一种复合菌制剂以及利用其制备复合菌发酵饲料的方法技术

本发明专利技术涉及一种复合菌制剂，由唾液乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌组成，三种菌的质量比为2：2：1。制备方法：将唾液乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌分别经培养基活化后，接种于发酵培养液中，静置培养，当菌体浓度均达到对数生长期1×109～2.94×109cfu/ml时，终止发酵，分别得到三种菌液，将3种菌液以质量比2：2：1的比例混合，即得。本发明专利技术进一步将该复合菌制剂用于制作育肥猪发酵料，该发酵饲料可有效改善育肥猪肉品质，降低养殖过程中的饲料成本，促进育肥猪肠道黏膜及内容物中有益菌的相对丰度，通过竞争机制抑制有害菌的增殖，以调节肠道微生态，保障健康，从而降低饲养过程中的淘汰率，节约生产成本。 1

【技术实现步骤摘要】
一种复合菌制剂以及利用其制备复合菌发酵饲料的方法
本专利技术涉及一种复合菌制剂，属于饲料添加剂领域。
技术介绍
目前，在畜牧生产中使用的非营养饲料添加剂主要包括有饲用抗生素、驱虫保健剂、饲料保存剂和其他添加剂。由于全球各个国家对食品和环境安全的要求日益严苛，动物饲料的无抗化已成趋势；益生菌作为一类新型的饲料添加剂，具有无毒、无污染、无残留等对环境压力小的特点的同时，可提高动物的免疫力，提高动物的生产性能，因而，益生素被认为是一类在养殖业中具有广泛应用前景的饲用添加剂。在实际饲养过程中发现，直接使用的益生素产品存在货架期短、效果不稳定等问题。因此，为避免这类问题发生，目前生产中常用益生素发酵饲料。发酵饲料是一类经过益生菌发酵饲料后形成的新型饲料，这类饲料中的益生素发酵产物可直接或间接为宿主提供营养物质，促进宿主生长发育；并且其中的益生菌可在消化道内阻止有害菌定植，保障宿主消化道微生态平衡；而且通过发酵还可减少饲料中的抗营养因子，从而提高饲料中养分利用率，减少饲料浪费。目前，发酵饲料已成为饲料产业中的一个新发展方向，养殖者希冀依靠上述发酵饲料的优势，解决现代养猪业中存在的肠道健康与肉品质不佳的问题。然而，由于当前市场上销售的发酵饲料生产菌株的背景资料不清楚，菌株的培养环境、作用机制及代谢产物不明，结果直接造成了发酵饲料产品质量参差不齐和使用效果不稳定的问题，最终给当前发酵饲料的大面积推广带来负面影响。因此，有必要利用分离、筛选及优化等手段获得生产发酵饲料的优良菌种，通过复合配伍，在源头上解决当前市场上销售的大多发酵饲料存在的质量不佳和功能特性不明的问题。专利技术内容本专利技术的目的在于解决现有技术的不足，提供一种复合菌制剂，其可改善育肥猪肉品质及肠道微生态健康。本专利技术的另一个目的还在于提供该复合菌制剂的制备方法。为解决上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种复合菌制剂，由唾液乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌组成；进一步，所述复合菌制剂中，益生菌的总数量在1×109～2.94×109cfu/g；进一步，所述复合菌制剂中，唾液乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌的质量比为2：2：1。所述唾液乳杆菌为NO.L79的唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)、枯草芽孢杆菌为NO.B1121的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、酿酒酵母菌为NO.S1145的酿酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae)。本专利技术还提供上述复合菌制剂的制备方法，包括如下步骤：(1)取唾液乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌分别接种于MRS培养基、BPY培养基、YPD培养基中活化后，取活化菌液分别接种于发酵培养液中，37℃培养，当菌体浓度均达到对数生长期1×109～2.94×109cfu/ml时，终止发酵，分别得到唾液乳杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液和酿酒酵母菌菌液；(2)将唾液乳杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液和酿酒酵母菌菌液以质量比2：2：1的比例混合，即得。利用上述复合菌制剂制备复合菌发酵饲料的方法：将复合菌制剂以0.1～0.5％的添加量加入到育肥猪全价日粮中，调节饲料湿度为30～50％，37℃密封发酵48h，得到发酵料，然后将发酵料与全价日粮以1：4的质量比混合，即得复合菌发酵饲料。有益效果：本专利技术的复合菌制剂可用作育肥猪发酵饲料的添加剂，其在不影响育肥猪生长性能、健康状况和胴体品质的情况下，有效降低饲料成本，并改善育肥猪背最长肌品质和肠道健康，并且添加量低。具体实施方式根据下述实施例，可以更好地理解本专利技术。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本专利技术，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本专利技术。