得名。羊肚菌肉质脆嫩鲜美、营养和药用价值均极高,故在食品、医药、保健、化妆品等领域显示出极大的开发潜力。羊肚菌(Morchellaesculenta),俗称羊肚蘑、羊肚菜、阳雀菌等,属子囊菌亚门(Ascomycotina),盘菌目(Pezizales),羊肚菌科(Morchellaceae),羊肚菌属(Morchella)。羊肚菌营养丰富,其氨基酸含量为各食用菌之首。羊肚菌多糖是其最主要生理活性成分之一,具有增强肌体免疫力、促进副肾皮激素的分泌、降低胆固醇、预防动脉硬化、抗疲劳、抗病毒、抑制肌癌-180等诸多作用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何有效提高真菌活性产物的种类及真菌菌丝体产量。为解决上述技术问题，本专利技术首先提供了一株融合菌株，所述融合菌株为将蛹虫草菌与羊肚菌进行细胞融合得到的菌株；与所述蛹虫草菌和所述羊肚菌相比，所述融合菌株的生物量均增加。上述融合菌株具体可为将所述蛹虫草菌和所述羊肚菌的原生质体进行融合得到的菌株。所述生物量可为菌丝体的生物量。上述融合菌株中，与所述蛹虫草菌和所述羊肚菌相比，所述融合菌株的产物种类和/或产物产量均可增加。上述融合菌株中，所述融合菌株产物种类的增加可体现在下述A1)和/或A2)上：A1)与所述蛹虫草菌和所述羊肚菌相比，所述融合菌株合成的多糖的组分均增加；A2)与所述羊肚菌相比，所述融合菌株能合成腺苷和/或虫草素。所述融合菌株合成的多糖的组分增加具体可表现在所述融合菌株的多糖中含有所述蛹虫草菌的多糖中所不含有的木糖和阿拉伯糖，还含有所述羊肚菌的多糖中所不含有的半乳糖。上述融合菌株中，所述融合菌株产物产量增加可体现在下述B1)和/或B2)上：B1)与所述蛹虫草菌相比，所述融合菌株的多糖产量和/或虫草素产量增加；B2)与所述羊肚菌相比，所述融合菌株的多糖产量增加。上述融合菌株中，所述多糖可为由如下单糖中的至少两种组成的多糖：葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖。上述融合菌株中，所述蛹虫草菌可为中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCCNO:M2016220的菌株。上述融合菌株中，所述羊肚菌可为羊肚菌CICC14033。上述融合菌株可为融合菌株FJR1181，将融合菌株FJR1181命名为蛹虫草FJR1181(CordycepsmilitarisFJR1181)，所述蛹虫草FJR1181在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCCNO:M2017824。为解决上述技术问题，本专利技术还提供了一种菌剂，所述菌剂的活性成分可为所述融合菌株。为解决上述技术问题，本专利技术还提供了所述融合菌株的培养方法，所述方法包括：将所述融合菌株在种子培养基或发酵培养基中进行培养，完成所述融合菌株的培养；所述种子培养基由溶剂和溶质组成；所述溶剂为水；所述溶质及其浓度分别为：白糖40.0g/L、蛋白胨10.0g/L、酵母粉5.0g/L、玉米淀粉20.0g/L、硫酸镁0.5g/L、磷酸二氢钾1.0g/L、磷酸氢二钾0.75/L、VB10.05g/L、VB20.02g/L、氨基酸营养母液5ml/L和微量元素母液10ml/L，pH为6.3；所述氨基酸营养母液由溶剂和溶质组成；所述溶剂为水；所述溶质及其浓度分别为：甘氨酸0.6g/L、苏氨酸0.5g/L、缬氨酸0.3g/L、亮氨酸0.1g/L、异亮氨酸0.2g/L、苯丙氨酸0.5g/L、丝氨酸0.2g/L、脯氨酸0.1g/L、羟脯氨酸0.06g/L、半胱氨酸0.04/L、色氨酸0.05g/L、甲硫氨酸0.1g/L、赖氨酸0.2g/L和谷氨酸0.1g/L；所述微量元素母液由溶剂和溶质组成；所述溶剂为水；所述溶质及其浓度分别为：硫酸亚铁16.5mg/L，氯化钙16.5mg/L，硫酸铜0.3mg/L，硫酸锌3.5mg/L；所述发酵培养基由溶剂和溶质组成，所述溶剂为水，所述溶质及其浓度分别为：葡萄糖8g/100mL，蛋白胨0.5g/100mL，酵母粉1.0g/100mL，黄豆粉2.0g/100mL，玉米粉5.5g/100mL，小麦粉0.5g/100mL，硫酸胺0.5g/100mL，磷酸二氢钾0.75g/100mL，磷酸氢二钾0.25g/100mL，硫酸镁0.3g/100mL，所述氨基酸营养母液0.5ml/100ml，所述微量元素母液10ml/100ml，维生素B12mg/100ml，维生素B21mg/100ml，维生素B61mg/100ml，pH为6.8。