具有改善的结合、功能和安全性特征的抗CD154抗体及其在人免疫治疗中的用途制造技术

本文提供改善的抗‑CD154抗体，其具有改善的治疗效能、体内半衰期和消除的FcR结合和/或补体结合/活化。本文公开了这些抗体用于诱导耐受性和治疗免疫疾病(其包括自身免疫性、炎症、移植受体、纤维化和过敏性病症)的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有改善的结合、功能和安全性特征的抗CD154抗体及其在人免疫治疗中的用途1.背景相关申请本专利技术要求2015年7月14日提交的美国临时申请系列号62/192,269；2015年7月28日提交的美国临时申请系列号62/197,966；和2016年1月11日提交的美国临时申请系列号62/277,201的优先权。这些临时申请的每个的内容通过提述以其整体并入。专利技术的领域本专利技术涉及具有减小的毒性和功能特性的改善的抗CD154(CD154)抗体及它们在免疫治疗，尤其是炎性病症、过敏、自身免疫、移植和癌症的治疗中的用途。特别地，本专利技术提供具有改善的亲和力和功能活性的高亲和力抗CD154抗体，其在体内不引起血栓形成和凝固反应，并且其引起希望的治疗特性，如诱导免疫耐受性和阻断体液免疫。专利技术的领域本专利技术涉及具有减小的毒性和功能特性的改善的抗CD154(CD154)抗体及它们在免疫治疗，尤其是炎性病症、过敏、自身免疫、移植和癌症的治疗中的用途。特别地，本专利技术提供具有改善的亲和力和功能活性的高亲和力抗CD154抗体，其在体内不引起血栓形成或凝血反应，并且其引起希望的治疗特性，如诱导免疫耐受性和阻断体液免疫。相关技术的说明CD40L(CD154)在小鼠、非人灵长目动物(NHP)和人的自身免疫、移植排斥和其他免疫相关的疾病中是高度有效和有价值的治疗靶标。在很多II期临床试验中，显示αCD154在体内有效地阻断CD154的活性并且改善疾病。αCD154在其对免疫反应的影响方面不同于所有其他治疗；它是可诱导功能免疫耐受性的仅有治疗之一，如在小鼠和猴子中所证明的。在小鼠中，实际上所有自身免疫性疾病模型可使用αCD154治疗有效地改善(Noelle,R.J.,Mackey,M.,Foy,T.,Buhlmann,J.andBurns,C.,“CD40anditsligandinautoimmunity”.AnnNYAcadSci1997.815:384-391；Mackey,M.F.,Barth,R.J.,Jr.andNoelle,R.J.,“TheroleofCD40/CD154interactionsinthepriming,differentiation,andeffectorfunctionofhelperandcytotoxicTcells”,JLeukocBiol1998.63:418-428；Noelle,R.J.,“CD40anditsligandincell-mediatedimmunity”.AgentsActionsSuppl1998.49:17-22；和Quezada,S.A.,Jarvinen,L.Z.,Lind,E.F.andNoelle,R.J.,“CD40/CD154InteractionsattheInterfaceofToleranceandImmunity”.AnnuRevImmunol2004.22:307-328)，观察到长期缓解。在NHP中，使用由αCD154组成的短程治疗可获得永久异体移植耐受性(Kenyon,N.S.,Chatzipetrou,M.,Masetti,M.,Ranuncoli,A.,Oliveira,M.,Wagner,J.L.,Kirk,A.D.,Harlan,D.M.,Burkly,L.C.andRicordi,C.,“Long-termsurvivalandfunctionofintrahepaticisletallograftsinrhesusmonkeystreatedwithhumanizedanti-CD154”.ProcNatlAcadSci.,USA1999.96:8132-8137；Kirk,A.D.,Burkly,L.C.,Batty,D.S.,Baumgartner,R.E.,Berning,J.D.,Buchanan,K.,Fechner,J.H.,Jr.,Germond,R.L.,Kampen,R.L.,Patterson,N.B.,Swanson,S.J.,Tadaki,D.K.,TenHoor,C.N.,White,L.,Knechtle,S.J.andHarlan,D.M.,“TreatmentwithhumanizedmonoclonalantibodyagainstCD154preventsacuterenalallograftrejectioninnonhumanprimates”.NatMed1999.5:686-693)。