一种水酶法提取牡丹籽油的方法技术

本发明专利技术公开了一种水酶法提取牡丹籽油的方法，将牡丹籽烘干，粉碎得牡丹籽粉末；加水混匀，加入单宁酶进行酶解，酶解温度为40~50℃，pH为4~6，酶解0.5~2h后，灭酶；加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解温度为50~60℃，pH为7~9,酶解时间为3~5h；离心分离乳化层和油层，冷冻破乳后，离心合并两次清油，真空旋蒸干燥，得到牡丹籽油。该方法采用单宁酶结合蛋白酶，单宁酶先处理牡丹籽粉末，再用蛋白酶进行提取。单宁酶水解单宁可以产生酚类物质，增加提取液中酚类物质的含量，增加水酶法提取的牡丹籽油的抗氧化性和营养价值，适合生产抗氧化活性更高，品质更好的牡丹籽油。

A method of extracting peony seed oil by water enzyme method

The invention discloses a method of extracting peony seed oil by water enzyme method, drying peony seed and crushing peony seed powder, adding water and mixing and adding tannase to enzymolysis, the enzyme hydrolysis temperature is 40~50 C, pH is 4~6, enzyme hydrolysis 0.5~2h, enzyme digestion, enzymolysis with alkaline protease, the enzymolysis temperature of 50~60, pH 7~9, enzymolysis. The time was 3~5h; centrifugally separated the emulsified layer and the oil layer, and after freezing and demulsification, the peony seed oil was obtained by centrifugation combined with two clear oil and vacuum drying. The method uses tannase to bind protease and tannase to treat peony seed powder first and then extract it with protease. Tannase hydrolysate tannin can produce phenolic substances, increase the content of phenolic compounds in the extract, increase the antioxidant and nutritive value of peony seed oil extracted by water enzyme method, and be suitable for producing higher antioxidant activity and better quality of peony seed oil.

