一种原发性多发性骨髓瘤小鼠模型构建方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种原发性多发性骨髓瘤(MM)小鼠模型的构建方法及其应用，所述方法为：从MM病人样本的测序结果中，筛选高频突变的原癌基因作为驱动基因，构建逆转录病毒载体并体外感染小鼠IgM阳性B细胞，在小鼠体内诱导转化为MM模型。筛选了10个人原癌基因组合，确定cMYC和KRAS12V为最佳。所述模型用于人MM发病机制研究、MM的化学药物筛选、改进现有治疗方案、新药或者靶向药物联用的评估以及用于细胞免疫治疗和抗体治疗的评估。本发明专利技术构建的MM原发模型，对于科学研究MM发生发展的分子机制以及探索治疗MM新靶点均具有重要意义。本发明专利技术的动物模型成模快速、100％成瘤，为开拓MM以生物治疗为基础的新靶点鉴定和新治疗方法评估提供理论依据和评价系统。

Construction method and application of a mouse model of primary multiple myeloma

The invention discloses a method for constructing a mouse model of primary multiple myeloma (MM) and its application. The method comprises screening high-frequency mutant proto-oncogenes as driving genes from the sequencing results of MM patient samples, constructing retroviral vectors and infecting mouse IgM-positive B cells in vitro, and inducing transfection in mice in vivo. Turn it into MM model. The combination of 10 proto oncogenes was screened, and cMYC and KRAS12V were the best. The models are used for the pathogenesis of human MM, the screening of MM chemicals, the improvement of existing therapeutic regimens, the evaluation of new or targeted drug combinations, and the evaluation of cellular immunotherapy and antibody therapy. The primary model of MM constructed by the present invention is of great significance for studying the molecular mechanism of the occurrence and development of MM and exploring new targets for the treatment of MM. The animal model of the invention can model rapidly and 100% tumorigenesis, and provides a theoretical basis and evaluation system for exploring new target identification and new treatment method evaluation based on biological therapy of MM.

【技术实现步骤摘要】
一种原发性多发性骨髓瘤小鼠模型构建方法及其应用
本专利技术涉及多发性骨髓瘤研究
，具体是涉及一种原发性多发性骨髓瘤小鼠模型构建方法及其应用。
技术介绍
多发性骨髓瘤(MultipleMyeloma,MM)是一种恶性浆细胞病，其肿瘤细胞起源于骨髓中的浆细胞，而浆细胞是B淋巴细胞发育到终末阶段的细胞。在中国其发病率估计为2～3/10万，男女比例为1.6:1，大多患者年龄>50岁。目前WHO将其归为B细胞淋巴瘤的一种，称为浆细胞骨髓瘤/浆细胞瘤。其特征为骨髓浆细胞异常增生伴有单克隆免疫球蛋白或轻链(M蛋白)过度生成，极少数患者可以是不产生M蛋白的未分泌型MM。多发性骨髓瘤常伴有多发性溶骨性损害、高钙血症、贫血、肾脏损害。由于多发性骨髓瘤是一种高度异质性的疾病，现有的药物和治疗手段又不能够治愈该疾病。因此，通过疾病的动物模型研究鉴定新的治疗靶点或评价最新的治疗手段(CAR-T细胞治疗)，对于治疗MM有着重要的临床意义。现有多发性骨髓瘤小鼠模型及其优缺点：(1)免疫缺陷鼠MM移植瘤模型：是将MM肿瘤细胞或病人组织细胞注射到小鼠体内或皮下，因其肿瘤形成速度快、劳动力要求小、成本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种原发性多发性骨髓瘤小鼠模型构建方法，其特征在于：从多发性骨髓瘤病人的病理组织样本或单细胞测序结果中，筛选人原癌基因作为驱动基因，并构建逆转录病毒载体，诱导小鼠原代细胞在小鼠体内转化为多发性骨髓瘤原发模型。

【技术特征摘要】
1.一种原发性多发性骨髓瘤小鼠模型构建方法，其特征在于：从多发性骨髓瘤病人的病理组织样本或单细胞测序结果中，筛选人原癌基因作为驱动基因，并构建逆转录病毒载体，诱导小鼠原代细胞在小鼠体内转化为多发性骨髓瘤原发模型。2.根据权利要求1所述的一种原发性多发性骨髓瘤小鼠模型构建方法，其特征在于：所述的人原癌基因组合包括cMYC与CCND1,FGFR3,C-MAF,MAFB,XBP1S,AKT1,BCL-XL,BCL2,HRAS12V,KRAS12V这10个原癌基因的不同组合。3.根据权利要求2所述的一种原发性多发性骨髓瘤小鼠模型构建方法，其特征在于：所述的KRAS12V是利用点突变技术让KRAS的第12位氨基酸突变成缬氨酸。4.根据权利要求1所述的一种原发性多发性骨髓瘤小鼠模型构建方法，其特征在于：所述的诱导小鼠原代细胞在小鼠体内转化为多发性骨髓瘤细胞的具体方法为：(1)收集纯化供体鼠脾内IgM阳性淋巴细胞；(2)利用化学诱导剂刺激分化IgM...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡以国，潘聪，
申请(专利权)人：贵州康钦承平生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州,52