多肽制造技术

本发明专利技术涉及多肽、编码该多肽的核苷酸、连同生产这些多肽的方法。本发明专利技术还涉及包含多肽的洗涤剂组合物、洗涤方法以及多肽的用途。

polypeptide

The invention relates to polypeptides, nucleotides encoding the polypeptide, together with a method of producing these peptides. The invention also relates to a detergent composition comprising a polypeptide, a washing method and the use of a polypeptide.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】多肽对序列表的引用本申请含有一个处于计算机可读形式的序列表，将其通过引用结合在此。
本专利技术涉及具有脱氧核糖核酸(DNA酶)活性的新的多肽、编码该多肽的核苷酸、连同生产这些多肽的方法。本专利技术还涉及包含DNA酶的洗涤剂组合物、洗涤方法和DNA酶的用途。
技术介绍
在许多自然、工业和医疗环境中，微生物一般附着于表面而生存，由包括生物聚合物和高分子的细胞外物质进行囊化。经粘液囊化的微生物所产生的层被称为生物膜。生物膜是细菌在自然环境中生长的主要模式，并且在生物膜中生长的细菌表现出独特的生理特性。与其浮游生长的对应物相比，生物膜中的细菌更耐受抗生素、UV照射、洗涤剂和宿主免疫应答。生物膜可以包括一种或多种微生物，包括革兰氏阳性和革兰氏阴性菌、藻类、原生动物、和/或酵母或丝状真菌和病毒和/或噬菌体。有问题的生物膜的实例是牙菌斑，医学植入物的上的感染，还有船体上的初始污染。生物膜归因于人类许多感染的发病机理，并且就暴露面的生物污着而论在工业中是一个显著问题，其中生物膜定植可以形成能够破坏并且干扰工业方法和组分的局部生态系统的基础组分。当使用衣物(像T恤或运动衣)时，它们暴露于来自使用者的身体和来自它们使用的环境的其余部分的细菌。这些细菌中的一些能够粘附于衣物物品并且在该物品上形成生物膜。细菌的存在意味着，衣物物品变得粘稠，并且因此污垢粘附在粘稠区域上。这种污垢已经显示出难以通过可商购的洗涤剂组合物来去除。此外，当非常脏的衣物物品与不太脏的衣物物品一起洗涤时，洗液中存在的污物倾向于附着于生物膜上。其结果是，该衣物物品在洗涤后比洗涤前更“脏”。此外，这些细菌是难闻的气味的来源，在对衣物物品使用后产生难闻的气味。难闻的气味(恶臭)难以去除，并且即使在洗涤后仍可存在。这种难闻的气味的原因是细菌粘附到纺织品表面。由于粘附到纺织品上，即使洗涤后细菌仍可存在，并且继续成为难闻的气味的来源。国际专利申请WO2011/098579(纽卡斯尔大学)和WO2014/087011(诺维信公司(NovozymesA/S))涉及脱氧核糖核酸酶化合物以及用于破坏和预防生物膜的方法。
技术实现思路
本专利技术涉及具有DNA酶(脱氧核糖核酸酶)活性的多肽。本专利技术的一方面涉及具有DNA酶活性的一种多肽，该多肽选自下组，该组由以下组成：(a)与SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20具有至少60％序列一致性的多肽，(b)SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20的成熟多肽的变体，该变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入；以及(c)具有DNA酶活性的(a)或(b)的多肽的片段。在另一方面，本专利技术涉及包含具有DNA酶活性的多肽和优选地洗涤剂佐剂成分的洗涤剂组合物。本专利技术的一方面涉及包含具有与SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20的多肽至少60％序列一致性的多肽和洗涤剂佐剂的洗涤剂组合物。本专利技术进一步涉及用于清洁或洗涤物品的清洁或洗涤方法，该方法包括以下步骤：a.将物品暴露于包含具有DNA酶活性的多肽或包含这些多肽的洗涤剂组合物的洗液，该多肽选自下组，该组由以下组成：SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20的多肽或与其具有至少60％序列一致性的多肽。b.完成至少一个洗涤循环；以及c.任选地冲洗该物品，其中该物品是纺织品。此外，要求保护的是DNA酶用于防止、减少或去除物品的生物膜的用途。