上述融合菌株中，所述白糖具体可为白砂糖，所述白砂糖具体可为苏州欧扬化工科技有限公司产品。所述种子培养基和所述发酵培养基均可为无菌培养基。所述黄豆粉具体可为黄豆去皮后磨制而成的粉末。所述玉米粉具体可为玉米去皮后磨制而成的粉末。所述小麦粉具体可为小麦去皮后磨制而成的粉末。为解决上述技术问题，本专利技术还提供了多糖、腺苷或虫草素的制备方法，所述方法包括：培养所述融合菌株，得到菌株培养液，从所述菌株培养液中提取得到多糖、腺苷或虫草素。上述方法中，所述多糖可为由如下单糖中的至少两种组成的多糖：葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖。为解决上述技术问题，本专利技术还提供了所述菌剂或所述融合菌株的培养方法在制备多糖、腺苷和/或虫草素中的应用。上述应用中，所述多糖可为由如下单糖中的至少两种组成的多糖：葡萄糖、甘露糖本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.融合菌株，其特征在于：所述融合菌株为将蛹虫草菌与羊肚菌进行融合得到的菌株；与所述蛹虫草菌和所述羊肚菌相比，所述融合菌株的生物量均增加。

【技术特征摘要】
1.融合菌株，其特征在于：所述融合菌株为将蛹虫草菌与羊肚菌进行融合得到的菌株；与所述蛹虫草菌和所述羊肚菌相比，所述融合菌株的生物量均增加。2.根据权利要求1所述的融合菌株，其特征在于：与所述蛹虫草菌和所述羊肚菌相比，所述融合菌株的产物种类和/或产物产量均增加。3.根据权利要求2所述的融合菌株，其特征在于：所述融合菌株产物种类的增加体现在下述A1)和/或A2)上：A1)与所述蛹虫草菌和所述羊肚菌相比，所述融合菌株合成的多糖的组分均增加；A2)与所述羊肚菌相比，所述融合菌株能合成腺苷和/或虫草素。4.根据权利要求2或3所述的融合菌株，其特征在于：所述融合菌株产物产量增加体现在下述B1)和/或B2)上：B1)与所述蛹虫草菌相比，所述融合菌株的多糖产量和/或虫草素产量增加；B2)与所述羊肚菌相比，所述融合菌株的多糖产量增加。5.根据权利要求1-4中任一所述的融合菌株，其特征在于：所述蛹虫草菌为中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCCNO:M2016220的菌株；和/或，所述羊肚菌为羊肚菌CICC14033。6.根据权利要求1-5中任一所述的融合菌株，其特征在于：所述融合菌株为融合菌株FJR1181，将所述融合菌株FJR1181命名为蛹虫草FJR1181(CordycepsmilitarisFJR1181)，所述蛹虫草FJR1181在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCCNO:M2017824。7.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂的活性成分为权利要求1-6中任一所述的融合菌株。8.权利要求1-6中任一所述融合菌株的培养方法，包括：将所述融合菌株在种子培养基或发酵培养基中进行培养，完成所述融合菌株的培养；所述种子培养基由溶剂和溶质组成；所述溶剂为水；所述溶质及其浓度分别为：白糖40.0g/L、蛋白胨10.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄钦耿，黄建忠，梁玲，骆梅香，翁雪清，陈瑞琛，吴松刚，
申请(专利权)人：福建师范大学，厦门元尊生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35