一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法技术

本发明专利技术涉及一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，包括：（１）待分离样品的准备：采集绢纺原料腐化练练液或绢纺厂土样；（２）脱胶菌株的初步筛选：采用高蛋白培养基平板法，将培养基Ａ和样品液在平板上涂布接种、培养，得到产生透明圈的菌落，将菌落接种于牛肉膏蛋白胨斜面上，于冰箱中保存；（３）脱胶菌株的复筛：将上述菌种接种于装有培养基Ｂ的三角瓶，置于摇床上培养，得到作用于蚕丝而使原料残胶率为最低的菌种，即为脱胶菌种；（４）将分离出的脱胶菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上，于冰箱中１～１０℃保存。本发明专利技术筛选出的菌株可直接作用于蚕丝精练脱胶，精练时间短，环境污染少，生产成本低，该分离方法效果明显、易观察、操作简便。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属菌株分离的制备领域，特别是涉及。
技术介绍
蚕丝精练的目的是去除原料中的大部分丝胶、油脂和杂质等，充分发挥蚕丝纤维固有 的光泽和手感，同时尽量保持蚕丝原有的物理机械性能。精练的质量直接影响倒后续工序 能否正常进行、产品质量的优劣及生产成本的高低，精练方法的不同影响到工人的劳动强 度、劳动环境及对环境的污染。目前，蚕丝生产中常用的精练方法有皂碱法和生物酶法。皂碱法是传统的精练方法， 采用化学药剂促使蚕丝脱胶除油，速度快、产量高，但对纤维损伤大，且污染环境严重。 生物酶法就是用生物酶制剂直接作用于蚕丝原料，使其脱胶除油，可提高劳动生产率、减 少环境污染，对纤维损伤也小，但现有的生物酶制剂成本高，可选品种少，不适于工厂大 批量生产。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供，本专利技术筛选 出的菌株可直接作用于蚕丝精练脱胶，能有效提高精练质量，减少精练时间，提高劳动生 产率，减少环境污染，降低生产成本，该分离方法效果明显、易观察、操作简便。本专利技术的，包括(1) 待分离样品的准备采集绢纺原料腐化练练液或绢纺厂土样；(2) 脱胶菌株的初歩筛选采用高蛋白培养基平板法，将培养基A和样品液在平板上涂布接种、培养，得到产生透明圈的菌落，将菌落接种于牛肉膏蛋白胨斜面上37'C恒温培养ld，于冰箱中1 1(TC保存；(3) 脱胶菌株的复筛将上述菌种接种于装有培养基B的三角瓶，置于摇床上培养， 得到作用于蚕丝而使原料残胶率为最低的菌种，即为脱胶菌种；(4) 将分离出的脱胶菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上37'C恒温培养ld，于冰 箱中1 1(TC保存。所述的培养基A配方为可溶性淀粉1.0 10.0g，酵母高1.0 5.0g，酪蛋白5.0 10.0g, KH2PO40.1 2.0g， MgSO40.1 l,0g，琼脂15.0 20.0g， pH6.0 9.0，水lOOOmL;所述的培养基B配方为蚕丝原料25.0g， K2HP04 0.2 5.0g， KH2P04 L0 10.0g， NaCl L0 5.0g， pH6.0 8.0，水lOOOmL;所述的牛肉膏蛋白胨培养基配方为牛肉膏1.0 5.0g，蛋白胨1.0 10.0g, NaCl 1.0 6.0g，琼脂15.0 20.0g， pH6.0 9.0，水1000mL;所述步骤(2)中的平板涂布接种的接种量为0.05 0.2mL，接种温度30 45°C ，培养 时间1 3d;所述步骤(3)中的摇床转速为100 300r/min，培养温度为30 45°C，培养时间l 5d;所述的培养基A，培养基B，三角瓶，牛肉膏蛋白胨斜面分别在灭菌锅内灭菌20 30min，灭菌锅压力为0.7 1.2Kg/cm2。 有益效果(1) 本专利技术筛选出的菌株可直接作用于蚕丝精练脱胶，能有效提高精练质量，减少精练时间，提高劳动生产率，减少环境污染，降低生产成本；(2) 该分离方法效果明显、易观察、操作简便。具体实施例方式下面结合具体实施例，进一歩阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而 不用于限制本专利技术的范围。此外应理解，在阅读了本专利技术讲授的内容之后，本领域技术人 员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定 的范围。