一种砂质植物组织培养基及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种砂质植物组织培养基及其制备方法与应用。砂质植物组织培养基由河砂、营养液、植物生长调节剂、抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮和杀菌剂组成，以1L计，营养液10~200ml/L，植物生长调节剂6‑BA、NAA、IBA、IAA等各0.01~10.0ml/L、抗坏血酸0.1~5.0g/L，聚乙烯吡咯烷酮1~5g/L，杀菌剂3~15g/L，其余为河砂；所述的营养液包括MS营养液、蔗糖、Zt、6‑BA和NAA。制备方法包括前处理、培养基配制和配制后的处理等步骤，应用为所述的砂质植物组织培养基可以在培养藤本植物、草本植物和木本植物的组织培养中的广泛应用。本发明专利技术是利用细净的河沙作为固体介质，替代琼脂，可降低培养基的成本，河沙循环多次利用，且不需要精确地调节植物组织培养基中营养液、植物生长激素和植物有机营养液的酸碱度。

A sand plant tissue culture medium and its preparation method and Application

The invention discloses a sand plant tissue culture medium and a preparation method and application thereof. Sandy plant tissue culture medium consists of river sand, nutrient solution, plant growth regulator, ascorbic acid, polyvinylpyrrolidone and bactericide. The nutrient solution is 10-200 ml/L, plant growth regulator 6 BA, NAA, IBA, IAA and other 0.01-10.0 ml/L, ascorbic acid 0.1-5.0 g/L, polyvinylpyrrolidone 1-5 g/L, bactericide 3-1. 5g/L, the rest is river sand; the nutrient solution includes MS nutrient solution, sucrose, Zt, 6 BA and NAA. The preparation method includes the steps of pretreatment, preparation of medium and treatment after preparation. The sandy plant tissue culture medium can be widely used in tissue culture of vines, herbs and woody plants. The invention uses fine river sand as solid medium instead of agar, which can reduce the cost of culture medium, recycle river sand for many times, and does not need to accurately adjust the acidity and alkalinity of nutrient solution, plant growth hormone and plant organic nutrient solution in plant tissue culture medium.

【技术实现步骤摘要】
一种砂质植物组织培养基及其制备方法与应用
本专利技术属于栽培
，进一步属于植物组织培养、植物组织快速繁殖和现代无土栽培
，具体涉及一种砂质植物组织培养基及其制备方法与应用。
技术介绍