本专利技术进一步涉及产生该多肽的方法。序列SEQIDNO1获得自类芽孢杆菌属物种-62212的成熟多肽SEQIDNO2获得自类芽孢杆菌属物种-62605的成熟多肽SEQIDNO3获得自芽孢杆菌属物种-62738的成熟多肽SEQIDNO4获得自短小芽孢杆菌的成熟多肽SEQIDNO5获得自堀越氏芽孢杆菌的成熟多肽SEQIDNO6获得自芽孢杆菌属物种-62490的成熟多肽SEQIDNO7获得自芽孢杆菌属物种-13390的成熟多肽SEQIDNO8获得自腌海鲜芽孢杆菌属(Jeotgalibacillus)物种-13376的成熟多肽SEQIDNO9获得自芽孢杆菌属物种-62738的成熟多肽SEQIDNO10获得自绿青链霉菌的成熟多肽SEQIDNO11获得自婴儿链球菌的成熟多肽SEQIDNO12获得自芽孢杆菌属物种-62599的成熟多肽SEQIDNO13获得自秋叶氏芽孢杆菌的成熟多肽SEQIDNO14获得自Paenibacillusxylanexedens的成熟多肽SEQIDNO15获得自虚构芽孢杆菌属(Fictibacillus)物种-62719的成熟多肽SEQIDNO16获得自藻居芽孢杆菌(Bacillusalgicola)的成熟多肽SEQIDNO17获得自微小杆菌属物种NG55的成熟多肽SEQIDNO18获得自来自环境样品J的宏基因组的成熟多肽SEQIDNO19获得自Streptomycesthermoalcalitolerans的成熟多肽SEQIDNO20获得自来自环境样品C的宏基因组的成熟多肽SEQIDNO21是克劳氏芽孢杆菌分泌信号定义等位基因变体：术语“等位基因变体”意指占据同一染色体基因座的基因的两种或更多种可替代形式中的任一种。等位基因变异通过突变天然地产生，并且可能导致群体内的多态性。基因突变可能是沉默的(所编码的多肽没有改变)或可能编码具有改变的氨基酸序列的多肽。多肽的等位基因变体是由基因的等位基因变体编码的多肽。生物膜：生物膜是在表面上，例如纺织品、餐具或硬表面上，细胞彼此粘附在一起的任何群组的微生物。这些粘附细胞经常包埋在胞外高聚物(EPS)的自身产生的基质内。生物膜EPS是一般由细胞外的DNA、蛋白质、和多糖组成的聚合物团块。生物膜可以形成在活的或非活的表面上。在生物膜中生长的微生物细胞与同一生物体的浮游细胞(相比之下，浮游细胞是可以在液体介质中漂浮或浮游的单个细胞)在生理上是不同的。生活在生物膜中的细菌通常具有与同一物种的自由漂浮细菌显著不同的特性，因为膜的密集并且受保护的环境允许它们以不同方式协作和相互作用。这一环境的一个益处是增加对洗涤剂和抗生素的抗性，因为，密集的细胞外基质和细胞的外层保护群落的内部。在衣物上，会发现产生生物膜的细菌是在以下物种中：不动杆菌属物种、气微菌属物种、短波单胞菌属物种、微杆菌属物种、滕黄微球菌、假单胞菌属物种、表皮葡萄球菌、和寡养单胞菌属物种。编码序列：术语“编码序列”意指直接指定多肽的氨基酸序列的多核苷酸。编码序列的边界一般由开放阅读框决定，该开放阅读框架从起始密码子(如ATG、GTG或TTG)开始并且以终止密码子(如TAA、TAG或TGA)结束。编码序列可为基因组DNA、合成DNA或其组合。色差(L值)：Lab色彩空间是针对明度具有尺寸L的色彩对立空间。L值，L*代表在L*＝0下的最暗的黑色，并且为在L*＝100下的最亮的白色。在本专利技术的上下文中，L值还称为色差。控制序列：术语“控制序列”意指对于表达编码本专利技术的成熟多本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有DNA酶活性的多肽，该多肽选自下组，该组由以下组成：(a)与SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20的成熟多肽具有至少70％序列一致性的多肽；(b)SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20的成熟多肽的变体，该变体在一个或多个位置处包含取代、缺失、和/或插入；以及(c)(a)或(b)的多肽的片段，该片段具有DNA酶活性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.07 DK PA201500618;2015.10.07 DK PA201500611.