双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯在测定链格孢霉毒素中的应用及方法技术

本发明专利技术涉及一种双[2,4,6‑三氯苯基]草酸酯在测定链格孢霉毒素中的应用及方法，本发明专利技术采用酶联免疫分析法，利用辣根过氧化物酶催化过氧化脲氧化3‑(4‑羟苯基)丙酸，生成能发荧光的3‑(4‑羟苯基)丙酸二聚体，进而在乙腈介质中，在增强剂咪唑的参与下，同双[2,4,6‑三氯苯基]草酸酯和过氧化脲反应产生强化学发光，建立了一种简单、快速、高灵敏度的测定细交链格孢菌毒素的化学发光间接竞争免疫分析方法；该方法的半抑制浓度IC50为95.2ng/L，在12.21～1562.50ng/L范围内成良好的线性关系，最低检出限LOD为2.53ng/L，能够用于链格孢霉毒素检测。

【技术实现步骤摘要】
双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯在测定链格孢霉毒素中的应用及方法
本专利技术属于生物检测领域，涉及双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯在测定链格孢霉毒素中的应用，还涉及双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯测定链格孢霉毒素的方法。
技术介绍
链格孢霉(Alternaria)是半知菌暗色丝孢菌中重要的一类真菌，能产生70余种真菌毒素和植物毒素，称为链格孢毒素，其中细交链孢菌酮酸(TA)是唯一被美国列入有毒化学物质登记册中的链格孢毒素，TA是链格孢霉中最为重要的毒素之一，可广泛污染蔬菜、水果及谷物。虽然能产生该毒素的链格孢菌株检出率低，但产毒能力很强，其毒素水平居各种链格孢毒素之首。TA能与其它真菌毒素协同作用，产生急性毒性。由于TA在大量商业产品中都被发现，例如谷物、果汁、西红柿产品、啤酒和胡萝卜，欧洲食品安全机构(EFSA)已经公布了这些毒素的最高限量标准，而我国目前由于对此类毒素研究较少，目前没有相关的限量法规。因此，发展一种高灵敏、快速和特异的方法来实现对TA的定量检测是十分必要的。目前针对TA的精测方法主要有气-液色谱法(GLC)、气相色谱法(GC)、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)、本文档来自技高网...

【技术保护点】
双[2,4,6‑三氯苯基]草酸酯在测定链格孢霉毒素中的应用。

【技术特征摘要】
1.双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯在测定链格孢霉毒素中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述测定使用化学发光酶联免疫分析法。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述化学发光是基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯─H2O2─3-(4-羟苯基)丙酸二聚体化学发光体系。4.基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯检测链格孢霉毒素的方法，其特征在于，包括如下步骤：在酶标板中包被链格孢霉毒素抗原，封闭后用抗细交链格孢菌酮酸单克隆抗体竞争，然后加入酶标二抗孵育，加入过氧化脲与3-(4-羟苯基)丙酸混合液酶催化反应后，转移至另一白色酶标板中，加入含咪唑的过氧化脲，混匀后加入双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯乙腈溶液显色，酶标仪检测。5.根据权利要求4所述基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯检测链格孢霉毒素的方法，其特征在于：所述包被为将浓度为0.25～1.0μg/mL的BSA修饰链格孢霉毒素加入酶标板中，4℃过夜。6.根据权利要求4所述基于双[2,4,6-三氯苯基]草酸酯检测链格孢霉毒素的方法，其特征在于：所述封闭为将脱脂奶粉溶液于37℃温育1h；甩板后在滤纸上拍干，PBST洗板2次，每次3min，所述脱脂奶粉溶液为每1.0g脱脂奶粉溶于20mLPBS...

【专利技术属性】
技术研发人员：马良，潘姝历，张宇昊，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆,50