利用离子液体从苹果花中提取根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用离子液体从苹果花中提取根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的方法，其将干燥的苹果花粉末与萃取剂混合后于室温进行超声萃取，超声萃取结束后，离心，取上清液即得；所述萃取剂由离子液体与甲醇混合组成。验证试验中根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的总含量为145.4 mg/g。与传统的提取方法相比，加入离子液体后苹果花中根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的总提取率可达25.4%。结果表明，本发明专利技术采用离子液体结合响应曲面法筛选最佳提取工艺，且苹果花甲醇提取液对酪氨酸酶具有一定的激活作用，而甲醇离子液体提取液对酪氨酸酶具有一定的抑制作用。对苹果花的能源开发及利用提供了科学依据。

Extraction of rutin, astragaloside and aconiflorin from apple flower by ionic liquid

The invention relates to a method for extracting phloridzin, astragaloside and afferulin from apple flower by using ionic liquid. The dried apple flower powder is mixed with extractant for ultrasonic extraction at room temperature. After ultrasonic extraction, the supernatant is centrifuged and obtained; the extractant is composed of ionic liquid and methanol. . The total content of paeoniflorin, astragalin and alfagin was 145.4 mg/g in the validation test. Compared with the traditional extraction method, the total extraction rate of phloridzin, astragaloside and aflatoxin in apple flower could reach 25.4%. The results showed that the ionic liquid combined with response surface methodology was used to select the best extraction process, and the methanol extract of apple flower had certain activation effect on tyrosinase, while the methanol ionic liquid extract had certain inhibition effect on tyrosinase. It provides a scientific basis for apple flower's energy development and utilization.