并且，人的II期临床试验表明αCD154在SLE、多发性硬化症(见初步数据)和特发性血小板减少(Sidiropoulos,P.I.andBoumpas,D.T.,“Lessonslearnedfromanti-CD154treatmentinsystemiclupuserythematosuspatients”,Lupus2004.13:391-397)中是有效的(Sidiropoulos,P.I.andBoumpas,D.T.,“Lessonslearnedfromanti-CD154treatmentinsystemiclupuserythematosuspatients”,Lupus2004.13:391-397)。因此，αCD154是独特的药物，其允许具有长期临床益处的短期干预。它的失败不在于功效，而是由于未预料到的毒性。在二十世纪90年代早期艾迪制药和百健公司(IDECPharmaceuticalsandBiogenInc.)(现在的BiogenIdec)推出了两个不同的αCD154单克隆抗体进入多个I/II期临床试验。由IDEC(IDEC-131)开发的抗体是在达特茅斯学院(DartmouthCollege)开发的源自鼠抗人CD154抗体的人源化的IgG1。该抗体和人源化的变体在美国专利6,001,358；6,440,418；6,506,383；7,074,406；和7,122,187中公开，其内容通过提述全部并入本文。虽然早期适应症证明药物是高度有效的，但是另外的抗CD154的毒性阻滞了持续的临床开发。在该实验中，观察到的毒性包括诱导患者的血栓栓塞事件。基于毒性问题，暂停所有实验，并且致力于重新改造mAb以维持功效并减小毒性。虽然已经实现了减小的毒性，但是αCD154mAb的功效和耐受诱导能力已经显著降低(Ferrant,J.L.,Benjamin,C.D.,Cutler,A.H.,Kalled,S.L.,Hsu,Y.M.,Garber,E.A.,Hess,D.M.,Shapiro,R.I.,Kenyon,N.S.,Harlan,D.M.,Kirk,A.D.,Burkly,L.C.andTaylor,F.R.,“ThecontributionofFceffectormechanismsintheefficacyofanti-CD154immunotherapydependsonthenatureoftheimmunechallenge”.IntImmunol2004.16:1583-1594)。百健艾迪公司(Biogen-Idec)和UCB最近报道了据报道安全性改善的抗CD154抗体的开本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人源化的抗人CD154抗体，其包含(i)可变重链多肽，其包含具有选自图2A‑2C所示的SEQ ID NO:15、17和18的序列的多肽，或由具有选自图2A‑2C所示的SEQ ID NO:15、17和18的序列的多肽组成，和(ii)可变轻链多肽，其包含具有选自图2A‑2C所示的SEQ ID NO:20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30和31的序列的多肽，或由具有选自图2A‑2C所示的SEQ ID NO:20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30和31的序列的多肽组成，条件是所述人源化的抗人CD154抗体不包含SEQ ID NO:15的可变重链多肽和SEQ ID NO:20的可变轻链多肽。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.07.14 US 62/192,269;2015.07.28 US 62/197,966;1.一种人源化的抗人CD154抗体，其包含(i)可变重链多肽，其包含具有选自图2A-2C所示的SEQIDNO:15、17和18的序列的多肽，或由具有选自图2A-2C所示的SEQIDNO:15、17和18的序列的多肽组成，和(ii)可变轻链多肽，其包含具有选自图2A-2C所示的SEQIDNO:20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30和31的序列的多肽，或由具有选自图2A-2C所示的SEQIDNO:20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30和31的序列的多肽组成，条件是所述人源化的抗人CD154抗体不包含SEQIDNO:15的可变重链多肽和SEQIDNO:20的可变轻链多肽。2.一种人源化的抗人CD154抗体，其包含(i)可变重链多肽，其包含具有如图1A-C所示的SEQIDNO:1的序列的多肽，或由具有如图1A-C所示的SEQIDNO:1的序列的多肽组成，和(ii)可变轻链多肽，其包含具有图1A-C所示的SEQIDNO:2的序列的多肽，或由具有图1A-C所示的SEQIDNO:2的序列的多肽组成。