一种诸葛菜生物碱类提取物及其在制备保肝制品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种诸葛菜生物碱类提取物与制备工艺，及其在制备保肝制品中的应用。本发明专利技术通过水或乙醇提取诸葛菜原料，提取物再通过大孔吸附树脂或聚酰胺或其他色谱法分离纯化，得到诸葛菜生物碱类提取物。该诸葛菜生物碱类提取物具有显著的保肝活性，可以制备成任何常用制品。

A kind of extract of alkaloids from Chinese medicine and its application in preparation of liver protecting products

The invention discloses an extract of the alkaloids of the Chinese cabbage and its preparation process, and its application in the preparation of liver protecting products. The invention uses water or ethanol to extract the raw material of mass, and the extract is then separated and purified by macroporous adsorption resin or polyamide or other chromatographic methods to obtain the Alkaloid Extracts of the mass. The extract of the alkaloids of the wild vegetables has significant liver protective activity and can be prepared into any commonly used products.

【技术实现步骤摘要】
一种诸葛菜生物碱类提取物及其在制备保肝制品中的应用
本专利技术属食品医药
，具体涉及一种诸葛菜生物碱类提取物及其保肝活性，以及在制备保肝制品中的应用。
技术介绍
十字花科植物诸葛菜Orychophragmusviolaceus种子是我们在药物筛选实验中发现的一种二年生草本植物的种子。该植物广泛分布于中国东北、华北到华东、华中及西北地区，主要用于城市绿化。对该植物的全株、幼苗及种子的抗化学性肝损伤研究发现，三者对多种化学试剂造成的化学性肝损伤，均有很好的拮抗作用，因此，怀疑诸葛菜内含有保肝活性的物质，与该植物的全株与幼苗相比，诸葛菜种子是市场上常见的种子，更具有易得性。在保肝药物和保健品方面有着良好的研究开发前景。文献报道诸葛菜中主要含有黄酮类、酚酸类等化学成分。申请人通过研究确定了其所含的生物碱类成分，如新型亚精胺酰胺生物碱类成分，包括OrychophragmusineA、OrychophragmusineB、OrychophragmusineC、OrychophragmusineD、OrychophragmusineE等，和腺苷、2′-脱氧腺苷、表告依春、N-2-羟基-3-丁烯基-苯甲酰胺、2-氨基-5-羟基苯甲酸、N-苯甲酰基-表告依春、α-[(2-乙酰羧基)氨基]-苯乙酸等其他生物碱类成分。申请人通过建立简便易行经济的制备方法，分离富集了诸葛菜生物碱类提取物，并对其保肝活性进行了考察，发现其具有显著的保肝活性，为诸葛菜生物碱类提取物的制备以及其制备保肝制品中的应用提供科学依据，亦为诸葛菜综合应用开发奠定了基础。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种诸葛菜生物碱类提取物，本专利技术的另一个目的在于提供诸葛菜生物碱类提取物的制品及其在保肝药品、食品中的应用，本专利技术的第三个目的在于提供一种诸葛菜生物碱类提取物的制备方法。本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的：步骤1：取诸葛菜药材，溶剂回流提取；步骤2：色谱法纯化；该诸葛菜生物碱类提取物中总生物碱含量为5～100％；该诸葛菜生物碱类提取物中总生物碱含量优选为20～100％。将以上所得提取物，加入常规辅料，按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任意常规剂型，包括胶囊剂、片剂、丸剂、口服液体制剂、注射剂、颗粒剂、凝胶剂、缓释剂。上述提取物，可作为辅料或添加剂，加至食品、饮料及其他制品中，制成可接受的任意常规制品。上述步骤1中，诸葛菜药材用0～60％乙醇回流提取2～3次，每次提取1～2小时，合并提取液，减压回收溶剂至干，得诸葛菜水提取物或乙醇提取物。上述步骤2中，将步骤1所得水提取物或乙醇提取物加水分散溶解，以诸葛菜药材计，上样液浓度为0.08～0.25g/ml，通过大孔吸附树脂，上样量以生药量计为与0.10～0.50g/ml，吸附流速为2～9BV/h，树脂柱径高比为1∶3～10，用0～20％乙醇洗脱1～4BV进行除杂，弃去，用水洗脱3～6BV，洗脱流速为2～9BV/h，收集乙醇洗脱液，回收溶剂，干燥，即得诸葛菜生物碱类提取物。上述步骤2中所用大孔吸附树脂优选为AB-8、HPD-400、HPD-826型等弱极性或中等极性大孔吸附树脂。本专利技术诸葛菜生物碱类提取物主要包括生物碱类物质，如新型亚精胺酰胺生物碱类成分，包括OrychophragmusineA、OrychophragmusineB、OrychophragmusineC、OrychophragmusineD、OrychophragmusineE等，和腺苷、2′-脱氧腺苷、表告依春、N-2-羟基-3-丁烯基-苯甲酰胺、2-氨基-5-羟基苯甲酸、N-苯甲酰基-表告依春、α-[(2-乙酰羧基)氨基]-苯乙酸等其他生物碱类成分。诸葛菜生物碱类提取物中生物碱类成分百分含量的总和为5～100％(w/w)。本专利技术诸葛菜生物碱类提取物为诸葛菜经乙醇、或其他醇类、稀醇、或其他有机溶剂或水提取再通过大孔吸附树脂或其他色谱方法，如聚酰胺色谱法等，或溶剂法，如溶剂萃取法等纯化得到，经保肝药效实验表明，具有显著的保肝作用。实验例诸葛菜生物碱类提取物保肝活性利用CCL4和酒精造成肝损伤小鼠模型，对诸葛菜生物碱类提取物保肝作用进行研究，生物碱类提取物给药剂量按生药量计算，结果发现生物碱类提取物保肝活性显著，且活性较联苯双酯强。如表1-2所示：通过CCL4和酒精造模后，模型组大鼠肝脏指标ALT(丙氨酸转氨酶)和AST(谷草转氨酶)均显著高于正常对照组，说明肝损伤模型造模成功。阳性对照药物联苯双酯组显著降低肝脏中ALT和AST(P＜0.05)，本试验结果与本品的作用机制及文献报道结果基本一致。在CCL4造肝损伤模型中，受试药高剂量组极显著降低肝脏中ALT和AST(P＜0.01)，中剂量组和低剂量组显著降低肝脏中ALT和AST(P＜0.05)，表明受试药具有显著的保肝作用。在酒精造肝损伤模型中，受试药低剂量组极显著降低肝脏中ALT和AST(P＜0.01)，中剂量组和高剂量组显著降低肝脏中ALT和AST(P＜0.05)，表明受试药具有显著的保肝作用。表1诸葛菜生物碱类提取物对CCL4肝损伤小鼠ALT、AST的影响(n＝10)表2诸葛菜生物碱类提取物对酒精性肝损伤小鼠ALT、AST的影响(n＝10)注：##.与正常组比，差异极显著(p＜0.01)；#.与正常组比，差异显著(p＜0.05)；**.与模型组比，差异极显著(p＜0.01)；*.与模型组相比，差异显著(p＜0.05)。含有本专利技术提出的提取物的制剂可根据本领域公知的方法制备。可将本专利技术提出的提取物与一种或多种固体或液体药物或赋形剂和/或辅料结合，制成可作为人药或兽药或其他健康产品使用的适当的施用形式或剂量形式。含有本专利技术提出的提取物的制剂，可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、透皮、皮下、皮内、腹膜、直肠等。给药剂型可以是液体剂型、固体剂型，如液体剂型可以是真溶液剂型、胶体溶液剂型、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。液体剂型形式可以是糖浆剂、酒剂、注射溶液、非水溶液、悬浮液或乳液等；固体剂型例如片剂、锭剂、胶囊、滴丸剂、丸剂、颗粒剂、粉剂、霜剂、栓剂、散剂、膏剂等。含有本专利技术提出的提取物的制剂，可以是普通制剂，也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统等。为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子包括，赋形剂如碳酸钙、乳糖、磷酸钙、磷酸钠；稀释剂与吸收剂如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝、葡聚糖、胶态二氧化硅、阿拉伯胶、明胶、三硅酸镁、角蛋白等；湿润剂与粘合剂如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂如干燥淀粉、海藻酸钠、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可酯、氢化植物油等；吸收促进剂如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂如滑石粉、三乙胺硬脂酸镁、三乙胺硬脂酸、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种诸葛菜生物碱类提取物，其特征在于该提取物的制备方法包括如下步骤：步骤1：取诸葛菜药材，溶剂回流提取；步骤2：色谱法纯化；该诸葛菜生物碱类提取物中总生物碱含量为5～100％。