【技术实现步骤摘要】
利用离子液体从苹果花中提取根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的方法
本专利技术属于医药或/和保健品
，具体涉及一种利用离子液体结合响应曲面法从苹果花中提取根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的方法。
技术介绍
苹果花为蔷薇科苹果属植物苹果MaluspumilaMill的干燥花。苹果花的化学成分主要有二氢查耳酮类如根皮苷、根皮素，以及其它黄酮类成分如槲皮素、山柰素、芦丁等。苹果花茶具有补血，疏解神经痛、肝斑，明目，治疗黑斑、面疱、粉刺，养颜美容，帮助消化，保肝活血等功效。药理学研究表明：黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、镇痛、调节免疫、抗衰老、降血脂、抗肿瘤等药理作用。此外还有文献报道，有的黄酮类化合物可抑制黑色素的合成，可用来治疗黄褐斑等色素沉着相关疾病；有的黄酮类化合物可刺激黑色素合成，用于治疗白癜风等色素脱失病。离子液体(ionicliquid，IL)是一种新型的绿色有机溶剂，又称室温熔盐，由特定的、体积相对较大的、结构不对称的有机阳离子和体积相对较小的无机阴离子组成，具有良好的热稳定性和化学稳定性、粘度范围宽、可调节性和溶解性好等特点。不仅减少了对环境的污染，还能破坏纤维素的结构，从而促进有效成分的溶出，继而提高了提取率。近年来，有文献报道，离子液体应用于中药活性化合物的提取，未见离子液体对苹果花中黄酮类成分萃取研究的报道。因此，本专利技术采用离子液体-超声波辅助萃取-高效液相色谱法，应用Design-Expert8.06统计分析软件，设计Box-Benhnken5因素3水平的中心组合实验，利用HPLC法同时对苹果花中的根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷3种成分进行含量测定，筛取最佳的提取工艺，并对其进行了酪氨酸酶的活性研究。
技术实现思路
本专利技术目的在于克服现有技术缺陷，提供一种利用离子液体从苹果花中优化提取根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的方法，该提取方法操作简单，提取效率高。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种利用离子液体从苹果花中优化提取根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的方法，其将干燥的苹果花粉末与萃取剂混合后于室温（25－30℃）进行超声萃取，超声萃取结束后，离心，取上清液即得。具体的，上述提取方法中，所述萃取剂由离子液体与甲醇混合组成，所述离子液体为［BMIM］BF4、［BMIM］Br、［BMIM］PF6或［HMIM］PF6；萃取剂中离子液体浓度为0.1－1.0mol/L（其中，优选为0.4－0.8mol/L）。文中如无特殊说明，甲醇均指的是体积浓度。进一步的，可以将苹果花粉末与萃取剂按照固液比1g：20－100mL（其中，优选1g：60－1g：100mL）进行添加，苹果花粉末的适宜目数范围在10－90目（其中，优选50－70目）。为了获得较好的提取效果，超声萃取时间以10－60min为宜（其中，优选40－60min），离心转速以2000－9000r/min为宜（其中，优选7000－9000r/min）。本专利技术利用离子液体从苹果花中提取根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的方法构思步骤如下：1）首先选择合适的溶剂来溶解离子液体并确定最佳的萃取剂类型；分别比较甲醇、乙腈、乙酸乙酯、70%乙醇和水来溶解离子液体并对苹果花进行提取，筛选出甲醇对目标分析物的提取率最好。接着分别比较了［BMIM］BF4/甲醇，［BMIM］Br/甲醇，［BMIM］PF6/甲醇，［HMIM］PF6/甲醇四种萃取剂对目标分析物的萃取率，最终确定［BMIM］Br/甲醇为最佳萃取剂；2）在步骤1）的基础上，设计提取条件的因素水平，以提取苹果花工艺中的不同控制参数为因子，通过单因素分析法来确定响应曲面方法的因素水平；筛选多个提取工艺的控制参数后，选取影响最大的几个控制参数为因子：以固液比（倍）、萃取剂浓度（mol/L）、超声时间（min）、离心转速（r/min）、粉碎目数（目）为五个因子，进行试验；3）采用Design-Expert8.06设计响应曲面试验，通过方差分析并确定根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的最大提取率以及其对应的因子水平；4）根据根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的最大提取率对应的控制参数因子水平，在最优条件下提取苹果花中根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷，检测提取率（将供试品溶液用高效液相色谱仪在270nm处检测峰面积，与根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷标准曲线比较，计算根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的总萃取量）。将实际提取率与传统溶剂检测值相比较，确定离子液体萃取的先进性；5）在相同体系下，对苹果花的离子液体提取液、甲醇提取液和离子液体进行酪氨酸酶的活性测定。本专利技术提供了一种利用离子液体结合响应曲面实验法优化提取根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的工艺，应用Design-Expert8.06统计分析软件，设计Box-Benhnken5因素3水平的中心组合实验，利用HPLC法同时对苹果花中的根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷3种成分进行含量测定，筛取最佳的提取工艺，并对其进行了酪氨酸酶的活性研究。本专利技术为中药研究者们提供了新的思路和途径，本实验建立的最佳提取条件是科学可行的，可用于优化选取合适工业扩大化生产的提取技术，改善陈旧工艺，提高效率，为苹果花的综合利用提供实验依据。此外，本专利技术提取方法操作简单，提取效率高，适合大规模工业化生产。附图说明图1苹果花供试品（a）与混合对照品（b）的HPLC图，图中，1.根皮苷2.紫云英苷3.阿福豆苷；图2不同提取溶剂对苹果花中根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷3种黄酮类化合物萃取率的影响；图3萃取剂种类对苹果花中根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷3种黄酮化合物萃取率的影响；图4粉碎目数对苹果花中根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷3种黄酮化合物萃取率的影响；图5萃取剂浓度对苹果花中根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷3种黄酮化合物萃取率的影响；图6超声时间对苹果花中根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷3种黄酮化合物萃取率的影响；图7固液比对苹果花中根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷3种黄酮化合物萃取率的影响；图8离心转速对苹果花中根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷3种黄酮化合物萃取率的影响；图9交互作用对苹果花中根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷3种黄酮化合物萃取率的影响。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术的技术方案作进一步地详细介绍，但本专利技术的保护范围并不局限于此。仪器与试剂。紫云英苷(批号17042804)购于成都普菲德生物技术有限公司，HPLC检测纯度大于98%；阿福豆苷和根皮苷，HPLC检测纯度均大于98%。1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐[HMIM]PF6(赛默飞世尔科技公司，美国)、溴化1-丁基-3-甲基咪唑[BMIM]Br(默克股份两合公司，德国)、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐[BMIM]BF4(默克股份两合公司，德国)、1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐[BMIM]PF6(默克股份两合公司，德国)。乙腈、甲醇(HPLC级)，磷酸(天津市富宇精细化工有限公司)，水为纯净水(杭州娃哈哈百利食品有限公司)。岛津LC-20AT系列高效液相色谱仪(日本岛津)：LC-20AT液相色谱输液泵、CTO-10AS柱温箱、SPD-20A紫外检测器、LC-Solution色谱数据处理系统；KQ-500DB型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司，江苏)；AB135-S型十万级电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司，瑞士)。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用离子液体从苹果花中提取根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的方法，其特征在于，将干燥的苹果花粉末与萃取剂混合后于室温进行超声萃取，超声萃取结束后，离心，取上清液即得。

【技术特征摘要】
1.一种利用离子液体从苹果花中提取根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的方法，其特征在于，将干燥的苹果花粉末与萃取剂混合后于室温进行超声萃取，超声萃取结束后，离心，取上清液即得。2.如权利要求1所述利用离子液体从苹果花中提取根皮苷、紫云英苷和阿福豆苷的方法，其特征在于，所述萃取剂由离子液体与甲醇混合组成，所述离子液体为［BMIM］BF4、［BMIM］Br、［BMIM］PF6或［HMIM］PF6；萃取剂中离子液体浓度为0.1－1.0mol/L。3....

【专利技术属性】
技术研发人员：康文艺，李文静，王金梅，李昌勤，王鹏禹，呼谧允，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：河南,41