一种具有DNA酶活性的多肽，该多肽选自下组，该组由以下组成：(a)与SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20的成熟多肽具有至少70％序列一致性的多肽；(b)SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20的成熟多肽的变体，该变体在一个或多个位置处包含取代、缺失、和/或插入；以及(c)(a)或(b)的多肽的片段，该片段具有DNA酶活性。2.如权利要求1所述的多肽，该多肽与示于以下中所示的成熟多肽中任一项具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性：(a)SEQIDNO:1、(b)SEQIDNO:2、(c)SEQIDNO:3、(d)SEQIDNO:4、(e)SEQIDNO:5、(f)SEQIDNO:6、(g)SEQIDNO:7、(h)SEQIDNO:8、(i)SEQIDNO:9、(j)SEQIDNO:10、(k)SEQIDNO:11、(l)SEQIDNO:12、(m)SEQIDNO:13、(n)SEQIDNO:14、(o)SEQIDNO:15、(p)SEQIDNO:16、(q)SEQIDNO:17、(r)SEQIDNO:18、(s)SEQIDNO:19或(t)SEQIDNO:20。3.如权利要求1-2中任一项所述的多肽，该多肽包含SEQIDNO:8、9或10或SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20的成熟多肽或由其组成。4.如权利要求1-3中任一项所述的多肽，该多肽是SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20的多肽的变体，该变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入。5.具有DNA酶活性的多肽用于防止、减少或去除来自物品(其中该物品是纺织品)的生物膜的用途，其中该多肽选自下组，该组由以下组成：SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20，或与其具有至少80％序列一致性的多肽。6.根据权利要求5所述用于防止、减少或去除该物品的粘性的用途。7.根据权利要求5或6中任一项所述用于预处理该物品上的污渍的用途。8.根据权利要求5-7中任一项所述用于防止、减少或去除洗涤循环过程中污垢的再沉积的用途。9.根据权利要求5-8中任一项所述用于防止、减少或去除污垢在该物品上的附着的用途。10.根据以上权利要求中任一项所述用于维持或改进该物品的白度的用途。11.根据以上权利要求中任一项所述的用途，其中从该物品上减少或去除恶臭。12.包含具有DNA酶活性的多肽和洗涤剂佐剂成分的洗涤剂组合物，其中该具有DNA酶活性的多肽选自下组，该组由以下组成：(a)SEQIDNO:1中所示的多肽或与其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的DNA酶，(b)SEQIDNO:2中所示的多肽或与其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的DNA酶，(c)SEQIDNO:3中所示的多肽或与其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的DNA酶，(d)SEQIDNO:4中所示的多肽或与其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的DNA酶，(e)SEQIDNO:5中所示的多肽或与其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的DNA酶，(f)SEQIDNO:6中所示的多肽或与其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的DNA酶，(g)SEQIDNO:7中所示的多肽或与其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的DNA酶，(h)SEQIDNO:8中所示的多肽或与其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列一致性的DNA酶，(i)SEQIDNO:9中所示的多肽或与其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至...

【专利技术属性】
技术研发人员：M杰尔曼森，K戈里，HM格尔茨汉森，J萨洛蒙，MA斯特林格，TH布利克，N斯波德斯伯格，
申请(专利权)人：诺维信公司，
类型：发明
国别省市：丹麦,DK