在植物组织培养中，培养基主要有固体、液体和半固体培养基三种。其中：液体培养基为液态，用各种营养成分加水配成，或用天然物质的浸汁(麦芽汁、豆芽汁等)制成；固体培养基呈固态，是在液体培养基中加入琼脂作为固体培养基质；半固体培养基呈稀糊状，是在液体培养基中加入0.2～0.5%琼脂制成。但是针对固体培养基制作和应用中，在配制固体培养基时需要加入适量的琼脂，而琼脂等凝固剂的成本高，也不能循环多次利用，并且在配制固体培养基的过程中，加入各种植物营养液、植物生长调节剂、糖类、植物有机营养液之后，固体培养基本身容易霉变；同时，在配制固体培养基时，需要对琼脂（该琼脂无法循环多次利用）、大量元素营养液、微量元素营养液、糖液、有机添加物质和激素等培养液的酸碱度用酸液或碱液进行精确调节，如果固体培养基液的酸碱度调控不准，容易导致固体培养基消毒灭菌冷却之后过硬或太软，不利于植物组织培养，甚至导致组织培养失败。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种砂质植物组织培养基；第二目的在于提供所述的砂质植物组织培养基的制备方法；第三目的在于提供所述的砂质植物组织培养基的应用。本专利技术的第一目的是这样实现的，所述的砂质植物组织培养基有河砂、植物生长调节剂、营养液、抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮和杀菌剂组成，以1L计，营养液10~200ml/L，蔗糖10~30g/L，植物生长调节剂0.04~40ml/L，抗坏血酸0.1~5.0g/L，聚乙烯吡咯烷酮1~5g/L，杀菌剂1~15g/L，其余为河砂。本专利技术的第二目的是这样实现的，包括河砂前处理、砂质培养基配制和配制后处理步骤，具体包括：A、河砂前处理：将河砂经清水洗净，去除泥土和杂物，晒干或晾干，过10~50目筛得到细净河砂备用；B、砂质培养基配制：按原料配方配比将植物生长调节剂、营养液、抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮和杀菌剂加入到A步骤处理后的细净河砂中，混合均匀得到目标物砂质植物组织培养基；C、配制后处理：将目标物砂质植物组织培养基分装于培养瓶中，盖紧瓶盖后灭菌备用。本专利技术的第三目的是这样实现的，所述的砂质植物组织培养基在制备藤本植物、草本植物和木本植物组织培养基中的应用。所述的藤本植物包括葡萄、猕猴桃等藤本植物的外植体接种、丛生芽诱导、不定根诱导培养。所述的草本植物包括重楼、白芨、草莓、紫丹参、铁皮石斛、大花蕙兰、蝴蝶兰、菊花等草本植物的外植体接种、丛生芽诱导、不定根诱导培养。所述的木本植物包括蓝莓、杜鹃、山茶、油茶、构树等的外植体接种、丛生芽诱导、不定根诱导培养。本专利技术利用细净、干燥的河砂与植物组织培养营养液、植物生长调节剂、抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮及杀菌剂组成，制作成新型固体砂质培养基。在本专利技术中，利用细净、干燥的河砂代替琼脂制作固体培养基介质，不仅可以减少琼脂等凝固剂的成本，河砂还可以循环多次利用，而且用细净河砂代替琼脂作固体介质中，加入各种植物营养液、植物生长调节剂、糖类、植物有机营养液之后，能供给植物组织培养材料正常生长所需要的各种养分、也不需要用酸液或碱液进行精确调节培养基的酸碱度，还可以避免固体培养基消毒灭菌冷却之后过硬或太软不利于植物组织培养的限制，而且利用河沙的颗粒状结构来增强基质的透气性，达到植物组织培养中固定、保湿、透气的目的，满足植物的组织培养过程中水分、养分、激素和透气等功能，更有利于植物的植物组织培养、植物组培快速繁殖和现代无土栽培。本专利技术主要针对传统的植物组织培养中，在配制固体培养基时需要加入适量的琼脂，加入糖类、植物有机营养液之后，固体培养基本身容易霉变，在配制固体培养基时，需要对琼脂、大量元素营养液、微量元素营养液、糖液、有机添加物质和激素等培养液的酸碱度用酸液或碱液进行精确调节，如果固体培养基液的酸碱度调控不准，容易导致固体培养基消毒灭菌冷却之后过硬或过软，不利于植物组织培养或导致组织培养失败等诸多问题。本专利技术是利用细净的河沙作为固体介质，替代琼脂，不仅可以降低成本，而且利用河沙来吸附植物组织培养的营养液、植物生长激素和植物有机营养液，同时，在配制固体培养基时不需要很精确地调节营养液、植物生长激素和植物有机营养液的酸碱度，培养基就以提供植物组织培养的支撑固体介质、养分溶液和有机成分，供给植物组织培养材料的正常生长，并且同时利用河沙的颗粒状结构来增强基质的透气性，达到植物组织培养中固定、保湿、透气的目的，满足植物的组织培养过程中水分、养分、激素和透气等功能，因此，本专利技术所述的砂质植物组织培养基更有利于植物的组织培养，目前，专利技术人已经在铁皮石斛、白芨、马蹄莲、大花蕙兰等植物的组织培养过程中进行了广泛的验证，具有传统固体琼脂培养基无法替代的效果。本专利技术适用于植物组织培养、植物组培快速繁殖和现代无土栽培的全部环节，不仅可以用于外植体接种培养、丛生芽诱导，而且适用于植物组织培养中的生根培养全过程。