3.权利要求1或2的抗人CD154抗体，其包含IgG1、IG2、IgG3或IgG4恒定区，所述恒定区缺乏结合C1Q和与FcγR2和/或FcγR3结合的能力。4.权利要求1或2的抗人CD154抗体，其包含人IgG1恒定区，所述恒定区缺乏结合C1Q和与FcRγ2和/或FcRγ3结合的能力。5.权利要求4的人源化的抗人CD154抗体，其中，所述人IgG1恒定区包含E269R和K322A突变(根据Kabat编号)。6.权利要求1-5中任一项的人源化的抗人CD154抗体，其包含图1A-C所示的SEQIDNO:3和SEQIDNO:2的IgG1轻链和重链恒定区。7.权利要求1-6中任一项的人源化的抗人CD154抗体，其中，所述抗体是IgG1同种型，并且使所述抗体的Fc区进一步突变以引入影响效应器功能的至少一个其他突变，如损害FcRn结合的突变，损害或消除糖基化的突变，或损害抗体结合FcR如FcγR2或FcγR3或另一个FcR的能力或损害与补体结合的能力的另一个突变。8.权利要求1-7中任一项的人源化的抗人CD154抗体，其中，所述抗体是IgG1同种型，并且使所述抗体的Fc区突变以进一步引入E233P和/或D265A突变或表1、2或3中鉴定的任意Fc突变。9.权利要求1-8中任一项的人源化的抗人CD154抗体，其中，所述抗体是IgG1同种型，并且使所述抗体的Fc区突变以引入E233P突变。10.权利要求1-9中任一项的人源化的抗人CD154抗体，其中，使所述抗体的Fc区进一步突变以引入一个或多个改善体内半衰期的其他突变。11.一种药物组合物，其包含治疗或预防有效量的至少一个根据权利要求1-10中任一项的人源化的抗人CD154抗体。12.权利要求11的组合物，其进一步包含抗原、细胞、组织或器官。13.权利要求12的组合物，其中，所述抗原是自身抗原、变应原、炎性剂、药物或非HLA匹配的(同种异体)或异种(非人)供体细胞。14.一种免疫抑制或免疫治疗的方法，其使用根据权利要求1-13中任一项的抗体或组合物。15.一种通过施用根据权利要求1-13中任一项的抗体或组合物来治疗患有过敏性、炎性或自身免疫性病症的受试者或移植受体的方法。16.一种在移植可任选地经遗传改造的供体组织、器官或细胞之前、同时或之后通过施用根据权利要求1-13中任一项的抗体或组合物来治疗或预防受试者中的GVHD的方法。17.权利要求16的方法，其中，所述细胞是CAR-T或NK细胞。18.一种通过施用根据权利要求1-13的抗体或组合物来引出耐受性或延长的抗原特异性免疫抑制的方法。19.权利要求18的方法，其中，所述方法进一步包括施用细胞、抗原、组织或器官，其包含针对其会引发耐受性或延长的免疫抑制的抗原。20.一种基因、细胞、组织或器官治疗的方法，其包括施用根据权利要求1-13中任一项的抗体或组合物。21.权利要求15的方法，其中，治疗的状况选自银屑病、类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、卵巢炎、狼疮或SLE、糖尿病、IBD、克罗恩病(Crohn’sdisease)、ITP、甲状腺炎、类风湿性关节炎、重症肌无力、系统性红斑狼疮、格雷夫斯病(Graves'disease)、特发性血小板减少性紫癜、溶血性贫血、糖尿病、炎性肠病、克罗恩病、多发性硬化症、银屑病、药物诱导的自身免疫性疾病或药物诱导的狼疮。22.一种处理用于在细胞治疗或器官或骨髓移植中使用的骨髓、器官或免疫细胞的方法，其包括与根据权利要求1-13中任一项的抗体或组合物一起温育所述骨髓、器官、组织或免疫细胞。23.权利要求22的方法，其中，治疗的骨髓、组织、器官或免疫细胞包含供体和/或受体T细胞。24.一种在有此需要的患者中诱导耐受性而不引起血栓形成事件的方法，其包括向患者施用有效量的根据权利要求1-13中任一项的抗体或组合物。25.权利要求24的方法，其进一步包括施用抗原。26.权利要求25的方法，其中，抗原是自身抗原、变应原、炎性剂、药物或非HLA匹配的(同种异体)供体细胞。27.权利要求24-26的方法，其中，患者会接受或已经接受移植细胞、器官或组织。28.权利要求26的方法，其中，所述药物是生物的，如治疗抗体、受体、融合蛋白、激素、生长因子或细胞因子。29.一种通过施用有效量的根据权利要求1-13中任一项的抗体或组合物来治疗T细胞介导的自身免疫性病症的方法。30.一种通过施用有效量的根据权利要求1-13中任一项的抗体或组...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·罗思坦，R·G·E·霍尔盖特，A·赫恩，
申请(专利权)人：里姆蒙埃克斯特股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US