芍药苷在制备IDO抑制剂中的用途制造技术

本发明专利技术属于药品或保健品领域，具体涉及芍药苷及其药学上可接受的衍生物在制备IDO抑制剂中的用途。芍药苷对细胞内的IDO的抑制活性均优于阳性对照药1‑甲基色氨酸(1‑MT)对细胞内的IDO的抑制活性，具有显著的IDO的抑制活性；芍药苷可以显著降低强直性脊柱炎模型的血清TNF‑α和RANKL水平，且对IDO活性具有显著的抑制作用；芍药苷对强直性脊柱炎具有显著的治疗作用。

Application of paeoniflorin in preparation of IDO inhibitors

The invention belongs to the field of medicine or health care products, in particular to the use of paeoniflorin and its pharmaceutically acceptable derivatives in the preparation of IDO inhibitors. Paeoniflorin could significantly reduce the levels of serum TNF_a and RANKL in ankylosing spondylitis model, and significantly inhibit the activity of IDO. Glycoside has significant therapeutic effect on ankylosing spondylitis.

【技术实现步骤摘要】
芍药苷在制备IDO抑制剂中的用途
本专利技术属于药品或保健品领域，具体涉及芍药苷在制备IDO抑制剂中的用途。
技术介绍
IDO(indoleamine-2，3-dioxygenase)中文名为吲哚胺2，3-双加氧化酶，是肝脏以外唯一催化色氨酸沿犬尿氨酸途径(kynureninepathway，KP)代谢的限速酶，可以将色氨酸分解为L-犬尿氨酸、吡啶甲酸和喹啉酸等多种代谢物。L-色氨酸作为人体内维持细胞活化和增殖所必需的氨基酸，也是构成蛋白质不可缺少的成分，它的缺乏会导致一些重要细胞的功能异常。自1967年被发现以来，IDO通过降解色氨酸抑制病原微生物增殖的机制、IDO与神经系统疾病之间的关系逐渐被阐明；并有研究证实，IDO还参与调节T细胞的反应，能够对T细胞的增殖和活化产生抑制作用，而这种抑制作用则介导了表达IDO肿瘤细胞的免疫逃逸现象。因此，IDO的表达或活性的异常增高，与多种疾病的发病机制密切相关，是导致多种疾病的重要因素，例如已被证实的肿瘤、阿尔茨海默病、抑郁症、老年性白内障、AIDS等病毒感染、莱姆病和链球菌感染等细菌感染等。因此，IDO抑制剂成为极具潜力的治疗药物，引起了众多学者的关注。作为一种全新靶点，IDO成为极具潜力的癌症免疫治疗靶标。筛选高效、低毒的IDO抑制剂/抗体，并将其用于治疗上述疾病，成为了研究人员的共同诉求。IDO抑制剂的研发尚处于药物开发的初期，目前仅有2个化合物(epacadostat和indoximod)进入Ⅱ期临床，1个化合物(GDC-0919)进入Ⅰ期临床。芍药苷，来源于芍药科植物芍药根、牡丹根、紫牡丹根，具有扩张血管、镇痛镇静、抗炎抗溃疡、解热解痉、利尿的作用。目前，关于芍药苷用于制备IDO抑制剂尚无报道。
技术实现思路
为此，本专利技术提供芍药苷及其药学上可接受的衍生物在制备IDO抑制剂中的用途。为解决上述技术问题，本专利技术是通过以下技术方案来实现的：本专利技术提供芍药苷及其药学上可接受的衍生物在制备IDO抑制剂中的用途；所述IDO抑制剂用于治疗强直性脊柱炎；所述药学上可接受的衍生物选自盐、酯、前药或溶剂合物。本专利技术还提供芍药苷及其药学上可接受的衍生物在制备治疗IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药品中的用途；所述疾病为强直性脊柱炎；所述药学上可接受的衍生物选自盐、酯、前药或溶剂合物。优选地，上述用途，所述芍药苷及其药学上可接受的衍生物按照常规工艺，加入常规辅料制成临床上可接受的片剂、胶囊剂、散剂、合剂、丸剂、颗粒剂、糖浆剂、贴膏剂、栓剂、气雾剂、软膏剂或注射剂所述常规辅料为：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素纳等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000、PEG4000、虫蜡等。