一种利用唐鱼监测水质毒性的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用唐鱼监测水质毒性的方法，包括以下步骤：S1、将唐鱼进行驯养，选择性成熟明显的亲鱼配对繁殖；S2、将唐鱼受精卵分别暴露在标准稀释水与不同稀释浓度受试水样中进行急性毒性试验，统计受精卵的孵出数和死亡数，计算48h半数致死浓度；S3、根据48h半数致死浓度确定暴露浓度，将唐鱼受精卵分别暴露在标准稀释水与不同暴露浓度受试水样中，暴露包括胚胎发育阶段暴露和仔鱼生长阶段暴露，统计唐鱼受精卵及仔鱼存活、异常情况，进行显著性差异比较，确定产生显著效应的最低受试水样浓度，判断水质生物毒性。本发明专利技术能够反应水体的综合毒性，提供全面的综合评价，可对大量未知水质毒性状况进行有效的检测。

【技术实现步骤摘要】
一种利用唐鱼监测水质毒性的方法
本专利技术涉及水质监测
，尤其涉及一种利用唐鱼监测水质毒性的方法。
技术介绍
现今社会的水污染问题越来越严重，影响到了人类生活与生态平衡，饮用水安全也成为人们越来越关注的问题之一，因此，很多学者致力于水质监测方法的研究。目前，现存的方法包括理化分析法和生物监测法。生物监测法通过分析水生生物的行为及生理特征变化判断水质状况，利用生物的富集作用可以检测出水体中微量的毒性元素，比传统的理化分析法更加快速灵敏、实时有效。生物监测法中模式生物的选择对于监测的灵敏准确度有重要影响。模式生物的选择需要考虑区域生态相关性。中国是一个幅员辽阔、生态系统类型完整的国家，其中生态特殊性和脆弱性在物种标准化过程中具有特殊意义。唐鱼属鲤科，唐鱼属，是分布在广州地区特有的一种小型鱼类。唐鱼具有饲养要求低、病害少、管理条件简单，产卵量大，可连续产卵，繁殖周期短，雌雄异体，性成熟后易区分性别，卵膜通透，易于胚胎发育观察等优点，作为一种良好的本土生物毒性测试种具有广泛的应用前景。
技术实现思路
基于
技术介绍
存在的技术问题，本专利技术提出了一种利用唐鱼监测水质毒性的方法，能够反应水体的的综合毒性，提供全面的综合评价。本专利技术提出的一种利用唐鱼监测水质毒性的方法，包括以下步骤：S1、将唐鱼进行驯养，选择性成熟明显的唐鱼亲鱼进行配对繁殖；S2、将唐鱼受精卵分别暴露在标准稀释水与不同稀释浓度受试水样中进行急性毒性试验，统计受精卵的孵出数和死亡数，计算48h半数致死浓度；S3、根据48h半数致死浓度确定暴露浓度，将唐鱼受精卵分别暴露在标准稀释水与不同暴露浓度受试水样中，暴露包括胚胎发育阶段暴露和仔鱼生长阶段暴露，统计唐鱼受精卵及仔鱼存活、异常情况，进行显著性差异比较，确定产生显著效应的最低受试水样浓度，判断水质生物毒性。采用上述技术方案产生的有益效果在于：本专利技术选用唐鱼作为模式生物用于水质检测，以唐鱼胚胎和仔鱼的存活及异常情况来评价水样的生物毒性，能够反应水体的的综合毒性，提供全面的综合评价，可对大量未知水质毒性状况进行有效的检测。优选地，所述唐鱼驯养是将唐鱼置于连续曝气3d以上的自来水中、水温为26-28℃、pH为7.5-8.5、硬度为200mg/L，养殖密度小于100尾/100L，每天喂食，清除粪便及食物残渣，保持水质清洁。该驯养条件能够保证得到健康的唐鱼受精卵，提高试验的精准度。优选地，所述唐鱼受精卵选用唐鱼鱼卵受精后8h内的受精卵。唐鱼鱼卵受精后应尽可能快的开始试验，在胚胎开始分裂前或胚胎开始分裂后即将胚胎放入试验溶液，最迟不能晚于卵受精后8h，能够有效评估受试水样对鱼卵的生物毒性大小。