【技术实现步骤摘要】
一种水酶法提取牡丹籽油的方法
本专利技术属于植物油脂提取
，具体涉及一种牡丹籽油的提取方法。
技术介绍
牡丹（PeoniasuffruticosaAndr．）属芍药科(Paeoniaceae)芍药属(Paeonia)牡丹组(sectMoutanDC)落叶灌木，是原产中国的一种名贵花卉。凤丹是野生种杨山牡丹的变种，广泛栽植于山东、河南、安徽、陕西、四川、重庆、湖南等地，传统以采收根皮药用为多。凤丹种子产量较高，一般能够达2250－3000kg/hm2。牡丹籽仁含油量高达30%，并且富含不饱和脂肪酸，可广泛用于医药工业、保健食品、高级化妆品、润滑油等行业，作为新木本油料资源具有重要的开发利用价值。油用牡丹栽植经济价值高，栽植后第三年开始结籽，结籽高产期为5－30年，产籽寿命可达40年以上。研究表明，牡丹籽营养价值很高，其含油量29－34%，蛋白含量为18－22%[1]。牡丹籽油是一种浅黄色或金黄色、具有牡丹籽特有香味的木本坚果油，其不饱和脂肪酸含量达到90%以上，主要为亚麻酸，亚油酸和油酸，亚麻酸含量高达31.56－66.85%。亚麻酸和亚油酸都是人体必需脂肪酸，具有多种活性功能，如降胆固醇、降血压、预防动脉粥样硬化、抗疲劳、增强免疫力等。现阶段牡丹籽油的主要提取方法有：溶剂浸出法、压榨法、超临界CO2流体萃取技术，以及亚临界溶剂萃取法，工业生产中,提取植物油脂的主要方法是压榨法和浸出法。这些方法制油,虽然出油率高,但存在设备复杂,溶剂回收和溶剂残留等问题。随着人们对食品安全意识的提高,考虑到环境、经济和安全等多方面的因素,应用水酶法提取植物油的技术得到广泛的关注及应用。与传统工艺相比,水酶法提油不仅提高了出油效率,简化工艺,还符合可持续发展的节能、环保的原则。随着工艺的发展，越来越多的不同种类的酶应用到水酶法提取的工艺中，例如：纤维素酶，果胶酶，蛋白酶等。之前单宁酶主要应用茶叶中多酚类物质的提取。据文献报道，单宁酶常用于葡萄酒和茶叶的处理过程中，但单宁酶在水酶法提取牡丹籽油的应用尚未有报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种水酶法提取牡丹籽油的方法，该方法采用单宁酶结合蛋白酶，单宁酶先处理牡丹籽粉末，再用蛋白酶进行提取。单宁酶可以一定程度的破坏植物的细胞壁结构，可以提高蛋白酶的提取效率，单宁酶水解单宁可以产生酚类物质，增加提取液中酚类物质的含量，可以更好的保护提取过程中，牡丹籽油不被氧化，增加水酶法提取的牡丹籽油的抗氧化性和营养价值。单宁酶水解鞣质可以一定程度的减少牡丹籽油中特有的涩味，改善牡丹籽油的口感。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：一种水酶法提取牡丹籽油的方法，包括如下步骤：1）将牡丹籽烘干，脱去外壳，粉碎得牡丹籽粉末；2）将牡丹籽粉末加水混匀，加入单宁酶进行酶解，酶解温度为40~50℃，pH为4~6，酶解0.5~2h后，灭酶；3）加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解温度为50~60℃，pH为7~9,酶解时间为3~5h；4）离心分离乳化层和油层，冷冻破乳后，离心合并两次清油，获得牡丹籽油毛油；5）对步骤4）获得的牡丹籽油毛油碱炼后，真空旋蒸干燥，除去油相中水，得到牡丹籽油。步骤1）中牡丹籽烘干至含水量不超过4%，粉碎的牡丹籽粉末颗粒不超过300μm。例如可以是，烘干温度50℃，烘干8-12h至含水量不超过4%；筛选目数为50目，牡丹籽粉颗粒小于300μm；步骤2）中加入单宁酶，单宁酶用量为牡丹籽粉重量的0.1－2%,优选为0.5%。单宁酶的酶解条件为：温度40~50℃，pH为4~6，时间为0.5~2h；进一步优选为温度45℃，pH6.0，时间为1h。酶解结束后灭酶条件为90℃灭酶5min；步骤3）中碱性蛋白酶的酶解条件为温度50~60℃，pH为7~9，时间为3~5h，碱性蛋白酶的酶量为牡丹籽粉重量的2~3%。进一步优选为：酶解温度55℃，pH为8.5，时间为4h，用量为2.5%。冷冻破乳条件为：冷冻温度为-20℃，时间为12~18h，解冻温度为50℃，时间为1~2h。冷冻破乳后离心的转速为5000~8000rpm，时间为10~30min。碱炼过程中进行一次碱炼，两次水洗的过程。碱炼温度为70~80℃,时间1h，两次水洗温度为70~80℃，时间为15min。单宁酶（又称鞣酸酶），是一种单宁酰基水解酶，该酶对带有两个苯酚基的酸，如鞣酸具有水解作用，可以一定程度上的降解植物细胞壁，具有一定的破壁效果。本专利技术所述单宁酶可由霉菌，如黑曲霉、米曲霉生产，也可以从市场购买所得；单宁酶水解释放细胞内的鞣质，可以增加提取液中酚类物质含量，从而增加提取的牡丹籽油中酚类物质的含量，增加牡丹籽油的抗氧化性，减少提取过程中牡丹籽的氧化，提高牡丹籽油的营养价值，同时可以减轻牡丹籽油的涩味，改善牡丹籽油的口感。本专利技术所采用的碱性蛋白酶，指在碱性条件下能够水解蛋白质肽键的酶，碱性蛋白酶的可以从微生物提取获得，比如芽孢杆菌、链霉菌等，或者从市场上购买所得，比如诺维信公司。IC50(halfmaximalinhibitoryconcentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。它能指示某一药物或者物质(抑制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质，比如酶，细胞受体或是微生物)的半量。IC50值可以用来衡量牡丹籽油抗氧化的能力，即能力越强，该数值越低。根据单宁酶的作用原理，利用单宁酶对植物细胞壁有一定的破坏作用，破坏植物细胞结构，提高水酶法的提取效率，并且在水酶法提取牡丹籽油的过程中，单宁酶的使用可以增加提取液和油中酚类抗氧化物质的含量，减少牡丹籽油提取过程中营养物质的损失。有益效果：本专利技术采用单宁酶结合蛋白酶，单宁酶先处理牡丹籽粉末，再用蛋白酶进行提取。单宁酶可以一定程度的破坏植物的细胞壁结构，可以提高蛋白酶的提取效率，单宁酶水解牡丹籽仁细胞内的单宁物质，破坏细胞结构，增加蛋白酶对牡丹籽细胞的破壁效果，同时单宁酶可以水解牡丹籽粉末中残留的种皮上的单宁类物质，单宁水解的物质溶解于水中，随着离心过程为除去，减少了油脂中单宁物质的含量，改善牡丹籽油的口味，同时可以省去脱皮和去苦的工艺。增加提取液中酚类物质的含量，可以更好的保护提取过程中，牡丹籽油不被氧化，增加水酶法提取的牡丹籽油的抗氧化性和营养价值。单宁酶水解鞣质可以一定程度的减少牡丹籽油中特有的涩味，改善牡丹籽油的口感。本专利技术中，牡丹籽油较单独蛋白酶的提取效率提升20%，牡丹籽油中酚类物质的含量提升了66.7%，不饱和脂肪酸含量提升5%。牡丹籽油的IC50值减少了20%，说明牡丹籽油自身的抗氧化能力大幅度提升。适合生产抗氧化活性更高，品质更好的牡丹籽油。具体实施方式牡丹籽来源：菏泽产5年以上凤丹种子，含油量：28.31%；酶来源:碱性蛋白酶购自诺维信（中国）生物技术有限公司，单宁酶购自北京卫诺恩生物技术有限公司。实施例1将牡丹籽置于50℃的恒温烘箱中烘干8h至含水量低于4%，然后将烘干的牡丹籽加入脱壳机中脱壳，用药用粉碎机进行粗磨，将牡丹籽仁磨碎，筛选目数为50目，筛选粒径小于300μm的牡丹籽粉末。精确称取50g磨碎的牡丹籽粉末，将牡丹籽粉末加入三角瓶中，按1：5的料液比加入250mL纯净水，加入牡丹籽重量1%单宁酶催化1h，酶解温度为45℃，酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种水酶法提取牡丹籽油的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)、将牡丹籽烘干，脱去外壳，粉碎得牡丹籽粉末；2)、将牡丹籽粉末加水混匀，加入单宁酶进行酶解，酶解温度为40~50℃，pH为4~6，酶解0.5~2h后，灭酶；3)、加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解温度为50~60℃，pH为7~9,酶解时间为3~5h；4)、离心分离乳化层和油层，冷冻破乳后，离心合并两次清油，获得牡丹籽油毛油；5）、对步骤4）获得的牡丹籽油毛油碱炼后，真空旋蒸干燥，除去油相中水，得到牡丹籽油。

