一种用于治疗过敏性哮喘的白芍总苷的制备方法及其在过敏性哮喘治疗中的应用技术

本发明专利技术涉及中医药领域，公开了一种用于治疗过敏性哮喘的白芍总苷的制备方法及其在过敏性哮喘治疗中的应用，白芍总苷的制备方法包括：1）回流提取：净选干燥白芍饮片，打碎成颗粒状，加入乙醇溶液浸泡，回流提取，过滤，合并滤液，将滤液浓缩；2）大孔树脂纯化：向浓缩液中加水，水沉，滤过，滤液加水稀释，通过大孔吸附树脂柱，水洗，弃去，继以乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，滤过，滤液加乙醇，静置，滤过，减压回收乙醇，得到白芍总苷。本发明专利技术发现单一的白芍总苷具有治疗过敏性哮喘的作用。本发明专利技术方法制备的白芍总苷纯度高，药效好。

【技术实现步骤摘要】
一种用于治疗过敏性哮喘的白芍总苷的制备方法及其在过敏性哮喘治疗中的应用
本专利技术涉及中医药领域，尤其涉及一种用于治疗过敏性哮喘的白芍总苷的制备方法及其在过敏性哮喘治疗中的应用。
技术介绍
过敏性哮喘是一种比较顽固的疾病，多在婴幼儿期发病，如果忽视治疗，可以伴随终身。大部分哮喘患者都存在过敏现象或者有过敏性鼻炎，有过敏性鼻炎的哮喘患者发病前兆会有打喷嚏、流鼻涕、鼻痒、眼痒、流泪等症状。由于症状与呼吸道感染或炎症相似，大人缺乏相关知识，往往在早期忽视治疗，也极有可能被误诊。过敏性哮喘是由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的慢性气道炎症，在易感者中此种炎症可引起反复发作的喘息、气促、胸闷和（或）咳嗽等症状，多在夜间和（或）凌晨发生，气道对多种刺激因子反应性增高。但症状可自行或经治疗缓解。近十余年来，美国、英国、澳大利亚、新西兰等国家哮喘患病率和死亡率有上升趋势，全世界约有一亿哮喘患者，已成为严重威胁公众健康的一种主要慢性疾病。中国哮喘的患病率约为1%，儿童可达3%，据测算全国约有1千万以上哮喘患者。过敏性哮喘发作前有先兆症状如打喷嚏、流涕、咳嗽、胸闷等，如不及时处理，可因支气管阻塞加重而出现哮喘，严重者可被迫采取坐位或呈端坐呼吸，干咳或咯大量白色泡沫痰，甚至出现紫绀等。但一般可自行或用自行或用平喘药物等治疗后缓解。某些患者在缓解数小时后可再次发作，甚至导致哮喘持续状态。在临床上还存在非典型表现的哮喘。如咳嗽变异型哮喘，患者在无明显诱因咳嗽2个月以上，夜间及凌晨常发作，运动、冷空气等诱发加重，气道反应性测定存在有高反应性，抗生素或镇咳、祛痰药治疗无效，使用支气管解痉剂或皮质激素有效，但需排除引起咳嗽的其他疾病。申请号为的201210440802.5专利公开了一种治疗支气管哮喘急性发作期的中药组合物，按君、臣、左、使组方。牛膝、地龙共为君药。蝉蜕、龙骨、牡蛎、龟板、白芍共为臣药。浙贝、紫石英、玄参、天冬、知母、龟板、白芍、川楝子、生麦芽为佐药。甘草为使药。全方配伍具有熄风定喘止哮的功效。该专利技术的中药组合物能够很好的平息亢逆之肝阳，舒解冲逆之肝风，缓扩肺管之挛急，使哮喘的急性发作得到迅速缓解，未见不良反应。但是上述中药为复方药，药材繁多，许多药材不易获取，且中医药药效机理复杂很难完全掌握，因此难以进行精确定量药效研究及指标确定。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种用于治疗过敏性哮喘的白芍总苷的制备方法及其在过敏性哮喘治疗中的应用。本专利技术发现单一的白芍总苷具有治疗过敏性哮喘的作用。