优选地，所述配对繁殖为单体配对或群体配对。采用单体配对时，雌雄比例为1：1，采用群体配对时，雌雄比例为1.2：1。优选地，所述标准稀释水中唐鱼受精卵的孵化率≥80％，孵化后仔鱼存活率≥80％。保证标准稀释水中唐鱼受精卵孵化率及仔鱼存活率，可以排除可能由于标准稀释水所引起的试验误差，从而能够更好的反应比较不同浓度的受试水样对生物的毒性危害监测结果。优选地，所述暴露浓度≤48h半数致死浓度。优选地，所述仔鱼生长阶段暴露采用流水式试验体系。相比较半静态试验体系，流水式试验体系能够提供稳定的受试水样浓度，保证受试水样中的毒害物质对唐鱼仔鱼持续不断的作用，且水中溶解氧高，使得唐鱼仔鱼能够对被试物质提供更好的敏感性。优选地，所述受精卵及仔鱼存活、异常情况统计包括累积死亡率、试验结束时的健康仔鱼数、开始孵化出和全部孵化出的时间、孵化过程中损伤胚胎的数量、孵出时畸形仔鱼的数量、每天孵化的仔鱼数、试验结束时存活个体的长度和重量、畸形或异常表征的幼鱼数量、呈现异常行为的仔鱼数量、试验结束时雌雄鱼性别比率。对多个因素综合考虑，提供全面的综合评价。优选地，所述胚胎发育阶段的光照周期为夏季光照12h，冬季光照16h。具体实施方式下面，通过具体实施例对本专利技术的技术方案进行详细说明。实施例本专利技术提出的一种利用唐鱼监测水质毒性的方法，包括以下步骤：S1、将唐鱼置于连续曝气3d以上的自来水中、水温为26-28℃、pH为7.5-8.5、硬度为200mg/L，养殖密度小于100尾/100L，每天喂食，清除粪便及食物残渣，保持水质清洁，选择性成熟明显的唐鱼亲鱼进行配对繁殖；配对繁殖选择单体配对或群体配对，采用单体配对时，控制雌雄比例为1：1，采用群体配对时，控制雌雄比例为1.2：1。S2、将唐鱼鱼卵受精后8h内的受精卵分别暴露在标准稀释水与不同稀释浓度受试水样中进行急性毒性试验，采用标准稀释水配制不同暴露浓度受试水样；以标准稀释水为对照组，受试水样为试验组，统计受精卵的孵出数和死亡数，其中，应确保对照组中受精卵的孵化率≥80％，否则应重新调整标准稀释水或更换受精卵，计算48h半数致死浓度；S3、根据48h半数致死浓度确定暴露浓度，暴露浓度≤48h半数致死浓度，采用标准稀释水配制不同暴露浓度受试水样，将唐鱼鱼卵受精后8h内的受精卵分别暴露在标准稀释水与不同暴露浓度受试水样中，受精卵随机分配到各浓度组中，其数量应满足统计学要求，当难以获得足够数量的同一批卵时，尽可能平均分配各批次鱼卵，且至少应在3个平行试验容器间平均分配；暴露包括胚胎发育阶段暴露和仔鱼生长阶段暴露，总暴露时间为末条仔鱼孵化后7-10d内；其中胚胎发育阶段的光照周期为夏季光照12h，冬季光照16h，仔鱼生长阶段暴露采用流水式试验体系；以标准稀释水为对照组，受试水样为试验组，统计受精卵及仔鱼存活、异常情况，具体包括：累积死亡率、试验结束时的健康仔鱼数、开始孵化出和全部孵化出的时间、孵化过程中损伤胚胎的数量、孵出时畸形仔鱼的数量、每天孵化的仔鱼数、试验结束时存活个体的长度和重量、畸形或异常表征的幼鱼数量、呈现异常行为的仔鱼数量、试验结束时雌雄鱼性别比率；并且，应确保对照组中受精卵的孵化率≥80％，孵化后仔鱼存活率≥80％；对两组进行显著性差异比较，确定产生显著效应的最低受试水样浓度，判断水质生物毒性。