一种采用台闽苣苔的珠芽进行组培快繁的方法技术

技术编号:18616207 阅读:47 留言:0更新日期:2018-08-07 19:26
本发明专利技术公开了一种采用台闽苣苔的珠芽进行组培快繁的方法,通过芽诱导培养基、芽增殖培养基和生根培养基的培养,得到株高5cm左右,根须5~7根的台闽苣苔苗,不但增加了芽增殖培养基,且所有培养基中增加了AC,芽增殖培养基增加了土豆泥,这样使得繁殖时间缩短到80天,效率高,且培养的台闽苣苔苗遗传稳定性高,种苗一致性高,能快速形成台闽苣苔产业化。

A method of tissue culture and rapid propagation of buds from Taiwan's cabbage

The invention discloses a method of tissue culture and rapid propagation by using the bud of borson moss. Through the cultivation of bud induction medium, bud proliferation medium and rooting medium, the 5~7 roots of the plant, which have a height of 5cm and root, can not only increase the medium of bud proliferation, but also increase the AC and bud proliferation culture in all the medium. The breeding foundation increased mashed potatoes, thus shortening the breeding time to 80 days and high efficiency.

【技术实现步骤摘要】
一种采用台闽苣苔的珠芽进行组培快繁的方法
本专利技术涉及台闽苣苔的组培技术,具体涉及一种采用台闽苣苔的珠芽进行组培快繁的方法。
技术介绍
台闽苣苔是一种苦苣苔科台闽苣苔属植物,为单属种植物,在植物系统分类学上占有重要的位置。该植物主要分布于我国浙江省温州至福建省漳州和台湾地区,琉球群岛也有少量分布。台闽苣苔生活范围较为狭窄,适宜生活在海拔约300~1000m的山谷阴处或沟边草丛中。台闽苣苔花型美观,花色艳丽,具有较高的观赏价值。同时,台闽苣苔也是重要的药用植物,具有药用经济价值,清热解毒,凉血止咳等功效。然而随着我国东南沿海经济发展,人类活动导致大量的山林山地被开垦,这侵占了台闽苣苔的栖息地,使该植物的数量急剧减少。目前,台闽苣苔已经成为中国苦苣苔科植物濒危稀有种,亟待对其进行保护。以植物组织培养为基础的快速繁育技术是目前大批量提高植物数量的有效方法,其操作简便,育种时间短,见效快,目前已得到了广泛的商业化应用。如台闽苣苔的组织培养和快速繁殖(生理通讯第41卷第4期-497,2005年8月)的论文,就公开了利用台闽苣苔的幼叶进行组织培养的方法,其利用诱导不定芽分化培养基(MS+6-BA+NAA+蔗糖+琼脂)进行不定芽发生和扩大培养,用生根培养基(MS+活性炭+蔗糖+琼脂)让不定芽的苗生根和开叶,虽然用组织培养技术可以较为快速的繁殖台闽苣苔,但该组培技术存在着培养时间较长(至少需要120天),幼叶诱导操作难度较大、效率不高等问题。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种组培快繁的生产周期较短,效率高;又使种苗达到一致性、遗传稳定性高的采用台闽苣苔的珠芽进行组培快繁的方法。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为:一种采用台闽苣苔的珠芽进行组培快繁的方法,其步骤如下:a、选取健壮的野生台闽苣苔的珠芽,在清水下冲洗,再在1%NaClO3水溶液中浸泡2~4min,取出珠芽用无菌水充分洗净;在超净工作台上将珠芽用无菌纱布包好放置在75%的酒精中消毒30~60s,再用质量浓度0.1%的HgCl2水溶液浸泡5~8min,然后用无菌水冲洗5次,最后置于无菌滤纸上,待其吸干水分后,得到洁净珠芽;b、将步骤a的洁净珠芽播撒于芽诱导培养基上进行芽诱导培养,培养设定温度为21℃~25℃,光照强度为1500lx~3000lx,光培养时长为12小时。培养25天可观察到愈伤组织长出大量的丛生芽;所述芽诱导培养基的组成:1/2MS+终浓度0.5~1.5mg/L的6-BA+终浓度0.5~1mg/L的NAA+终浓度1~2g/L的AC+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L琼脂,PH值为5.8~6.5;c、将步骤b的丛生芽切分成1~2芽的小块,接种到芽增殖培养基中进行增殖培养,培养设定温度为22℃~26℃,光照强度为1500lx~3000lx,光培养时长为12小时,培养30天得到长为3~4cm丛生芽;所述芽增殖培养基的组成:1/2MS+终浓度1~3mg/L的6-BA+终浓度0.2~1mg/L的NAA+终浓度1~2g/L的AC+质量终浓度10~15%的土豆泥+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L琼脂,PH值为5.8~6.5;d、将步骤c的长为3~4cm丛生芽单株移植至生根培养基中进行生根培养,培养设定温度为22℃~26℃,光照强度为1500lx~3000lx,光培养时长为12小时,培养25天得到株高4~5.5cm,根须5~7根的台闽苣苔苗;所述生根培养基的组成:1/2MS+终浓度0.05~0.5mg/L的NAA+终浓度2g/L的AC+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L的琼脂,pH值为5.8~6.5;e、上述1/2MS为元素浓度减半的国际通用MS培养基,用流水洗净台闽苣苔苗的根部残留的培养基,在800~1000倍多菌灵溶液中浸泡30min,单株移栽入盆,基质为3份腐殖土、3份草炭土、1份珍珠岩,试管苗栽植不宜太深,保持湿度。