本专利技术的具体技术方案为：一种用于治疗过敏性哮喘的白芍总苷的制备方法，包括以下步骤：1）回流提取：净选干燥白芍饮片，打碎成颗粒状，加入乙醇溶液浸泡，回流提取，过滤，合并滤液，将滤液浓缩为生药浓度为0.8-1.2g/mL的浓缩液。2）大孔树脂纯化：向浓缩液中加水，4℃以下水沉，滤过，滤液加水稀释至生药浓度为0.08-0.12g/mL，以2-10BV/h的流速通过大孔吸附树脂柱，以2-10倍柱体积水洗，弃去，继以2-10倍柱体积30-80wt％乙醇溶液洗脱，洗脱流速为2-10BV/h，收集洗脱液，减压回收乙醇，滤过，滤液加乙醇，静置，滤过，减压回收乙醇，得到白芍总苷。本专利技术人经过研究发现，单一的白芍总苷对过敏性哮喘具有很好的治疗效果。在现有技术治疗哮喘的中成药中，的确也有包含白芍的复方药，如专利201210440802.5公开的用于治疗支气管哮喘急性发作期的中药组合物就含有白芍，但是现有技术中包括该专利在内的所有含白芍并用于治疗哮喘的中成药均为复方药，白芍并复方药中并非是作为主药，必须与其他中药复配后才能起到治疗效果。如专利201210440802.5就明确记载了白芍作为臣药（中药配方分为君、臣、佐、使），其药物组合物在君、臣、佐、使的共同作用下，才具有哮喘具有较好的治疗效果。在上述专利中，白芍并非作为君药，其只是起到辅助作用。而在本专利技术中，白芍总苷可单独使用并能起到治疗效果，因此两者作用并不相同。同是选用了白芍，起到的作用却会不同。究其原因，是由于传统中药都是直接未经提取的药材，其起到药效作用的活性成分不明，白芍在该专利中添加时，白芍总苷的剂量不高，作用不明显，而其他活性成分含量却相对较高，这些高含量的活性成分能够起到佐药的作用，与君药复配后能够起到辅助作用。因此严格来说，现有技术中在治疗哮喘的药物中添加白芍是利用了白芍中的其他活性成分，并非是利用本专利技术中白芍总苷这一特定的活性成分。因此现有技术中并未公开白芍总苷能够用于治疗过敏性哮喘。作为优选，步骤1）中，加入6-10倍质量的浓度为50-90wt%的乙醇溶液浸泡1-3h。作为优选，步骤1）中，回流提取1-3次，每次1-3h。作为优选，步骤2）中，向浓缩液中加入1-3倍质量的水，4℃以下水沉24-96h。作为优选，步骤2）中，所述大孔吸附树脂柱为HPD300大孔吸附树脂柱。作为优选，步骤2）中，滤液加0.3-1倍质量乙醇，静置时间为5-48h。作为优选，步骤1）中，对打碎后的白芍在回流提取前先用其质量0.1-0.3%的十二烷基硫酸钠进行预处理。白芍粉碎程度的不同，对质量标准和药代动力学方面都存在一定的影响，对提高白芍的使用效率、节约中药资源有着重要意义。在质量标准方面，随着粉碎程度的不断增大，大黄粉碎粒径减小，目标成分提取的总含量不断增大，有利于增加有效成分的溶出度和提取率。在药代动力学方面，增加白芍的粉碎程度能够提高药物的Cmax和生物利用度，在临床用药中可减小用药量，提高疗效。虽然经粉碎后，植物细胞壁破碎，药材粒度均匀，比表面积增加，有利于化学成分的溶出，但同时也存在着杂质多、过滤难、对有效成分有吸附等问题。为此，本专利技术创新性地在药材粉末中加入十二烷基硫酸钠，本专利技术人探索发现十二烷基硫酸钠加入后可提高白芍总苷的提取率。作为优选，步骤2）中，在将滤液加入到大孔树脂柱后，水洗之前，用0.08-0.12mol/L的NaOH水溶液除杂，弃去除杂流出液。现有技术中，普遍采用纯水或低浓度乙醇溶液来进行除杂，本专利技术创新性地考察了碱性水溶液作为除杂溶剂时的杂质含量，发现用NaOH水溶液除杂时，有效成分损失率最低。