本专利技术的检测方法用于受试水样的水质分析指标包括：重金属(如Cu、Pb、Zn、Hg、Cd、Ni)，主要阴、阳离子(如Ca、Mg、Na、K、Cl、SO4)，农药，总有机碳和悬浮物。应用案例：采集珠三角地区某电镀工业园5家电镀企业排水，采集后首先经过60μm的浮游生物网过滤除去外源生物，立即测定常规指标后冷藏保存，指标检测结果见表1。表1常规指标检测结果样品PH溶解氧(mg/L)电导率样品17.6099.523.78mS/cm样品27.1617.124.04mS/cm样品37.23613.994.87mS/cm样品47.4716.95131.4μS/cm样品57.365121.122639μS/cm对水样首先进行急性毒性预实验，设置100％、10％、1％三个浓度梯度，一个空白对照，每个浓度均设定12个平行。暴露时间为48h，每隔24h观察鱼卵情况，记录鱼卵死亡及非正常情况，及时移除死亡鱼卵。急性毒性测试结果见表2，利用SOFTTOXTM软件计算48h急性毒性半数致死浓度LC50值。表2急性毒性测试结果根据急性毒性LC50值情况，设置慢性毒性浓度区间，共设定4个浓度，分别为50％，10％，1％，0.1％，一个空本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用唐鱼监测水质毒性的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将唐鱼进行驯养，选择性成熟明显的唐鱼亲鱼进行配对繁殖；S2、将唐鱼受精卵分别暴露在标准稀释水与不同稀释浓度受试水样中进行急性毒性试验，统计受精卵的孵出数和死亡数，计算48h半数致死浓度；S3、根据48h半数致死浓度确定暴露浓度，将唐鱼受精卵分别暴露在标准稀释水与不同暴露浓度受试水样中，暴露包括胚胎发育阶段暴露和仔鱼生长阶段暴露，统计唐鱼受精卵及仔鱼存活、异常情况，进行显著性差异比较，确定产生显著效应的最低受试水样浓度，判断水质生物毒性。

【技术特征摘要】
1.一种利用唐鱼监测水质毒性的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将唐鱼进行驯养，选择性成熟明显的唐鱼亲鱼进行配对繁殖；S2、将唐鱼受精卵分别暴露在标准稀释水与不同稀释浓度受试水样中进行急性毒性试验，统计受精卵的孵出数和死亡数，计算48h半数致死浓度；S3、根据48h半数致死浓度确定暴露浓度，将唐鱼受精卵分别暴露在标准稀释水与不同暴露浓度受试水样中，暴露包括胚胎发育阶段暴露和仔鱼生长阶段暴露，统计唐鱼受精卵及仔鱼存活、异常情况，进行显著性差异比较，确定产生显著效应的最低受试水样浓度，判断水质生物毒性。2.根据权利要求1所述的利用唐鱼监测水质毒性的方法，其特征在于，所述唐鱼驯养是将唐鱼置于连续曝气3d以上的自来水中、水温为26-28℃、pH为7.5-8.5、硬度为200mg/L，养殖密度小于100尾/100L，每天喂食，清除粪便及食物残渣，保持水质清洁。3.根据权利要求1所述的利用唐鱼监测水质毒性的方法，其特征在于，所述唐鱼受精卵选用唐鱼鱼卵受精后8h内的受精卵。4.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘芸，侯丽萍，许宜平，
申请(专利权)人：环境保护部华南环境科学研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44