与现有技术相比,本专利技术的优点在于一种采用台闽苣苔的珠芽进行组培快繁的方法,通过芽诱导培养基、芽增殖培养基和生根培养基的培养,得到株高5cm左右,根须5~7根的台闽苣苔苗,不但增加了芽增殖培养基,且所有培养基中增加了AC,芽增殖培养基增加了土豆泥,这样使得繁殖时间缩短到80天,效率高,且培养的台闽苣苔苗遗传稳定性高,种苗一致性高。能快速形成台闽苣苔产业化,实现台闽苣苔工厂化生产,促进台闽苣苔产业的发展。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术作进一步详细描述。实施例1一种采用台闽苣苔的珠芽进行组培快繁的方法,其步骤如下:a、选取健壮的野生台闽苣苔的珠芽,在清水下冲洗,再在1%NaClO3水溶液中浸泡2~4min,取出珠芽用无菌水充分洗净;在超净工作台上将珠芽用无菌纱布包好放置在75%的酒精中消毒30~60s,再用质量浓度0.1%的HgCl2水溶液浸泡5~8min,然后用无菌水冲洗5次,最后置于无菌滤纸上,待其吸干水分后,得到洁净珠芽;b、将步骤a的洁净珠芽播撒于芽诱导培养基上进行芽诱导培养,培养设定温度为21℃~25℃,光照强度为1500lx~3000lx,光培养时长为12小时。培养25天愈伤组织长出大量的丛生芽;芽诱导培养基的组成:1/2MS+终浓度1.0mg/L的6-BA+终浓度0.7mg/L的NAA+终浓度1.5g/L的AC+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L琼脂,PH值为5.8-6.5;c、将步骤b的丛生芽切分成1~2芽的小块,接种到芽增殖培养基中进行增殖培养,培养设定温度为22℃~26℃,光照强度为1500lx~3000lx,光培养时长为12小时,培养30天得到长为3~4cm丛生芽;芽增殖培养基的组成:1/2MS+终浓度2mg/L的6-BA+终浓度0.6mg/L的NAA+终浓度1.5g/L的AC+质量终浓度12%的土豆泥+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L琼脂,PH值为5.8-6.5;d、将步骤c的长为3~4cm丛生芽单株移植至生根培养基中进行生根培养,培养设定温度为22℃~26℃,光照强度为1500lx~3000lx,光培养时长为12小时,培养25天得到株高4~5.5cm,根须5~7根的台闽苣苔苗;生根培养基的组成:1/2MS+终浓度0.2mg/L的NAA+终浓度2g/L的AC+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L的琼脂,pH值为5.8~6.5;e、其中1/2MS为元素浓度减半的国际通用MS,用流水洗净台闽苣苔苗的根部残留的培养基,在800~1000倍多菌灵溶液中浸泡30min,单株移栽入盆,基质为3份腐殖土、3份草炭土、1份珍珠岩,试管苗栽植不宜太深,保持湿度,成活率达90%以上。实施例2与实施例1基本相同,所不同的只是芽诱导培养基的组成:1/2MS+终浓度0.5mg/L的6-BA+终浓度1mg/L的NAA+终浓度2g/L的AC+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L琼脂;1/2MS+终浓度3mg/L的6-BA+终浓度0.2mg/L的NAA+终浓度1g/L的AC+质量终浓度15%的土豆泥+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L琼脂,生根培养基的组成:1/2MS+终浓度0.05mg/L的NAA+终浓度2g/L的AC+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种采用台闽苣苔的珠芽进行组培快繁的方法,其特征在于步骤如下:a、选取健壮的野生台闽苣苔的珠芽,在清水下冲洗,再在1%NaClO3水溶液中浸泡2~4min,取出珠芽用无菌水充分洗净;在超净工作台上将珠芽用无菌纱布包好放置在75%的酒精中消毒30~60s,再用质量浓度0.1%的HgCl2水溶液浸泡5~8min,然后用无菌水冲洗5次,最后置于无菌滤纸上,待其吸干水分后,得到洁净珠芽;b、将步骤a的洁净珠芽播撒于芽诱导培养基上进行芽诱导培养,培养设定温度为21℃~25℃,光照强度为1500lx~3000lx,光培养时长为12小时;培养25天愈伤组织长出大量的丛生芽;所述芽诱导培养基的组成:1/2MS+终浓度0.5~1.5mg/L的6‑BA +终浓度0.5~1mg/L的NAA +终浓度1~2g/L的AC +终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L琼脂,PH值为5.8‑6.5;c、将步骤b的丛生芽切分成1~2芽的小块,接种到芽增殖培养基中进行增殖培养,培养设定温度为22℃~26℃,光照强度为1500lx‑3000lx,光培养时长为12小时,培养30天得到长为3~4cm丛生芽 ;所述芽增殖培养基的组成:1/2MS+终浓度1~3mg/L的6‑BA +终浓度0.2~1mg/L的NAA +终浓度1~2g/L的AC +质量终浓度10~15%的土豆泥+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L琼脂,PH值为5.8‑6.5;d、将步骤c的长为3~4cm丛生芽单株移植至生根培养基中进行生根培养,培养设定温度为22℃~26℃,光照强度为1500lx~3000lx,光培养时长为12小时,培养25天得到株高4~5.5cm,根须5~7根的台闽苣苔苗;所述生根培养基的组成:1/2MS+终浓度0.05~0.5mg/L的NAA +终浓度2g/L的AC +终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L的琼脂,pH值为5.8~6.5;e、上述1/2MS为元素浓度减半的国际通用MS,用流水洗净台闽苣苔苗的根部残留的培养基,在800~1000倍多菌灵溶液中浸泡30min,单株移栽入盆,基质为3份腐殖土、3份草炭土、1份珍珠岩,试管苗栽植不宜太深,保持湿度。...