打破了常规纯水或低浓度乙醇溶液的除杂方式，是后期白芍纯度显著提高的突破点和转折点。作为优选，步骤2）中，用乙醇溶液洗脱时，舍去前0.5-1BV的洗脱液后正式开始收集洗脱流出液。本专利技术打破了常规全部接取洗脱流出液的方式，创造性地对洗脱流出液进行分段接取考察，发现洗脱流出液的纯度并不稳定均一，前部分的流出液中杂质含量过多，会影响整体纯度。故采用分段收集的方式，能有效提高白芍总苷的纯度，并使得工艺稳定可行。白芍总苷在过敏性哮喘治疗中的应用，临床剂量为0.6-1.8g/天。与现有技术对比，本专利技术的有益效果是：1、本专利技术发现单一的白芍总苷具有治疗过敏性哮喘的作用。2、本专利技术方法制备的白芍总苷纯度高，药效好。附图说明图1为白芍总苷对小鼠过敏性哮喘气道高反应的影响，图2为白芍总苷对小鼠过敏性哮喘BALF液中白细胞分类的影响，图3为白芍总苷对小鼠肺组织病理和胶原沉积的影响，图4白芍总苷抑制IgE介导肥大细胞脱颗粒和β糖苷激酶释放的影响，图5为白芍总苷对肥大细胞脱颗粒过程本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于治疗过敏性哮喘的白芍总苷的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）回流提取：净选干燥白芍饮片，打碎成颗粒状，加入乙醇溶液浸泡，回流提取，过滤，合并滤液，将滤液浓缩为生药浓度为0.8‑1.2g /mL的浓缩液；2）大孔树脂纯化：向浓缩液中加水，4℃以下水沉，滤过，滤液加水稀释至生药浓度为0.08‑0.12g/mL，以2‑10BV/h 的流速通过大孔吸附树脂柱，以2‑10倍柱体积水洗，弃去，继以 2‑10倍柱体积30‑80wt％乙醇溶液洗脱，洗脱流速为2‑10BV/h，收集洗脱液，减压回收乙醇，滤过，滤液加乙醇，静置，滤过，减压回收乙醇，得到白芍总苷。

【技术特征摘要】
1.一种用于治疗过敏性哮喘的白芍总苷的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）回流提取：净选干燥白芍饮片，打碎成颗粒状，加入乙醇溶液浸泡，回流提取，过滤，合并滤液，将滤液浓缩为生药浓度为0.8-1.2g/mL的浓缩液；2）大孔树脂纯化：向浓缩液中加水，4℃以下水沉，滤过，滤液加水稀释至生药浓度为0.08-0.12g/mL，以2-10BV/h的流速通过大孔吸附树脂柱，以2-10倍柱体积水洗，弃去，继以2-10倍柱体积30-80wt％乙醇溶液洗脱，洗脱流速为2-10BV/h，收集洗脱液，减压回收乙醇，滤过，滤液加乙醇，静置，滤过，减压回收乙醇，得到白芍总苷。2.如权利要求1所述的一种用于治疗过敏性哮喘的白芍总苷的制备方法，其特征在于，步骤1）中，加入6-10倍质量的浓度为50-90wt%的乙醇溶液浸泡1-3h。3.如权利要求1或2所述的一种用于治疗过敏性哮喘的白芍总苷的制备方法，其特征在于，步骤1）中，回流提取1-3次，每次1-3h。4.如权利要求1所述的一种用于治疗过敏性哮喘的白芍总苷的制备方法，其特征在于，步骤2）中，向浓缩液中加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：寿旗扬，傅惠英，曹岗，方明笋，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33