本专利技术的技术方案具有如下优点：芍药苷对细胞内的IDO的抑制活性均优于阳性对照药1-甲基色氨酸(1-MT)对细胞内的IDO的抑制活性，具有显著的IDO的抑制活性；芍药苷可以显著降低强直性脊柱炎模型的血清TNF-α和RANKL水平，且对IDO活性具有显著的抑制作用；芍药苷对强直性脊柱炎具有显著的治疗作用。具体实施方式实验例1芍药苷对IDO的抑制活性的研究1、实验目的利用质粒pcDNA3.1-ID0转染HEK293细胞，使其高表达IDO，然后分别测定芍药苷在细胞水平对IDO的抑制活性。2、实验方法将HEK293细胞以2.5X104细胞/孔的密度接种于96孔板中，DMEM培养基培养(含10％胎牛血清、50U/mL青霉素和50mg/mL链霉素)，置于37℃、湿度95％、5％C02的培养箱中培养。培养24h后，使用脂质体Lipofectamin2000介导pcDNA3.1-hID0质粒转染，分为阳性对照组和实验组。阳性对照组以1-甲基色氨酸(1-MT)为供试品，实验组以芍药苷为供试品。转染24h后，各组分别加入对应的供试品进行孵育。孵育5h后，取140μL上清到另一96孔板中，加入10μL30％(w/v)三氯乙酸，在65℃加热15min，然后12000rpm离心10min，取等体积2％(w/v)对-二甲氨基苯甲醛的乙酸溶液混合显色，最后采用酶标仪在492nm检测吸光值，活性测定结果用IC50值表示。3、实验结果各组对IDO的抑制活性的具体实验结果如表1所示。表1各组对细胞水平IDO的抑制活性的具体实验结果组别IC50(μM)阳性对照组17.8实验组7.9由表1可知：实验组对细胞内的IDO的抑制活性均优于阳性对照组对细胞内的IDO的抑制活性，具有显著的IDO的抑制活性。4、实验结论芍药苷对细胞内的IDO的抑制活性均优于阳性对照药1-甲基色氨酸(1-MT)对细胞内的IDO的抑制活性，具有显著的IDO的抑制活性。实验例2芍药苷对强直性脊柱炎的治疗效果1、实验目的采用蛋白聚糖免疫方法建立小鼠强直性脊柱炎模型，然后灌胃芍药苷，ELISA法检测炎性标志物血清TNF-α和NF-кB受体活化因子配体(RANKL)水平，并检测血清IDO活性(Kyn/Trp)，验证芍药苷对于强直性脊柱炎的疗效。2、实验方法2.1实验动物健康雄性BALB/c小鼠24只，体重(18±2)g，鼠龄4～5周，均购自上海斯莱克。2.2供试药物以实施例1制备的芍药苷为供试药物。2.3实验分组及造模将小鼠适应性喂养1周后，取其中8只作为空白对照组。取剩余的16只采用蛋白聚糖免疫方法建立强直性脊柱炎模型，鼠腹腔注射蛋白聚糖乳剂0.15mL(75μg+弗氏佐剂)，首次免疫后7天可加强免疫，腹腔注射0.15mL乳剂，造模共21天；造模成功后，分为2组：实验组和模型对照组。实验组组给予芍药苷灌胃给药，每日1次，每次0.2g/10g。模型对照组和空白对照组均给予等量生理盐水灌胃。各组均给药60天，于第61天眼眶取血。2.4炎症因子测定采用ELISA检测动物外周血中血清TNF-α和RANKL水平，按照试剂盒说明书操作。2.5IDO活性检测利用高效液相色谱技术同时检测小鼠血清中Trp浓度与Kyn浓度。因为IDO能催化底物Trp代谢生成产物Kyn，故Kyn/Trp比值可以反映IDO活性。血清在4℃下放置过夜，3000rpm离心15min。取上清血清，加入等体积的5％高氯酸溶液，于漩祸混匀器上混匀0.5-1min。室温静置10-15min，以充分沉淀血清中的蛋白，然后以12000rpm离心10min，取上清液加入1/2体积甲醇(色谱纯)，在漩祸仪上振荡5min，然后12000rpm离心10min，最后上清经过0.45μm过滤器过滤后进行上样，检测血清中犬尿氨酸/色氨酸(Kyn/Trp)比值，从而反映ID本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.芍药苷及其药学上可接受的衍生物在制备IDO抑制剂中的用途；所述IDO抑制剂用于治疗强直性脊柱炎；所述药学上可接受的衍生物选自盐、酯、前药或溶剂合物。

【技术特征摘要】
1.芍药苷及其药学上可接受的衍生物在制备IDO抑制剂中的用途；所述IDO抑制剂用于治疗强直性脊柱炎；所述药学上可接受的衍生物选自盐、酯、前药或溶剂合物。2.芍药苷及其药学上可接受的衍生物在制备治疗IDO介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病的药品中的用途；所述疾病为强直...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘娟，李玉梅，
申请(专利权)人：刘娟，李玉梅，
类型：发明
国别省市：山东,37