【技术特征摘要】
1.一种采用台闽苣苔的珠芽进行组培快繁的方法,其特征在于步骤如下:a、选取健壮的野生台闽苣苔的珠芽,在清水下冲洗,再在1%NaClO3水溶液中浸泡2~4min,取出珠芽用无菌水充分洗净;在超净工作台上将珠芽用无菌纱布包好放置在75%的酒精中消毒30~60s,再用质量浓度0.1%的HgCl2水溶液浸泡5~8min,然后用无菌水冲洗5次,最后置于无菌滤纸上,待其吸干水分后,得到洁净珠芽;b、将步骤a的洁净珠芽播撒于芽诱导培养基上进行芽诱导培养,培养设定温度为21℃~25℃,光照强度为1500lx~3000lx,光培养时长为12小时;培养25天愈伤组织长出大量的丛生芽;所述芽诱导培养基的组成:1/2MS+终浓度0.5~1.5mg/L的6-BA+终浓度0.5~1mg/L的NAA+终浓度1~2g/L的AC+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g/L琼脂,PH值为5.8-6.5;c、将步骤b的丛生芽切分成1~2芽的小块,接种到芽增殖培养基中进行增殖培养,培养设定温度为22℃~26℃,光照强度为1500lx-3000lx,光培养时长为12小时,培养30天得到长为3~4cm丛生芽;所述芽增殖培养基的组成:1/2MS+终浓度1~3mg/L的6-BA+终浓度0.2~1mg/L的NAA+终浓度1~2g/L的AC+质量终浓度10~15%的土豆泥+终浓度30g/L的蔗糖+终浓度7.5g...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨燕萍周庄应震王晓乐李海滨付双彬姚丽娟曾爱平
申请(专利权)人:浙江省亚热带作物研究所
类型:发明
国别省市:浙江,33

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