【技术特征摘要】
1.一种诸葛菜生物碱类提取物，其特征在于该提取物的制备方法包括如下步骤：步骤1：取诸葛菜药材，溶剂回流提取；步骤2：色谱法纯化；该诸葛菜生物碱类提取物中总生物碱含量为5～100％。2.如权利要求1所述的诸葛菜生物碱类提取物，其特征在于步骤1中，诸葛菜药材用0～60％乙醇回流提取2～3次，每次提取1～2小时，合并提取液，减压回收溶剂至干，得诸葛菜水提取物和乙醇提取物。3.如权利要求1所述的诸葛菜生物碱类提取物，其特征在于步骤2中，将步骤1所得水提取物或乙醇提取物加水分散溶解，以诸葛菜药材计，上样液浓度为0.08～0.25g/ml，通过大孔吸附树脂或聚酰胺或其它色谱柱，上样量以生药量计为0.10～0.50g/ml，吸附流速为2～9BV/h，树脂柱径高比为1∶3～10，用水洗脱1～4BV进行除杂，弃去，用10～60％乙醇洗脱3～6BV，洗脱流速为2～9BV/h，收集乙醇洗脱液，回收溶剂，干燥，即得诸葛菜生物碱类提取物。4.如权利要求1～3所述的诸葛菜生物碱类提取物，其特征在于加入常规辅料，按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任意常...

【专利技术属性】
技术研发人员：许旭东，朱乃亮，张宝旭，曹丽，吴海峰，马国需，李朋飞，孙忠浩，胡美赓，
申请(专利权)人：中国医学科学院药用植物研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11