The invention discloses a primer, a method and an application for detecting chicken RNA Chr9:10814512|10838667 gene. The primers of the detection include the upstream of the chicken ring RNA Chr9:10814512|10838667 ring upstream primer and the chicken ring RNA Chr9:10814512|10838667 ring downstream primers, and their nucleotide sequences, such as SEQ ID NO.1 and SEQ ID ID NO.2, are shown respectively. By using the primers and methods, the expression of the associated ring RNA in the infection resistance of Salmonella enteritis can be accurately detected, which provides a theoretical basis and scientific basis for screening and breeding resistance breeding of Salmonella enteritis.
【技术实现步骤摘要】
鸡环RNAChr9:10814512|10838667基因检测引物、方法及应用
本专利技术属于基因工程
,具体地说,涉及一种鸡环RNAChr9:10814512|10838667基因的检测引物、方法及应用。
技术介绍
肠炎沙门氏菌(Salmonellaenteritidis,SE)是常见的人畜共患病原菌,因其无宿主特异性,因此不仅能够引起家禽急性胃肠炎等疾病甚至发病致死,给养禽业造成巨大经济损失,而且严重危害人类健康,造成食物中毒,是影响人身心健康的重要病原菌之一。有关报道指出,2004年期间,在美国每1百万人中有19000人因感染沙门氏菌而住院,多达300人因沙门氏菌感染出现死亡;在欧盟,2010年间约有99020起因沙门氏菌感染引起的食源性疾病爆发。家禽及其相关加工产品是肠炎沙门氏菌的主要传染源,盲肠是其主要宿主,肠炎沙门氏菌能够透过蛋壳进入鸡蛋产品中,且能在生殖道中寄存繁殖。目前控制沙门氏菌感染的主要方法是使用疫苗和抗生素,但这不能从根本上解决问题,而且抗生素的大量使用会引起食品安全问题及细菌的耐药性,且造成菌株耐药性增强。随着分子遗传学的发展,提高畜禽对疾病和病原的遗传抗性,为控制沙门氏菌的感染提供新的可能性。环RNA是一种新型的非编码RNA。环RNA呈封闭环状结构,不受RNA外切酶影响,表达更稳定,不易降解。不含有5’-3’极性。但是环RNA在动物中具有组织特异性的广泛丰富的表达。在功能上,近年的研究表明,环RNA分子富含microRNA(miRNA)结合位点,在细胞中起到miRNA海绵(miRNAsponge)的作用,进而解除miRNA对 ...
【技术保护点】
1.一种鸡环RNA Chr9:10814512|10838667基因的检测引物,其特征在于,包括鸡环RNA Chr9:10814512|10838667环状上游引物和鸡环RNA Chr9:10814512|10838667环状下游引物,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
【技术特征摘要】
1.一种鸡环RNAChr9:10814512|10838667基因的检测引物,其特征在于,包括鸡环RNAChr9:10814512|10838667环状上游引物和鸡环RNAChr9:10814512|10838667环状下游引物,其核苷酸序列分别如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。2.一种鸡环RNAChr9:10814512|10838667基因的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、待测样本RNA的提取;步骤2、进行反转录得到cDNA;步骤3、用权利要求1中所述的引物,对待测样本cDNA进行定量PCR扩增,得到PCR扩增产物;步骤4、采用2-ΔΔCT方法计算基因相对表达量,具体计算公式如下:ΔCT=CT目的基因-CTGAPDH,ΔΔCT=ΔCT目的基因-ΔCT参照基因;其中,ΔCT代表所需验证基因的CT值减去内参基因的CT值;CT目的基因代表所需验证基因的CT值;CTGAPDH代表内参基因的CT值;ΔΔCT代表目的基因的ΔCT值减对照组目的基因ΔCT的平均值;ΔCT目的基因代表目的基因的ΔCT值;ΔCT参照基因代表对照组目的基因ΔCT的平均值;步骤5、根据PCR扩增产物及基因相对表达量判断待测样本是否含有鸡环RNAChr9:10814512|10838667基因及其表达情况。3.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述步骤1中的待测样本RNA的提取具体为:采用Trizol法提取样品总RNA,抽提所得...
【专利技术属性】
技术研发人员:李显耀,郑林娜,刘丽英,王园美,
申请(专利权)人:山东农业大学,
类型:发明
国别省市:山东,37
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