附图说明图1为本专利技术砂质植物组织培养基用于铁皮石斛培养的示意图；图2为本专利技术砂质植物组织培养基用于大花蕙兰培养的示意图；图3为本专利技术砂质植物组织培养基用于马蹄莲培养的示意图；图4为本专利技术砂质植物组织培养基用于大花卉兰不定根诱导示意图；图5为本专利技术砂质植物组织培养基用于草莓不定根诱导示意图；图6为本专利技术砂质植物组织培养基用于紫丹参不定根诱导示意图；图7为本专利技术砂质植物组织培养基用于白芨丛不定根诱导示意图；图8为本专利技术砂质植物组织培养基用于菊花组培快繁示意图。具体实施方式下面结合实施例和附图对本专利技术作进一步的说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变换或替换，均属于本专利技术的保护范围。本专利技术所述的砂质植物组织培养基有河砂、植物生长调节剂、营养液、抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮和杀菌剂组成，以1L计，营养液10~200ml/L，蔗糖10~30g/L，植物生长调节剂0.04~40ml/L，抗坏血酸0.1~5.0g/L，聚乙烯吡咯烷酮1~5g/L，杀菌剂1~15g/L，其余为河砂。所述的植物生长调节剂为6-BA、NAA、IBA、IAA、Zt和Kt。所述的植物生长调节剂中6-BA为0.0~10.0mg/L，NAA为0.0~10.0mg/L、IBA为0.01~10.0mg/L，IAA为0.01~10.0mg/L，Zt为1~5mg/L，Kt为1~5mg/L。所述的杀菌剂为百菌清、多菌灵、甲基托布津、敌克松、五氯硝基苯、粉锈宁、恶霉灵、苯菌灵和噻菌灵中的一种或几种。所述的杀菌剂为百菌清和多菌灵。所述的杀菌剂中百菌清为1~15g/L，多菌灵为1~15g/L。本专利技术所述的砂质植物组织培养基的制备方法，包括河砂前处理、砂质培养基配制和配制后处理步骤，具体包括：A、河砂前处理：将河砂经清水洗净，去除泥土和杂物，晒干或晾干，过10~50目筛得到细净河砂备用；B、砂质培养基配制：按原料配方配比将植物生长调节剂、营养液、抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮和杀菌剂加入到A步骤处理后的细净河砂中，混合均匀得到目标物砂质植物组织培养基；C、配制后处理：将目标物砂质植物组织培养基分装于培养瓶中，盖紧瓶盖后灭菌备用。A步本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种砂质植物组织培养基，其特征在于所述的砂质植物组织培养基有河砂、植物生长调节剂、营养液、抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮和杀菌剂组成，以1L计，营养液10~200ml/L，蔗糖10~30g/L，植物生长调节剂0.04~40ml/L，抗坏血酸0.1~5.0g/L，聚乙烯吡咯烷酮1~5g/L，杀菌剂1~15g/L，其余为河砂。

【技术特征摘要】
1.一种砂质植物组织培养基，其特征在于所述的砂质植物组织培养基有河砂、植物生长调节剂、营养液、抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮和杀菌剂组成，以1L计，营养液10~200ml/L，蔗糖10~30g/L，植物生长调节剂0.04~40ml/L，抗坏血酸0.1~5.0g/L，聚乙烯吡咯烷酮1~5g/L，杀菌剂1~15g/L，其余为河砂。2.根据权利要求1所述的砂质植物组织培养基，其特征在于所述的植物生长调节剂为6-BA、NAA、IBA、IAA、Zt和Kt。3.根据权利要求2所述的砂质植物组织培养基，其特征在于所述的植物生长调节剂中6-BA为0.0~10.0mg/L，NAA为0.0~10.0mg/L、IBA为0.01~10.0mg/L，IAA为0.01~10.0mg/L，Zt为1~5mg/L，Kt为1~5mg/L。4.根据权利要求1所述的砂质植物组织培养基，其特征在于所述的杀菌剂为百菌清、多菌灵、甲基托布津、敌克松、五氯硝基苯、粉锈宁、恶霉灵、苯菌灵和噻菌灵中的一种或几种。5.根据权利要求1或4所述的砂质植物组织培养基，其特征在于所述的杀菌剂为百菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：李国树，徐成东，
申请(专利权)人：楚雄师范学院，
类型：发明
国别省市：云南,53