用于生成邻近探针的方法技术

本发明专利技术提供了多对邻近探针以及其生产方法，每对能够结合至不同的靶标分析物，其中每对探针的第一和第二邻近探针包括缀合至其分析物结合部分的通用寡核苷酸，并且与通用寡核苷酸杂交的是不同的标签寡核苷酸，其包括对所有标签寡核苷酸共同的通用补体结构域和对每个标签寡核苷酸唯一的单一结构域。

A method for generating adjacent probes

The present invention provides a plurality of adjacent probes and their production methods, each pair of which can be combined to different target analytes, in which the first and second adjacent probes for each pair of probes include the common oligonucleotides conjugated to their analyte binding parts, and are different label oligonucleotides with the general oligonucleotides, which include For all tagged oligonucleotides, the common complement domain and the unique single domain for each tagged oligonucleotide are common.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于生成邻近探针的方法本专利技术涉及制造探针(邻近探针)的方法，该探针用于样品中的分析物的基于邻近探针(proximityprobe)的检测试验。具体而言，本专利技术涉及用于生产具有不同靶标分析物结合特异性并且包括不同核酸结构域的多种邻近探针对的改进的方法。邻近探针通常配对使用，例如第一和第二邻近探针，并且配对的每个邻近探针通常包括对靶标分析物具有特异性的分析物-结合结构域，和功能结构域，例如偶联至其的核酸结构域。然而，存在其中可以组合使用多于两种例如三种邻近探针的邻近试验(proximityassay)版本。分析物-结合结构域可以是例如核酸“适配体”(Fredrikssonetal(2002)NatBiotech20:473-477)或可以是蛋白质的，比如单克隆或多克隆抗体(Gullbergetal(2004)ProcNatlAcadSciUSA101:8420-8424)。每个邻近探针对的各自的分析物-结合结构域可以针对分析物上不同的结合位点具有特异性，该分析物可以由单个分子或相互作用分子的复合物构成，或可以具有相同的特异性，例如在靶标分析物作为多聚体存在的情况下。邻近试验依赖于“本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制造多对邻近探针的方法，其中每对邻近探针包括第一和第二邻近探针并且每对能够结合至不同的靶标分析物，其中每个邻近探针包括分析物结合结构域和部分双链核酸结构域并且配对中的每个邻近探针可以同时结合至靶标分析物，并且其中在将邻近探针对结合至其靶标分析物之后，所述邻近探针对的所述核酸结构域能够直接或间接相互作用，所述方法包括：a.将第一通用寡核苷酸缀合至多个第一分析物结合部分中的每个，以形成第一通用缀合物组；b.将第二通用寡核苷酸缀合至多个第二分析物结合部分中的每个，以形成第二通用缀合物组；c.使多个不同的第一标签寡核苷酸中的一个与第一通用缀合物组中的每个第一通用寡核苷酸杂交，从而形成多种第一邻...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.21 GB 1518655.41.一种制造多对邻近探针的方法，其中每对邻近探针包括第一和第二邻近探针并且每对能够结合至不同的靶标分析物，其中每个邻近探针包括分析物结合结构域和部分双链核酸结构域并且配对中的每个邻近探针可以同时结合至靶标分析物，并且其中在将邻近探针对结合至其靶标分析物之后，所述邻近探针对的所述核酸结构域能够直接或间接相互作用，所述方法包括：a.将第一通用寡核苷酸缀合至多个第一分析物结合部分中的每个，以形成第一通用缀合物组；b.将第二通用寡核苷酸缀合至多个第二分析物结合部分中的每个，以形成第二通用缀合物组；c.使多个不同的第一标签寡核苷酸中的一个与第一通用缀合物组中的每个第一通用寡核苷酸杂交，从而形成多种第一邻近探针，每个不同的第一标签寡核苷酸包括第一通用补体结构域，其对所有第一标签寡核苷酸是共同的并且其与第一通用寡核苷酸互补；和第一单一结构域，其对每个不同的第一标签寡核苷酸是唯一的并且其不能够与第一或第二通用寡核苷酸杂交；d.使多个不同的第二关联标签寡核苷酸中的一个与第二通用缀合物组中的每个第二通用寡核苷酸杂交，从而形成多种第二邻近探针，每个不同的第二标签寡核苷酸包括第二通用补体结构域，其对所有第二标签寡核苷酸是共同的并且其与第二通用寡核苷酸互补；和第二单一结构域，其对每个不同的第二标签寡核苷酸是唯一的并且其不能够与第一或第二通用寡核苷酸杂交；e.从所述多种第一邻近探针选择多个第一邻近探针并且从所述多种第二邻近探针选择多个关联的第二邻近探针，从而提供多对邻近探针。2.权利要求1所述的方法，其中所述第一和第二通用寡核苷酸是不同的。3.权利要求1所述的方法，其中所述第一和第二通用寡核苷酸是相同的。4.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述第一和第二标签寡核苷酸能够通过杂交相互作用。5.权利要求4所述的方法，其中所述第一和第二标签寡核苷酸包括游离的3’末端。6.权利要求5所述的方法，其中所述第一和第二标签寡核苷酸在其3’末端处包括互补区。7.权利要求4至6中任一项所述的方法，其中可以使用关联的标签寡核苷酸作为延伸模板延伸所述第一和/或第二标签寡核苷酸。8.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述第一标签寡核苷酸包括游离的3’末端，并且其中所述第二标签寡核苷酸包括游离的5’末端，其中所述第一和第二标签寡核苷酸通过其各自的游离端与共同的夹板寡核苷酸杂交。9.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述第一和第二标签寡核苷酸模板化可环化寡核苷酸分子或寡核苷酸分子对的环化。10.权利要求9所述的方法，其中所述第一标签寡核苷酸包括与第一个添加的寡核苷酸分子的5’和3’末端的互补区，并且其中所述第二标签寡核苷酸包括与所述第一个可环化寡核苷酸的所述5’和3’末端之间的区或与第二个添加的寡核苷酸的互补区。11.权利要求1至10中任一项所述的方法，其中每个第一邻近探针的标签寡核苷酸可以仅与其关联的第二邻近探针...

【专利技术属性】
技术研发人员：约翰·E·西蒙·弗雷德里克松，克拉斯·M·伦德伯格，
申请(专利权)人：欧凌科蛋白质公司，
类型：发明
国别省市：瑞典,SE