【技术特征摘要】
1.一种水酶法提取牡丹籽油的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)、将牡丹籽烘干，脱去外壳，粉碎得牡丹籽粉末；2)、将牡丹籽粉末加水混匀，加入单宁酶进行酶解，酶解温度为40~50℃，pH为4~6，酶解0.5~2h后，灭酶；3)、加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解温度为50~60℃，pH为7~9,酶解时间为3~5h；4)、离心分离乳化层和油层，冷冻破乳后，离心合并两次清油，获得牡丹籽油毛油；5）、对步骤4）获得的牡丹籽油毛油碱炼后，真空旋蒸干燥，除去油相中水，得到牡丹籽油。2.根据权利要求1所述的一种水酶法提取牡丹籽油的方法，其特征在于，步骤1）中牡丹籽烘干至含水量不超过4%，粉碎的牡丹籽粉末颗粒不超过300μm。3.根据权利要求1所述的一种水酶法提取牡丹籽油的方法，其特征在于，步骤2）中单宁酶用量为牡丹籽粉末重量的0.1~2%。4.根据权利要求1所述的一种水酶法提取牡丹籽油的方法，其特征在于，单宁酶的酶解条件为温度45℃...

【专利技术属性】
技术研发人员：李艳，欧阳忠凯，张翔，杨一丁，李政，陈可泉，郝宁，
申请(专利权)人：南京工业大学，长沙湘之韵园林工程有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32