实施例1(1) 待分离样品的准备采集绢纺原料腐化24h后的液体，供分离脱胶菌株用(2) 脱胶菌株的初步筛选脱胶菌株的筛选方法用高蛋白平板涂布分离法，将培养皿及培养基A分别于1Kg/cn^灭菌20min，灭菌后倒平板，采用涂布法接种，接种量为 O.lmL， 37°C，培养l 3d,得到五种形态的脱胶菌的菌落；培养基A配方为可溶性淀粉8.0g，酵母高3.0g，酪蛋白6.0g， KH2PO41.0g， MgS04 0.2g，琼脂20.0g， pH7.0，水lOOOmL;(3) 脱胶菌株的复筛将摇瓶及培养基B分别于lKg/cr^灭菌20min，然后接种，再 将接种好的摇瓶置于摇床上培养，温度37。C,转速200r/min，培养72h后取出，测定原料的残胶率，得到残胶率最低的菌株，培养基B配方为蚕丝原料lO.Og， K2HPO41.0g， KH2PO44.0g, NaC12.0g， pH7.0， 水lOOOmL;(4)通过上述方法得到优势脱胶菌株。实施例2(1) 待分离样品的准备采集绢纺厂土样lg，加入无菌水99mL，振荡稀释后供分离 脱胶菌用；(2) 脱胶菌株的初歩筛选脱胶菌株的筛选方法用高蛋白平板涂布分离法，将培养 皿及培养基A分别于1Kg/ci^灭菌20min，灭菌后倒平板，采用涂布法接种，接种量为 0.2mL， 39°C，培养3 5d。得到四种形态的脱胶菌的菌落；培养基A配方为可溶性淀粉10.0g，酵母高5.0g,酪蛋白10.0g， KH2P04 2.0g， MgS04 0.5g，琼脂18.0g， pH8.0，水1000mL;G)脱胶菌株的复筛将摇瓶及培养基B分别于lKg/cn^灭菌20min，然后接种，再 将接种好的摇瓶置于摇床上培养，温度39。C,转速220r/min，培养84h后取出，测定原 料的残胶率，得到残胶率最低的菌株；培养基B配方为蚕丝原料25.0g， K2HPO42.0g， KH2PO46.0g， NaCl l.Og， pH8.0， 水濯OmL;(4)通过上述方法得到优势脱胶菌株。权利要求1. ，包括(1)待分离样品的准备采集绢纺原料腐化练练液或绢纺厂土样；(2)脱胶菌株的初步筛选采用高蛋白培养基平板法，将培养基A和样品液在平板上涂布接种、培养，得到产生透明圈的菌落，将菌落接种于牛肉膏蛋白胨斜面上37℃恒温培养1d，于冰箱中1～10℃保存；(3)脱胶菌株的复筛将上述菌种接种于装有培养基B的三角瓶，置于摇床上培养，得到作用于蚕丝而使原料残胶率为最低的菌种，即为脱胶菌种；(4)将分离出的脱胶菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上37℃恒温培养1d，于冰箱中1～10℃保存。2. 根据权利要求1所述的，其特征在于所述的培养基A配方为可溶性淀粉1.0 10.0g，酵母高1.0 5.0g，酪蛋白5.0 10.0g， KH2PO40.1 2.0g， MgSO40.1 1.0g，琼脂15.0 20.0g, pH6.0 9.0，水1000mL。3. 根据权利要求1所述的，其特征在于所述的培养 基B配方为蚕丝原料25.0g， K2HP04 0.2 5.0g， KH2P04 1.0 10.0g， NaCl 1.0 5.0g， pH6.0 8.0，水1000mL。4. 根据权利要求1所述的，其特征在于所述的牛肉膏蛋白胨培养基配方为牛肉膏1.0 5.0g，蛋白胨1.0 10.0g，NaCl 1.0 6.0g，琼脂15.0 20.0g， pH6.0 9.0，水1000mL。5. 根据权利要求1所述的，其特征在于所述步骤(2) 中的平板涂布接种的接种量为0.05 0.2mL，接种温度30 45r，培养时间1 3d。6. 根据权利要求1所述的，其特征在于所述步骤(3) 中的摇床转速为100~300r/min,培养温度为30 45°C，培养时间l 5d。7. 根据权利要求1所述的，其特征在于所述的培养 基A,培养基B，三角瓶，牛肉膏蛋白胨斜面分别本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，包括：　（１）待分离样品的准备：采集绢纺原料腐化练练液或绢纺厂土样；　（２）脱胶菌株的初步筛选：采用高蛋白培养基平板法，将培养基Ａ和样品液在平板上涂布接种、培养，得到产生透明圈的菌落，将菌落接种 于牛肉膏蛋白胨斜面上３７℃恒温培养１ｄ，于冰箱中１～１０℃保存；　（３）脱胶菌株的复筛：将上述菌种接种于装有培养基Ｂ的三角瓶，置于摇床上培养，得到作用于蚕丝而使原料残胶率为最低的菌种，即为脱胶菌种；　（４）将分离出的脱胶菌株接种 到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上３７℃恒温培养１ｄ，于冰箱中１～１０℃保存。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：单世宝，杨雪霞，劳继红，李东梅，
申请(专利权)人：东华大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]