实施例1制备复合菌制剂：(1)将三株菌[NO:L79的唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)、枯草芽孢杆菌为NO:B1121的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、酿酒酵母菌为NO:S1145的酿酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae)]分别接种于MRS培养基、BPY培养基、YPD培养基中活化后，再接种于发酵培养液中，37℃恒温培养，唾液乳杆菌静置，酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌置于37℃摇床150r/min培养，使菌体浓度均达到对数生长期1×109cfu/ml；分别得到唾液乳杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液和酿酒酵母菌菌液。以唾液乳杆菌为例，在MRS固体培养基中进行划线培养，37℃培养24h，挑取菌落结晶进行镜检；检测菌液浓度超过20亿/毫升即可使用；所述MRS培养基：葡萄糖2.0％、柠檬酸钠0.2％、乙酸钠0.5％、磷酸氢二钾0.5％、硫酸锰0.02％、硫酸镁0.05％、蛋白胨1.0％、牛肉膏1.0％、酵母膏0.5％、吐温800.1％；BPY培养基：牛肉膏0.05％、蛋白胨1.0％、酵母膏0.05％、葡萄糖0.05％、氯化钠0.05％；YPD培养基：酵母膏1.0％、蛋白胨2.0％、葡萄糖2.0％；固体培养基加1.5％琼脂粉。培养基灭菌条件为0.10-0.15MPa，121℃灭菌20min。(2)将唾液乳杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液和酿酒酵母菌菌液以质量比2：2：1的比例混合，即得复合菌制剂。制备复合菌发酵饲料：将上述复合菌制剂以0.2％的添加量加入到育肥猪全价日粮(玉米67％、麸皮10％、豆粕18％、预混料5％)中，调节饲料湿度为30-50％，37℃密封发酵48h，得到发酵料，然后将发酵料与全价日粮以1：4的质量比混合，即得发酵饲料。应用试验：试验方法：选取24头初始体重为66.5±2.0kg的杜长大三元杂交育肥猪，随机分为试验组和对照组2组，每组4个重复(圈)，每个重复3头猪。其中试验组饲喂实施例1所得复合菌发酵饲料，对照组饲喂基础日粮。两种日粮配方的营养成分均满足NRC(2012)育肥猪的营养需求。饲养期为28天，每天饲喂两次，保证自由采食和饮水，定期消毒，保持圈舍通风和清洁；饲养试验结束当天，将试验猪禁饲12h后称量每头猪的宰前活重，禁饲期间保证自由饮水；测试育肥猪的生长性能指标；随后，每个重复抽取体重接近于平均体重的1头猪(4头/处理)，按照常规流程进行屠宰，检验检疫后测定胴体性状指标，并取大块背最长肌肉样保存于4℃冰盒中，用于肉品质测定，解剖腹部收集结肠黏膜及内容物，液氮冻存。1.生长性能指标以重复(圈)为单位，记录每圈猪的初始体重和饲养期后的末重，以及试养期间每圈猪的总饲料采食量，依据这些数据计算平均日增重(averagedailyweightgain，ADG)，平均日采食量(averagedailyfeedintake，ADFI)和料重比(F/G)。平均日增重＝每圈猪总终末体重–每圈猪总初始体重/3头猪/28天；平均日采食量＝每圈猪总饲料采食量/3头猪/28天；料重比＝平均日采食量/平均日增重。测试结果见表1：表1复合菌发酵饲料对育肥猪生长性能的影响注：表中所有指标均是以圈舍为单位进行统计分析(n＝4)。由表1可知：与采食常规基础日粮的育肥猪相比，采食20％复合菌发酵饲料的育肥猪具有较高的末重、平均日增重，同时具有较低的料重比和饲料成本，但差异均不显著(P>0.05)。2.胴体性状指标宰前活重、胴体重、屠宰本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种复合菌制剂，其特征在于，由唾液乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌组成。

【技术特征摘要】
1.一种复合菌制剂，其特征在于，由唾液乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌组成。2.如权利要求1所述的复合菌制剂，其特征在于，所述复合菌制剂中，益生菌的总数量1×109～2.94×109cfu/g；3.如权利要求1或2所述的复合菌制剂，其特征在于，所述复合菌制剂中，唾液乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌的质量比为2：2：1。4.权利要求1或2或3所述的复合菌制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取唾液乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌分别接种于MRS培养基、BPY培养基、YPD培养基中活化后，取活化菌液分别接种于发...

【专利技术属性】
技术研发人员：毛胜勇，陆扬，刘军花，张铮，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32